高含量痢菌净溶液的制备

侯美如，高俊峰，冯万宇，徐馨，周庆民

（黑龙江省兽医科学研究所，黑龙江齐齐哈尔161006）

高含量痢菌净溶液的制备

侯美如，高俊峰，冯万宇，徐馨，周庆民

（黑龙江省兽医科学研究所，黑龙江齐齐哈尔161006）

通过了解痢菌净在不同溶剂及助溶剂的溶解情况，筛选并组合最佳溶剂，以制备高含量痢菌净溶液，为临床药剂开发提供参考依据。运用全波长扫描选取最适痢菌净检测波长，并建立痢菌净含量检测方法，测定不同溶剂及助溶剂对痢菌净的最大溶解量，组合形成可溶解高含量痢菌净溶液的混合溶剂。结果表明，痢菌净在373.0 nm、368.0 nm、356.0 nm、254.0 nm、241.0 nm均有吸收峰，经与其他所选溶剂及助溶剂全波长扫描图谱比较，选取373为最适检测吸收波长。建立的痢菌净含量检测方法在1.25～20 μg/mL浓度范围内，吸收度与浓度呈良好的线性关系，R2=0.9992。不同溶剂及助溶剂中，单一溶剂或助溶剂对痢菌净的溶解程度均较混合溶剂差，且以水杨酸钠效果最好，但其在350.0～500.0 nm区间有较低的吸收峰，对运用紫外分光光度法测定痢菌净含量有一定的影响，2种混合溶剂均有较好的溶解效果，混合溶剂1溶解量最大，达54.37 mg/mL。为以后痢菌净缓释药剂的开发奠定了基础。

痢菌净；溶剂；助溶剂；溶解

1试验材料

1.1仪器WT-1003H型电子天平（赛多利斯科学仪器有限公司）；ZNCL-S自能恒温磁力搅拌器（上海羌强仪器设备有限公司）；PINE-TREE帕恩特标准试剂级超纯水机（北京湘顺源科技有限公司）；UV-1900PC/UV-1901双束紫外可见分光光度计（上海佑科仪器仪表有限公司）。

1.2试剂水杨酸钠、N，N-二甲基甲酰胺、二甲亚砜、丙二醇、甘油、聚乙二醇及苯甲醇均为分析纯。

1.3对照品乙酰甲喹，中国兽医药品监察所，批号：H0111008，纯度：99.6%。

1.4样品痢菌净原粉，南通天辰药业公司。

2方法

2.1痢菌净全波长扫描取经105℃干燥恒重的痢菌净标准品用超纯水制成20 μg/mL水溶液，以超纯水为空白对照，置于1 cm石英吸收池中，用双光束紫外分光光度计在200～500 nm波长间扫描，扫描间隔1.0 nm，绘制痢菌净紫外吸收图谱，记录最大吸收峰。

2.2标准曲线的绘制利用电子天平精密称取痢菌净标准品0.027 g，置于10 mL离心管中，加纯水8.1 mL溶解，为母液备用。待完全溶解后，取36 μL痢菌净母液加水6 mL即得浓度为20 μg/mL的痢菌净溶液，并对其进行2倍倍比稀释分别得浓度为10、5、2.5、1.25 μg/mL痢菌净溶液，于“2.1”试验结果中选取最大吸收峰时波长，进行吸收度测定。

2.3溶剂、助溶剂及混合溶剂全波长扫描溶剂：N，N-二甲基甲酰胺、二甲亚砜、丙二醇、甘油、聚乙二醇及苯甲醇分别配制成浓度为40%、20%、30%、25%、20%及1%溶液。

助溶剂：取水杨酸钠25 g，置于100 mL容量瓶中，加超纯水溶解，待完全溶解后定容至刻度。

混合溶剂1、2（专利申请中）：量取混合溶剂50 mL加水定容至100 mL。

以超纯水为空白对照，将以上溶液分别置于1 cm石英吸收池中，用双光束紫外分光光度计在200～500 nm波长间扫描，绘制各药剂吸收图谱。

2.4不同溶剂及助溶剂对痢菌净的溶解程度

分别按“2.3”试验配制不同溶剂、助溶剂及混合溶剂1、2的溶液100 mL，分别加入过量的痢菌净于溶液中，使其达到饱和溶液，于室温磁力搅拌72 h，静置取上层清液，经0.22 μm有机相滤膜过滤后，用紫外分光光度计于“2.1”试验中选定的最大吸收峰来测定痢菌净在该溶剂、助溶剂或混合溶剂中的最大溶解量。

3结果

3.1痢菌净全波长扫描由吸收光谱可知在373.0 nm、368.0 nm、356.0 nm、254.0 nm、241.0 nm等处均有最大吸收峰。

3.2溶剂、助溶剂及混合溶剂全波长扫描由全波长扫描图谱可以看出波长200～350 nm处痢菌净与其他药物均有吸收值，为避免其他药物吸收对所建检测方法的影响，选取373 nm为痢菌净含量的检测波长。

3.3标准曲线的绘制将以上数据以痢菌净浓度为X（μg/mL）轴，吸光值为Y（Abs）轴进行回归分析，其回归曲线见图1。

图1痢菌净标准曲线

回归方程为：Y=0.0488XR2=0.9992

试验结果表明，在1.25～20 μg/mL浓度范围内，吸收度与浓度呈良好的线性关系。

3.4不同溶剂及助溶剂对痢菌净的溶解程度

将检测吸光度值代入“3.2”所得方程，其不同溶剂及助溶剂对痢菌净的溶解量见表1。

由表1可知，混合溶剂1对痢菌净的溶解能力最大，为54.37 mg/mL，单一溶剂或助溶剂中水杨酸钠溶解效果最好，可达35.69 mg/mL，但均较3种混合溶剂少。

表1不同溶剂或助溶剂痢菌净的最大溶解量

4讨论

4.1对痢菌净在200～500 nm全波长扫描结果，共有5个吸收峰，分别为373.0 nm、368.0 nm、356.0 nm、254.0 nm、241.0 nm，241.0 nm及254.0 nm较高，373.0 nm、368.0 nm及356.0 nm较低，均可单独作为检测波长使用，实践中应结合所配伍药品的最大吸收峰来选取特定的检测波长。

4.2对常用溶剂、助溶剂及混合溶剂的全波长扫描，仅水杨酸钠在350.0～500.0 nm区间有较低波峰的干扰，其他仅在200.0～350.0 nm区间处有吸收曲线且吸收数值较高，混合溶剂也未显示在350.0～500.0 nm处有吸收峰。为此，373.0 nm将作为痢菌净检测时的最佳检测波长。

4.3本试验在选定的检测波长373.0 nm绘制痢菌净水溶液标准曲线，其在1.25～20 μg/mL有良好的线性关系，R2为0.9992，在一定范围内吸光度值与浓度符合比尔-郎伯尔定律。

4.4单一溶剂或助溶剂对痢菌净的溶解程度均较混合溶剂差，且以水杨酸钠效果最好，但其在350.0～500.0 nm区间有较低的吸收峰，对运用紫外分光光度法测定痢菌净含量有一定的影响，本试验同时也运用40%乙醇溶液代替纯水来配制不同溶剂及助溶剂，观察对痢菌净的溶解情况，其结果显示，会大幅度提升痢菌净的溶解量，二甲亚砜、苯甲醇、甘油、聚乙二醇、丙二醇、N，N-二甲基甲酰胺及水杨酸钠可分别形成浓度为14.55 mg/mL、19.80 mg/mL、12.73 mg/mL、14.26 mg/mL、16.01 mg/mL、29.74 mg/mL及46.18 mg/mL。2种混合溶剂均有较好的溶解效果，混合溶剂1溶解量最大，达54.37 mg/mL。为以后痢菌净缓释药剂的开发奠定了基础。

［1］中国兽药典委员会.中华人民共和国兽药规范（一部，1992年版）.北京：中国农业出版社，1-2，附16.

［2］中国兽药典委员会编.兽药手册（第3版）.北京：中国农业出版社，1992，96-97.

［3］李荣誉，王红霞.利用助溶性辅料制备2%痢菌净注射液的研究［J］.河南畜牧兽医，1999，6（20）：7-9.

S859.7911H10N2O3），对牛、猪细菌性肠炎及猪短螺旋体引起的痢疾均有良好的疗效［1-2］，但因其水溶性较差［3］，难以制备高浓度药液，使其剂型较为单一，生物利用率低，影响了该药物在临床上的使用。为此，本试验选取多种常用溶剂、助溶剂及混合溶剂，为以后该药剂高浓度溶液的配制提供参考依据。

B

0529-6005（2016）08-0113-03痢菌净又名乙酰甲喹（C

2015-05-20

侯美如（1985-），女，助理研究员，硕士，主要从事动物疫病防控工作，E-mail：houmeiru168@126.com

周庆民，E-mai：ssyzqm@163.com