黑龙江省扎龙自然保护区丹顶鹤食源地淡水鱼囊蚴的初步检测研究

王丽坤，高俊峰，崔宇超，杨淑萍

（黑龙江省兽医科学研究所，黑龙江齐齐哈尔　161000）



黑龙江省扎龙自然保护区丹顶鹤食源地淡水鱼囊蚴的初步检测研究

王丽坤，高俊峰，崔宇超，杨淑萍

（黑龙江省兽医科学研究所，黑龙江齐齐哈尔161000）

为保护丹顶鹤健康生长、繁衍生息，保证扎龙自然保护区自然生态的和谐发展，对保护区周边淡水鱼进行随机采样，解剖，通过直接压片和人工消化两种方法进行吸虫囊蚴检验。通过检测发现丹顶鹤有通过食用生鱼感染棘口吸虫的风险，并指出每年的4—7月份是扎龙自然保护区丹顶鹤寄生虫病防控的关键时期。检测结果为丹顶鹤寄生虫病的防治提供了参考依据。

丹顶鹤；棘口吸虫；囊蚴；检验方法；防控措施

扎龙自然保护区位于黑龙江省西部，松嫩平原乌裕尔河流域下游。乌裕尔河为扎龙自然保护区内的主要河流。乌裕尔河无明显河床，河水蔓延形成广阔的芦苇沼泽地带。芦苇湖沼中生长着鲤鱼、鲫鱼、泥鳅及各种蚌螺。丰富的鱼类资源是鹤类的良好饲料。目前，保护区内拥有鸟类150多种，其中鹤类12种，国家级稀有保护珍禽15种。本次实验在了解保护区内的鱼类易感寄生虫病病原种类和流行病学调查的前提下，明确丹顶鹤寄生虫病的感染源，并为丹顶鹤寄生虫病的防治提供依据，从而降低丹顶鹤寄生虫病的发病率，提高了扎龙自然保护区的珍禽生存率，保障乌裕尔河流域湿地生态环境的健康发展。

1　材料与方法

1.1样品采集

扎龙自然保护区在夏季每天定时放飞丹顶鹤两次。放飞过程中，丹顶鹤着落于乌裕尔河流域湿地，自行采食水内人工投入的小鱼。饲喂鹤的鱼是从不同地点采购的，包括周边各县区的小鱼。因此，本研究按不同季节，采集多个地点和品种的鱼进行检测。

检测用鱼在春夏秋三季采集，即4月份到9月份，每月采集1～3次。检验的鱼种类共有7种，包括船钉子、拉氏秽（俗称柳根鱼）、麦穗鱼、鲫鱼、葫芦籽、老头鱼、黄瓜香等，数量316尾。这些鱼采自于扎龙自然保护区丹顶鹤的食源地：龙湖、土木柯、嫩江流域和富裕等地。

同时，在7—8月份，从丹顶鹤的食源地，采集丹顶鹤粪样，装入自封袋中（每个粪样不少于5 g），编号和记录采集信息，实验室4 ℃冰箱内保存待检。

1.2仪器与试剂

电子天平（常州万泰天平仪器有限公司）；台式离心机（上海安亭科学仪器厂）；显微镜（Olympus，BH-2）。其它仪器和试剂包括：冰箱、托盘、剪刀、锥形瓶、胃蛋白酶粉、盐酸、生理盐水、空气浴振荡器（哈尔滨市东联电子技术开发有限公司制造，HZQ-C）、载玻片、盖玻片等。

1.3检测方法

1.3.1直接压片镜检法。将鱼样按种类摆放在托盘中，对每尾鱼，选择不同部位的肌肉，剪成米粒大小，置载玻片上压片镜检。先低倍镜下查找囊蚴，再用高倍镜复检。记录囊蚴数量及囊蚴感染部位。

1.3.2胃蛋白酶消化法。将整条鱼的鱼肉剪碎，放入锥形瓶中，按照1：10的比例，倒入配置好的人工消化液，放入摇床，37 ℃进行消化，数次水洗，取沉淀物镜检，记录检出囊蚴数量。

1.3.3粪样水洗沉淀法。称取5 g丹顶鹤新鲜粪样，放入小烧杯中，加入清水至满杯，反复倾倒，水洗沉淀，至上清液清亮；弃去上清液，用吊环蘸取底层沉淀放至载玻片上，在显微镜下由低倍到高倍观察吸虫囊蚴。

2　结果

2.1感染率

经检验，不同鱼种类的吸虫囊蚴感染率由高到低的顺序依次为：鲫鱼＞葫芦籽＞柳根＞川丁子。在其它种类的鱼肌肉内，未检出囊蚴。

2.2囊蚴种类

依据检测统计结果，在鱼肌肉内发现3种吸虫囊蚴（图1），其中一种确定为可感染禽类的棘口吸虫囊蚴。同时在丹顶鹤的粪样中也检出棘口吸虫囊蚴。

图1　鱼肌肉内检到的3种囊蚴形态

3　分析与讨论

棘口吸虫的第一中间宿主为淡水螺类，毛蚴侵入螺体后经胞蚴和2代雷蚴阶段后发育成尾蚴。棘口吸虫的第二中间宿主包括淡水螺、淡水鱼或蛙类。人或动物因食入含囊蚴的中间宿主而感染。

鱼是棘口吸虫囊蚴的携带者。鹤食用携带囊蚴的生鱼，就会导致棘口吸虫的感染。丹顶鹤常见的肠道寄生虫包括棘口吸虫和球虫。棘口吸虫的成虫主要寄生于禽类的大肠和小肠内。棘口吸虫偶尔感染其它动物，包括人，可对肠黏膜造成损伤，引起肠黏膜发炎，甚至出血、下痢，大量寄生时可对禽类造成严重的危害，对雏禽影响更大。

同时，当放飞丹顶鹤的时候，鹤站立于水塘排泄粪便，卵囊随粪便排出，含有吸虫卵囊的鹤粪就污染至水域。棘口吸虫卵囊在水中经10天左右发育成毛蚴，被淡水螺食入。淡水螺排出尾蚴，被螺及鱼虾吃入，丹顶鹤再食入携带吸虫囊蚴的鱼虾，形成循环传播。

据已报道的鱼类寄生虫检验技术及一些文献报道［1-2，5-7］，扎龙自然保护区周边乌裕尔河流域湿地内的淡水鱼最易感染寄生虫的时间为春夏之交至深秋，也就是从4月下旬开始有囊蚴感染，在7月份，也就是本地区的盛夏季节，感染率上升，达到年度吸虫感染的最高峰。9月份天气转凉，寄生虫感染率开始下滑。所以，每年4月至9月期间，选取有效的吸虫预防治疗药物，辅以补充营养、增强体质的药物，对丹顶鹤进行强身健体，可有效防止寄生虫病的侵袭，使扎龙自然保护区的丹顶鹤健康成长。尤其是7、8月份，这是鱼类寄生虫感染率的高峰期，更要加大管理力度，制定严格的综合防控措施。

本调查尚属初步研究。对鱼体内检出的囊蚴，有待进一步确定虫种类别，以便制定更详尽的寄生虫防治计划，确保丹顶鹤免受寄生虫病的危害，使其能够健康生长，繁衍生息。

［1］ Hiraga T，Sakamoto H，Nishikawa S，et al. Vertebral Formula in Red-Crowned Crane（Grus japonensis）and Hooded Crane（Grus monacha）［J］. Vet Med Sci，2014，76（4）：503-508.

［2］ 吴庆明，王文峰，徐铁林，等. 扎龙自然保护区人工辅助繁育丹顶鹤的保护实践［J］. 动物学杂志，2013，48（5）：712-716.

［3］ 汪明. 兽医寄生虫学［M］. 北京：中国农业出版社，2004：293.

［4］ 左仰贤. 球虫学：畜禽和人的球虫与球虫病［M］. 天津：天津科学技术出版社，1992：52-80.

［5］ Quiroz-Castañeda R E，Dantán-González E . Control of Avian Coccidiosis：Future and Present Natural Alternatives［J］. Biomed Res Int，2015：430610. DOI：10.1155/2015/430610.

［6］ 李红梅，朱慧慧，诸廷俊，等. 两种检测华支睾吸虫囊蚴方法的比较［J］. 国际医学寄生虫病杂志，2012，39（3）：152-154.

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（责任编辑：朱迪国）

The Detection of Freshwater Fish Metacercaria in the Foraging Habitat of Red Crowned Crane in Zhalong Nature Reserve of Heilongjiang Province

Wang Likun，Gao Junfeng，Cui Yuchao，Yang Shuping
（Heilongjiang Veterinary Science Institute，Tsitsihar，Heilongjiang 161000）

For protecting the healthy growth and breeding of the Red Crowned Crane，as well as ensuring harmonious development of the natural ecological of Zhalong Nature Reserve，the freshwater fi sh in the reserve surroundings was randomly collected and dissected in this study. All fi sh samples were tested by direct compression method and artifi cial digestion method（pepsin-HCL）. The results showed that there were risk of infecting the red-crowned cranes with echinostomiasis through eating raw fi sh and the critical period of parasitic disease control and prevention were from April to July in Zhalong Nature Reserve.The study provides reference and basis for the prevention and treatment of parasitic diseases of red-crowned cranes.

red-crowned cranes；echinostoma；metacercaria；test method；prevention and control measures

S941.5

B

1005-944X（2016）09-0036-03

10.3969/j.issn.1005-944X.2016.09.011