宋天增 ,曲 久 ,任子利 ,巴 贵 ,索朗格列 ,珠 多 ,益西多吉
(1.西藏自治区农牧科学院畜牧兽医研究所,西藏 拉萨 850009;2.西藏日土县原种场,西藏 日土 859700;3.西藏农牧学院动物科学学院,西藏 林芝 860000)
藏西北绒山羊血液γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT)指标偏高原因调查
宋天增1,曲 久2,任子利3,巴 贵1,索朗格列2,珠 多2,益西多吉1
(1.西藏自治区农牧科学院畜牧兽医研究所,西藏 拉萨 850009;2.西藏日土县原种场,西藏 日土 859700;3.西藏农牧学院动物科学学院,西藏 林芝 860000)
为阐明藏西北绒山羊血液γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT)指标偏高原因,选取血液γ-GT指标偏高的藏西北绒山羊个体,利用电子血压计测定其血压,采用试剂盒法和肝脏穿刺等方法对其进行乙型肝炎、戊型肝炎、肝包虫病、胆结石等疾病的诊断,同时观察应激因素对其γ-GT指标的影响,研究血压、相关疾病及应激因素与藏西北绒山羊血液γ-GT指标偏高的相关性。结果表明,在血清γ-GT指标偏高的25只实验羊中,有4只血压高,有11只呈HEV-IgG阳性,无HBV抗原阳性羊只,有12只呈肝棘球蚴(包虫)抗体阳性,有3只胆囊胆管结石,应激因素刺激后有7只羊血清γ-GT指标偏高。综上提示,戊型肝炎病毒、肝棘球蚴(包虫)所引起的肝炎、胆结石以及应激因素等是引起藏西北绒山羊血液γ-GT指标偏高的主要原因。
绒山羊;γ-谷氨酰转肽酶;肝包虫病;戊型肝炎
γ-谷氨酰转肽酶(gamma-glutamyl transpeptidase,γ-GT)在生物体内分布广泛,从细菌到哺乳动物体内都有它的存在。γ-GT在动物的肾内最多,其次为胰和肝,胚胎期则以肝内最多,在肝内主要分布于肝细胞浆和肝内胆管上皮中,正常动物血清中的γ-GT主要来自肝脏。该酶能催化转肽反应、自转肽反应和γ-谷氨酰基的水解反应。γ-GT最初只是用来反映乙醇摄入和肝脏疾病的指标,在体内的主要功能为参与谷胱甘肽的代谢,其在生物体内能够催化转移谷氨酰基形成谷氨酰循环,通过这一循环可以为细胞内谷胱甘肽的再合成提供原料氨基酸[1]。γ-GT在急性肝炎、慢性活动性肝炎及肝硬变失代偿时仅轻中度升高,但当发生阻塞性黄疸时,该酶因排泄障碍而逆流入血。发生原发性肝癌时,该酶在肝内合成亢进,可引起血中转肽酶显著升高,甚至达到正常的10倍以上。γ-GT在临床检测中可作为生物标志物,已经作为肝脏和其他器官疾病的常规检测指标[2]。
肝内或肝外胆管梗阻时,可出现γ-GT的显著升高;部分病毒性肝炎,坏死区邻近的肝细胞γ-GT合成亢进,引起血清γ-GT升高。γ-GT水平与血压水平呈正相关[3],肝癌、急性肝炎患者肝功能指标中γ-GT升高明显[4]。血清γ-GT在糖尿病周围神经病变患者体内的水平明显升高,可能通过氧化应激的机制参与糖尿病周围神经病变的发生[5]。
表1 实验羊只血压、相关疾病检测结果及应激因素对其血液γ-GT指标的影响 只
笔者在2015年10月对成年藏西北 (日土县)绒山羊的血液生理生化指标进行测定时发现,三成以上成年羊血清中γ-GT指标偏高。为探明藏西北绒山羊血液γ-GT指标偏高原因,该研究选取血液γ-GT指标偏高的藏西北绒山羊个体,采用试剂盒法和肝脏穿刺等方法对其进行戊型肝炎、肝包虫病、胆结石等疾病的诊断,同时观察应激因素对其γ-GT指标的影响,研究相关疾病及应激因素与藏西北绒山羊血液γ-GT指标偏高的相关性,旨在为藏西北绒山羊的健康养殖提供参考。
1.1 实验动物及其分布地区概况 选取日土县原种场γ-GT指标偏高、隔夜空腹的成年日土白绒山羊25只。日土白绒山羊中心产区主要分布于阿里地区日土县的各个乡村。日土县属半农半牧县,地处东经 78°7′~82°4′,北纬 32°7′~35°4′,平均海拔4500m左右,被称为“世界屋脊的屋脊”。日土县土壤属山地灌丛草原土壤区,主要分布在海拔4000 m左右的灌丛草原上,在4200~4700m高山草原土比重较大,土壤的发育有落叶灌丛和草本植物参与,山地灌丛草原土和高山草原土部分开辟为耕地。日土县地处高原亚寒带季风半干旱气候区,具有气压低、辐射强、寒冷干燥、降水稀少等气候特点。最冷月平均气温-22.1℃,最热月平均气温13.6℃,无霜期95d,年日照时数3370.9h,日照百分率76%,年降水量73.4mm,年蒸发量2456.3mm,年平均风速3.2 m/s。
1.2 主要试剂 乙型肝炎病毒ccc DNA (HBV-cccDNA)核酸检测试剂盒,购自上海江莱生物科技有限公司;羊戊型肝炎病毒IgG(HEV-IgG)ELISA试剂盒,购自卡迈舒(上海)生物科技有限公司;羊棘球蚴(包虫)间接ELISA检测试剂盒购自重庆澳龙生物制品有限公司。
1.3 仪器设备 Sysmax XE-2100全自动血液分析仪,由成都贝斯达仪器有限公司提供;TG16-W台式微量高速离心机,购于湘仪离心机仪器有限公司;KR-1288V动物B超机,购于徐州市凯尔医学仪器有限公司;欧姆龙HEM-6121电子血压计,欧姆龙(大连)有限公司生产。
1.4 实验羊只的筛选 利用全自动血液自动分析仪测定羊只的血清γ-GT指标,以筛选血清γ-GT指标偏高的羊只。
1.5 血压测量 将筛选的实验羊只于自然站立条件下保定,安静20min以上,利用电子血压计测定其血压。
1.6 戊型肝炎病毒 (HEV)IgG、乙型肝炎病毒(HBV)ccc DNA及肝棘球蚴 (包虫)抗体的测定采集隔夜空腹的实验羊颈静脉非抗凝血样5mL,温室下倾斜放置30min,3500 r/min离心20min,分离血清,参照羊戊型肝炎病毒(HEV)IgG ELISA试剂盒说明书,测定实验羊只血清HEV-IgG含量。按照乙型肝炎病毒 (HBV-cccDNA)DNA核酸检测试剂盒说明书检测实验羊只血清HBV抗原。在腹腔镜的监视下直接穿刺,获取肝脏标本2 mg,参照羊棘球蚴(包虫)间接ELISA检测试剂盒说明书测定肝包虫抗体。
1.7 胆结石检查 利用动物B超机检查实验羊只胆管和胆囊内是否有强回声团,是否随体位改变而移动以及其后是否有声影。
1.8 应激试验 给予隔夜空腹的实验羊惊恐刺激后,立即采集其颈静脉非抗凝血样5mL,温室下倾斜放置30min,3500 r/min离心20min,分离血清于-20℃保存备用。
由表1可知,在血清γ-GT指标偏高的25只实验羊中,有4只血压高,有11只呈HEV-IgG阳性,无HBV抗原阳性羊只,有12只呈肝棘球蚴(包虫)抗体阳性,有3只胆囊胆管结石,应激因素刺激后有7只羊血清γ-GT指标偏高。应激反应引起血清γ-GT指标偏高的7只羊中,有4只为高血压个体,有2只呈HEV-IgG阳性,有1只呈肝棘球蚴(包虫)抗体阳性。有5只羊同时呈HEV-IgG阳性和肝棘球蚴(包虫)抗体阳性。
该研究结果表明,有4只血压高的实验羊其血清γ-GT指标偏高,但目前γ-GT参与血压调节的机制尚不完全清楚,因此该研究不能推断血压高与血清γ-GT指标偏高之间的必然联系。结合羊群死亡个体较少的情况,推测该研究中HEV-IgG阳性的个体患有慢性肝炎,慢性肝炎可逐步引起肝细胞坏死,坏死区邻近的肝细胞γ-GT合成亢进,进而引起血清γ-GT升高。若坏死区和肝棘球蚴(包虫)囊引起肝内或肝外胆管梗阻,可引起γ-GT排泄受阻,随胆汁返流入血,导使血清γ-GT上升。由于条件所限,无法诊断25只血清γ-GT指标偏高的绒山羊是否患有肝癌和糖尿病。
该研究发现,血清γ-GT偏高的个体中有一定数量的羊只呈HEV抗体和肝棘球蚴(包虫)抗体阳性。HEV和肝包虫病为人兽共患病,羊可能作为HEV和肝棘球蚴(包虫)的贮存宿主,在人类病毒性 肝 炎[6-7]和 肝 包 虫 病[8-9]流 行 病 学 中 具 有 重 要 地位,对于公共卫生和食品安全等构成潜在威胁。为减少HEV和肝包虫的感染、发病风险,降低这两种疾病对人类健康的危害,在今后的生产中应对HEV感染和肝包虫病进行及时的检测并且采取有效的防控措施。
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Investigation of Etiology of High Content γ-GT in Blood in Northwest Tibet Cashmere Goat
SONG Tian-zeng1,Qujiu2,REN Zi-li3,Bagui1,Suolanggelie2,Zhuduo2,Yixiduoji1
(1.Institute of Animal Husbandry and Veterinary Medicine,Tibet Academy of Agricultural and Animal Husbandry Sciences,Lhasa 850009,China;2.Rutog County Original Breeding Farm, Rutog 859700,China;3.College of Animal Science, Tibet Agricultural and Animal Husbandry College,Nyingchi 860000,China)
The aim of the present study was to understand the etiology of high content γ-GT in blood in northwest Tibet Cashmere Goat.In order to assess the association of the blood pressure,related diseases and stress factor with the high content γ-GT in blood in northwest Tibet Cashmere Goat,the goat individuals with high content γ-GT in blood were selected;the electronic sphygmomanometer was used to determine their blood pressure;the diseases of hepatitis B,hepatitis E,hepatic echinococcosis and cholelithiasis were diagnosed by ELISA kit method and liver biopsy;the stress test was carried out to observe the effect of the stress on the blood content of γ-GT.The results revealed that amongst the 25 selected goats with high content γ-GT in blood,4 of them had high blood pressure,11 of them were HEV-IgG positive,none of them were HBV antigen positive,12 of them were Echinococcos granulsus antibody positive,3 of them were subjected to cholelithiasis and choledocholithiasis,and 7 goats had high content γ-GT in blood after the stimulation of stress factor.The results suggest that the hepatitis and cholelithiasis caused by infections of hepatitis E virus and Echinococcos granulsus as well as the stress factor are the main etiology of high content γ-GT in blood in northwest Tibet Cashmere Goat.
cashmere goat;γ-GT;echinococcosis;hepatitis E
S858.276.5
A文章顺序编号:1672-5190(2016)08-0013-02
2016-07-20
项目来源:现代农业产业技术体系建设专项资金资助(CARS-40-31);西藏自治区“十三五”农牧业重大专项“西藏特色家畜选育与健康养殖”。
宋天增(1980—),男,助理研究员,硕士,主要研究方向为动物繁殖营养调控与动物遗传。
(责任编辑:赵俊利)