浅谈犬粪包虫抗原实验室检测及分析

王婷

摘要：在现代社会的发展进程中，养殖业领域的发展速度越来越快，综合发展水平显著提升，但是仍旧存在一定的致病菌和寄生虫，会给人畜的身体健康造成严重影响，其中包虫病也称棘球蚴病，可以直接感染人畜，对动物及人体的危害尤为严重。基于此，本文主要探讨犬粪中包虫抗原实验性检测及分析，首先对包虫进行概述，其次分析了包虫疾病的流行原因和恶性影响，最后有针对性的探讨犬粪包虫抗原检测及结果分析并提出一定防治措施，希望能够对犬粪中包虫的检测技术水平提高提供必要参考。

关键词：犬粪;包虫;抗原;实验室检测;分析

在全世界范围内，我国属于包虫病流行严重的国家之一，这主要是由于我国畜牧业的飞速发展，特别是很多农户在养殖牲畜的过程中并没有过多的重视包虫病的防治，并导致人畜之间交叉感染，严重危及了人民群众和牲畜的健康，同样也会在一定程度上阻碍地区畜牧业的正常发展，因此包虫此类寄生虫疾病的抗原检测和有效防治至关重要，直接关乎我国畜牧业发展水平，因此本文主要从犬粪中分析包虫抗原并进行深入的探讨，以期能够进一步促进包虫抗原检测综合水平的提高。

1 包虫病概述

包虫病主要可以分为棘球蚴病和泡球蚴病两种类型，能够直接影响牲畜健康和人体健康，同时也会对地区的畜牧业发展造成严重影响。此类地方性疾病在我国流行广泛，其中我国的包虫病流行区在我国整体陆地面积中占据4成，众多人口始终受到包虫病的影响和流行危害，例如我国新疆、青海、西藏等畜牧业相对发达的地区，同样也是包虫病的特高流行区。除了牛羊此类家畜以外，犬类、狐狸、狼类等动物，同样也更加容易感染棘球绦虫，并在与人的互动和生活过程中直接将此类包虫病传染给人。

2 包虫疾病的流行原因和恶性影响

包虫病传染的根源在于牲畜和犬类的粪便，对于家犬而言，其生长环境和体制环境更加容易被包虫寄生，此类包虫往往会寄生于家犬的小肠部位，在7～14d左右虫卵成熟。包虫为无性繁殖寿命相对较长，同时并不会受到外界自然生态环境的影响，在不同牲畜之间传染率和患病率较高，包虫同样也会对人体造成感染，此类感染往往在于无意识的感染状态，主要来源于人体与家犬或其他牲畜之间的亲密接触。也正因如此，包虫病的最严重灾区往往在农牧场等牲畜较多的地区，如果家中饲养的家犬有舔肛门的习惯，那么饲养者需要切实观察家犬是否存在包虫虫卵，避免与其进行接触，减少家犬体内包虫传染到人体的可能性。

当前包虫病、棘球蚴病的最终宿主往往为犬科动物，因此对于犬类以及犬粪中棘球绦虫的感染性进行诊断，往往需要通过解剖检验方法或直接检测犬科动物粪便中的虫卵含量、采取氢溴酸槟榔碱泻下法、血清抗体检测方法等多种方法，但是在现有的检测方法中广泛使用的方法仍旧为氢溴酸槟榔碱泻下法以及解剖检测法，其中以解剖检测方式最为直观，检测结果更为准确。但是不容忽视的是，在针对犬类感染包虫情况进行抗原实验室检测时，如果一味使用解剖检测法，则会导致动物的死亡或难以挽回的伤害，因此在对犬类感染包虫病的情况进行检查时，可以采取氢溴酸槟榔碱泻下法。

3 犬粪包虫抗原实验室检测分析

3.1 实验室检测

在针对犬粪中所含有的包虫进行抗原检测中，应用酶联免疫方法进行吸附实验，提高检测的基础性。在犬粪的收集过程中，可以率先保证实验犬的空腹，随后应用氢溴酸槟榔碱泻下法让犬类能够排出粪便，同时将此类犬粪进行有效收集，为随后开展的实验室监测提供保障。如果所检测的犬粪样品中已经含有包虫抗原，那么可以将其与包虫抗体进行酶标结合物特异性融合，其次在间接融合过程中也可以根据包被板上的显色情况进一步判断犬粪样品中是否含有包虫抗原。

1）样品采集与处理

在此次实验室检测中主要应用新鲜犬粪进行测试和实验，主要实验仪器为酶标仪、恒温箱、移液器以及电子天平等等。首先需要根据实验检测需要，提前采集犬粪样品。在样品采集过程中要做好采样人员的防护，避免受到犬粪中所含有的包虫卵影响。样品采集完成之后需要应用蒸馏水进行洗涤液稀释，可以按照1：10的比例进行混匀待用。随后可以将待检测的犬粪样品置于低温环境之下冷冻一周以上，此种低温要尽量保持在零下70℃左右的温度，通过此类长时间的低温冷冻能够有效消灭犬粪中的包虫活卵。在检测过程中可以在犬粪样品中应用电子天平称取1g粪便并加入1mL的稀释液进行搅拌混匀，将混合溶液静置10min以后应用离心机离心10min，提取清液进行后续检验[1]。

2）样品检测

犬粪包虫抗原检验首先需要做好加样反应，在样品孔中加入待检样品，额外添加空白对照和阴性对照、阳性对照各两孔，根据不同的对照组需要加入适合的对照样品。全部添加完成之后，需要盖好封板膜，在常温环境之下避光反应30min，甩去孔内其他液体并注入洗涤液洗板，重复6次之后可以随后开展加酶反应。加酶反应开展过程中，除了原有设定好的空白对照孔以外，需要对其他各孔添加酶结合物100μL并盖好封板膜，让其充分进行显色反应，最后应用酶标仪器，读取OD值。

3）檢测注意事项

在进行实验的过程中要特别注意犬粪样品试剂从冷藏环境中拿出之后需要放置到室温状态之后才能进行启用，避免过冷的环境对犬粪样品造成影响。如果在实验过程中存在未应用的试剂组，也重新放回5℃左右的温度进行密封保存。在添加试剂之前，需要针对不同类型的试剂进行轻摇和混匀，避免试剂混合不均而影响检测，减少犬粪的腐败几率。做好个人防护，实验过程中所应用的各类器具和防护用品都要进行统一的无害化处理或焚烧，避免成分中含有的包虫卵蔓延滋生。

3.2 检测结果分析

通过对260份犬粪样品进行包虫抗原检测，共有4份样品检测出阳性反应，此类结果显示了该地区家养犬类在一定程度上有感染包虫的几率。在对犬类进行驱虫之前，抗原感染率达3%左右，而对犬类进行驱虫之后，其感染包虫的几率会降到0.5%左右，感染率的大幅度下降也在一定程度上说明了对犬类进行药物驱虫能够有效治疗犬类的包虫疾病。在对犬类进行驱虫之后重复检测犬粪包虫抗原实验则得到的感染率为0，所以犬粪样品的采集时间与是否进行犬类药物驱虫有很大程度的关系;另一方面，如果包虫在犬体内滋生破裂，会导致感染率上升，如果卵体尚不成熟，则感染率会显示为阴性[2]。

除此之外，如有需要也可以对参与进行犬粪包虫抗原实验的实验犬进行解剖检测，以进一步判断包虫抗原实验室检测结果的有效性和精准度。在应用解剖检测法时，可以将实验犬进行解剖，并从其内脏中分离出小肠，将小肠内的各类物质全部置于盆中，随后应用生理盐水进行漂洗沉淀，弃去上清，多次之后可以应用平皿进行逐一检查;也可以直接将实验犬的肠管应用剪刀进行剪开，并使用生理盐水冲洗肠壁，通过肉眼观察的形式或采取放大镜观察方法，检测实验犬肠道内侧是否存在棘球绦虫情况，如有棘球绦虫则需要进行计数。不同类型的检测方法，在犬类感染棘球绦虫精准度方面差别明显，特别是不同类型的检测方法在操作可行度以及适用性等方面各不相同，因此在针对犬类感染包虫病情况进行有针对性的诊断中，需要综合应用多种方法实现检测形式的有效互补，最大程度上弥补不同方法的缺陷与问题，提高检测结果的精准度和科学性效果。

在针对犬粪所进行的抗原实验室检测中，可以进一步分析犬粪包虫抗原效果同时，也可以切实提高犬类包虫病的防治效果。在进行包虫病筛查和犬粪包虫筛查过程中要真正实现分类指导和因地制宜，严格控制各类传染源，切实掐断包虫虫卵的传播途径。通过综合性的防治策略和防治手段，全面开展家畜包虫病的有针对性防治，进一步减少包虫病的危害。在早期包虫病发生和诊断过程中，可以应用药物治疗方法进行治疗，同时在犬类饲养过程中要避免应用已经感染了包虫的动物肾脏或肝脏等组织器官喂养犬类，也可以在饲养过程中对犬只進行定期驱虫，驱虫完成之后的粪便要统一进行焚烧或其他类型的无害化处理;日常养犬过程中要注意喂养的卫生条件和饮水卫生，避免出现犬粪污染问题。

4 结语

综上所述，在新时代发展背景之下，我国需要进一步提高对各类寄生虫病的防治和检测措施，避免多种类型的寄生虫病对人体造成严重的影响。本文从犬粪包虫抗原实验室检测及分析入手，不仅探索了犬类包虫病的流行因素和主要感染源，同样也围绕实验室检测方法和检测结果、具体的防治措施进行全面论述，希望能够对我国包虫病的检疫和畜牧业的发展奠定良好基础。

参考文献：

[1]宋育娟.刚察县犬粪包虫抗原实验室检测及分析[J].青海农牧业，2018（4）：3.

[2]郑雪莹，张启龙，陈会玲，等.北京市某区犬细粒棘球绦虫感染情况与风险因素分析[J].中国兽医杂志，2020，56（3）：99-101+139.