类风湿关节炎患者外周血抗CCP抗体和免疫球蛋白检测的临床意义

张　军

(皖南医学院第一附属医院 弋矶山医院　血液内科细胞室，安徽　芜湖　241001)



·临床医学·

类风湿关节炎患者外周血抗CCP抗体和免疫球蛋白检测的临床意义

张军

(皖南医学院第一附属医院 弋矶山医院血液内科细胞室，安徽芜湖241001)

目的：评价类风湿关节炎(rheumatoid arthritis，RA)患者外周血抗环瓜氨酸(cyclin citrullinated peptide，CCP)抗体、类风湿因子(rheumatoid factor，RF)、免疫球蛋白(IgM、IgA和IgG)水平在类风湿关节炎诊断中的作用。方法：收集97例RA患者外周血(活动期56例，静止期41例)及健康体检者50例外周血，评估RA患者关节疾病活动评分(disease activity score in 28 joints,DAS28)指标数值，采用ELISA方法检测抗CCP抗体，免疫比浊法检测RF和三种免疫球蛋白水平。结果：活动期RA患者外周血RF、IgM和IgG的水平高于静止期RA患者和健康对照组(P<0.05)，差异有统计学意义；静止期RA患者除类风湿因子高于健康对照组外(P<0.05)，IgM、IgA和IgG的水平均无统计学差异(P>0.05)。按抗CCP抗体和RF检测结果对RA患者进行分类后比较，CCP+RF+组IgG、IgM和DAS28水平最高，CCP+RF-组次之，其他两组间无统计学差异。结论：抗CCP抗体、IgG和IgM与RA患者病情活动度相关，抗CCP抗体阳性具有更加严重的致病性，联合检测可为临床提供个性化治疗的实验室依据。

抗CCP抗体；免疫球蛋白；类风湿关节炎；类风湿因子

类风湿关节炎(RA)病因未明，以累及周围关节组织为主要特征，被认为是由自身抗原引起的自身免疫性疾病，可能与感染因子和遗传倾向相关[1]，自身抗原研究较多，但均未得到证实。抗CCP抗体具有早期诊断RA的价值，然而其阳性率较低，难以做到早诊断早治疗。目前临床尚缺乏根治及预防本病的有效措施，缺少个性化治疗方案，临床药物治疗副作用较大，本研究以抗CCP抗体和RF为分类指标，探讨两种抗体不同检测结果指示的患者临床各项检测指标差异。

1　资料和方法

1.1研究对象收集皖南医学院弋矶山医院住院和门诊97例RA患者，其中活动期RA患者56例，男性18例，女性38例，年龄23～68岁，平均(52.6±6.42)岁；静止期RA患者41例，男性11例，女性30例，年龄24～67岁，平均(48.6±6.49)岁；对照组为50例本院正常健康体检者，肝肾功能正常，无器质性病变，性别、年龄与疾病组相匹配。RA患者活动度判断依据关节肿胀、关节压痛、晨僵、血沉、C反应蛋白(CRP)等实验室指标。RA诊断具体参照2010年ACR/EULAR关于RA新分类标准，均由有资质的临床医师负责诊断。

1.2方法抗CCP抗体的检测采用酶联免疫吸附法(ELISA)，试剂盒由新科生物提供，操作步骤严格按照说明书进行，应用Bio-RAD酶标仪测量，主波长为450 nm，副波长为630 nm，检测吸光度值(A值)，并将其在标准曲线下换算成浓度值。类风湿因子、免疫球蛋白(IgM、IgA和IgG)、C-反应蛋白(CRP)等血清学指标采用免疫比浊法检测，检测平台为日立7600全自动生化分析仪。

类风湿关节炎活动度的评估采用C-反应蛋白(CRP)式DAS28指数，DAS28的计算公式为：DAS28=[0.56×sqrt(TJC28)+0.28×sqrt(SJC28)+0.36×Ln(CRP+1)] ×1.10+1.15，其中，SJC关节被动活动时的肿胀数，28表示双侧膝关节、肩关节、肘关节、近端指间关节、掌指腕关节总数，TJC28表示上述28个关节的触痛数，指数范围为0～10。

2　结果

2.1研究对象CRP、ESR及RA患者DAS28结果CRP、ESR和DAS28在3组研究对象间的比较详见表1，活动期RA患者组外周血CRP、ESR和DAS28的水平均高于静止期RA患者组(P<0.05)，健康对照组在3组中最低(P<0.05)。

表13组研究对象ESR、CRP和DAS28水平比较

组别CRP1/(mg/L)ESR1/(cm/h)CRP2/(mg/L)ESR2/(cm/h)DAS28静止期RA(41例)19.3a(13.6b)25.6(16.2)4.3±1.6★5.5±1.8★2.9±1.7活动期RA(56例)34.8(21.1)38.5(22.7)6.2±2.4△6.5±1.9△6.9±2.8△健康对照(50例)6.8(3.7)2.2(1.3)1.9±0.91.4±0.8F/t/χ2值13.817.476.7149.33.9P值0.000.000.000.000.00

表23组研究对象血清RF和三种免疫球蛋白水平比较

组别RF-IgM/(IU/mL)IgG/(mg/dL)IgM/(mg/dL)IgA/(mg/dL)静止期RA(41例)52.7a(99.7b)1038.5(810.5)219.3(96.4)362.7(107.2)活动期RA(56例)127.4(134.8)1347.1(1043.8)323.4(109.5)356.2(142.4)健康对照(50例)5.2(4.7)1144.7(565.3)220.8(106.1)334.1(91.9)χ2值28.59.52.53.9P值0.000.010.280.16

a表示中位数，b表示四分位数间距。

表33组研究对象血清RF和三种免疫球蛋白转换后水平比较

组别RF-IgMIgGIgMIgA静止期RA(41例)8.42±3.04△37.63±16.0516.27±7.5719.75±7.27活动期RA(56例)15.84±6.67△47.38±17.97★23.78±10.45△18.74±8.98健康对照(50例)2.17±1.2135.92±16.8714.07±7.3417.97±7.94F值123.83.118.60.5P值0.0000.0480.0000.586

△表示与静止期相比P<0.01，★表示与健康对照相比P<0.05。

2.3抗CCP抗体和RF分类比较本研究进一步将97例RA患者按照抗CCP抗体和RF阳性情况分为四组，分别比较四组患者三种免疫球蛋白、CRP和DAS28分数水平的差异，结果见表4，其中，四组IgG、IgM和CRP指标均高于健康对照组；四组间比较，CCP+RF+组IgG、IgM和DAS28水平最高，其他指标无显著差异，CCP+RF-组IgG、IgM和DAS28高于其他两组，其余各组相应指标比较无显著差异。

表4不同阳性组抗CCP抗体和RF血清学指标转换后比较

组别nIgGIgMIgACRPDAS28CCP+RF+4247.73±14.55△26.27±9.75△17.74±7.294.1±1.7△7.0±2.8△CCP+RF-1840.06±16.37★22.78±10.66△19.48±8.733.8±2.0△5.3±2.9★CCP-RF+2934.38±15.6915.70±7.4318.47±7.493.9±1.4△3.4±1.7CCP-RF-832.42±13.6815.35±7.8117.32±7.143.7±1.9△2.2±1.4健康对照5035.92±16.8714.07±7.3417.97±7.941.9±0.9F值4.6613.990.2116.3216.76P值0.0010.0000.9370.0000.000

△表示与健康对照相比P<0.01，★表示与健康对照相比P<0.05。

3　讨论

类风湿关节炎(RA)主要表现为关节滑膜增生、肿胀、疼痛以及中性粒细胞浸润，关节骨和软骨的侵蚀和破坏反复发作后功能丧失[2]。RA的发病机制仍未得到阐明，目前认为细胞免疫和体液免疫共同参与了RA的发病，CD4+T细胞、B细胞、巨噬细胞和中性粒细胞浸润关节滑膜相互聚集形成生发中心，其中，中性粒细胞在活动性RA患者滑膜浸润细胞中的比例可高达90%，中性粒细胞和其他免疫细胞及分子间的相互作用是驱使和控制自身免疫炎症反应过程的关键，免疫复合物在中性粒细胞浸润和活化过程中发挥着不可替代的作用[3-4]。RA诊断常用的血清学指标主要有抗CCP抗体、RF、血沉和CRP，抗CCP抗体是较好的早期诊断指标，也是鉴别类风湿患者是否易发展为侵蚀性骨损伤的灵敏指标。体液免疫的紊乱是导致类风湿关节炎发病的重要环节，外周血免疫球蛋白水平测定有助于判断体液免疫状态，多个文献报道，RA患者常常出现血清免疫球蛋白的异常，本研究以此为基点重点探讨RA患者免疫球蛋白水平的变化。

近年来相关研究表明，血清免疫球蛋白水平升高的幅度与疾病病程和严重程度相关[5-6]。活动期RA患者IgG、IgM和IgA水平高于静止期，早期RA患者的IgG和IgA水平显著高于静止期RA患者，并且IgG和IgA水平与病情活动度呈正相关[7-9]。我们的结果表明，活动期RA患者免疫球蛋白的含量较正常人显著升高，不同种类免疫球蛋白表现不同，且经治疗后未发现明显变化，这可能与病程长短以及采取的治疗方案的差异相关。动态观察血清或关节引流液中免疫球蛋白含量的变化，有助于分析疾病的进展情况。

抗CCP抗体具有早期诊断RA的价值，且诊断效能显著优于类风湿因子等其他实验室诊断常用的指标[10]。研究显示，抗CCP抗体阳性RA患者和抗CCP阴性RA患者的遗传特征和临床表现均有所不同[11-12]，我们将RA患者按照抗CCP抗体和RF阳性情况分为四组，分别比较四组患者间三种免疫球蛋白、CRP和DAS28分数水平的差异，结果显示，CCP+RF+组IgG、IgM和DAS28水平最高，IgA和CRP无显著差异；CCP+RF-组IgG、IgM和DAS28高于其他两组，其余各组相应指标无显著差异；抗CCP抗体和RF同时阳性RA患者的免疫球蛋白(IgG、IgM)水平显著高于抗CCP抗体阴性RA患者，表明抗CCP抗体阳性RA患者和抗CCP抗体阴性RA患者发病机制可能存在差别，抗CCP抗体阳性RA患者致病性B淋巴细胞异常活化活性更高。

总之，我们的研究表明，免疫球蛋白检测在类风湿关节炎患者体液免疫状态的评价中具有重要意义，抗CCP抗体、IgG和IgM与RA患者病情活动度相关，抗CCP抗体阳性具有更加严重的致病性，临床应重视免疫球蛋白水平在评价RA患者病情活动度方面的价值，联合检测可为临床个性化治疗提供实验室依据。

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Diagnostic implications of peripheral blood anti-CCP antibody and immunoglobulin levels for rheumatoid arthritis

ZHANG Jun

Department of Hematology,The First Affiliated Hospital of Wannan Medical College,Wuhu 241001,China

Objective：To investigate the implications of determining the levels of peripheral blood anti-cyclin citrullinated peptide(anti-CCP) antibody,rheumatoid factor,and IgM,IgG and IgA for diagnosis of rheumatoid arthritis(RA).Methods:Peripheral blood was obtained from 97 patients with RA,including 56 of active RA and 41 of inactive RA,and another 50 healthy subjects undergoing physical examination as controls.Disease Activity Score(DAS28) was used to quantitatively measure the disease activity,ELISA to determine the serum anti-CCP antibody concentration,and immunoturbidimetric assay was performed to measure RF and IgM,IgG and IgA levels.The clinical data on the patients were also collected.Results:RA patients in active disease had higher concentration of peripheral blood anti-CCP antibody as well as higher IgM and IgG levels than in inactive RA and in healthy controls(P<0.05),whereas IgM,IgG and IgA levels were not significantly different in RA patients in inactive stage(P>0.05) except for higher RF levels than the controls(P<0.05).By the results of anti-CCP antibody and RF,the levels of IgG,IgM and DAS28 scoring were highest in CCP+RF+ group,followed by CCP+RF- group.No difference was found in another two groups.Conclusion:Levels of serum anti-CCP antibody,IgM and IgG are positively correlated with RA activity,and positive CCP antibody may indicate serious RA for patients.Importantly,integrated measurement of anti-CCP and immunoglobulin levels may provide laboratory evidence for RA patients on individualized therapy regimen.

anti-CCP antibody;immunoglobulin;rheumatoid arthritis;rheumatoid factor

1002-0217(2016)05-0460-04

2016-04-20

张军(1980-)，男，主管检验师，(电话)15955388639，(电子信箱) 544372683@qq.com.

.22

A

10.3969/j.issn.1002-0217.2016.05.016