杨溢烁,曾德永,刘 艳,张丽香,张 智
(东北林业大学林学院,哈尔滨 150040)
香菇多糖体内抗氧化活性研究
杨溢烁,曾德永,刘艳,张丽香,张智
(东北林业大学林学院,哈尔滨150040)
目的:探究香菇多糖的体内抗氧化活性。方法:以灌胃生理盐水的小鼠为正常对照组,将香菇多糖药物组分为低、中、高3种剂量组。小鼠在灌胃3w后,由眼眶取血,按照试剂盒要求测定小鼠血清中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力以及丙二醛(MDA)含量。结果:香菇多糖可显著提高小鼠血清中SOD和GSH-Px的活力,同时减少血清中MDA含量。结论:香菇多糖对小鼠体内抗氧化活性的提高具有显著作用。
香菇多糖;体内;抗氧化活性
香菇(Lentinula edodes)属口蘑科微香菇属的真菌,内含丰富的营养物质,既可作食用菌,也可作药用菌[1,2]。现代医学和药理学研究表明,香菇多糖具有提高人体免疫力[3,4]、抗肿瘤[5-7]、降血压、降血脂[8-10]等作用,在医药和食品领域都有很好的应用价值。目前与香菇多糖相关的研究多是关于香菇多糖的免疫功能,对香菇多糖体内抗氧化活性的研究较少。本试验通过比较香菇多糖药物组和正常对照组小鼠血清中的多种抗氧化酶活性及含量,对香菇多糖的体内抗氧化能力进行探讨,为香菇多糖的进一步开发提供科学依据。
1.1原料
香菇:森王东北香菇,黑龙江省北珍绿色食品有限公司。
香菇多糖的制备方法:干香菇粉碎,加入适量水及复合酶(纤维素酶与木瓜蛋白酶等比例),在55℃下提取1.5h后离心(3 000r/min,10min)取上清液,Sevag试剂脱蛋白,得到香菇粗多糖提取液,将粗提液旋转蒸发浓缩至原体积的1/3,醇沉、离心、沉淀、干燥后得到香菇粗多糖,按照剂量要求配置相应剂量的香菇多糖溶液[11-13]。
1.2试剂
无水乙醇、葡萄糖、苯酚、浓硫酸、三氯甲烷、正丁醇等(均为分析纯);超氧化物歧化酶(SOD)试剂盒、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)试剂盒、丙二醛(MDA)试剂盒,南京建成生物工程研究所。
1.3实验动物
小白鼠,雄性,体重(20±2)g,购于黑龙江中医药大学。
1.4仪器与设备
DHG-9030A电热恒温鼓风干燥箱,上海一恒科技有限公司;JH-722s可见分光光度计,上海精密科学仪器有限公司;RE-85Z旋转蒸发器,上海青浦沪西仪器厂;AL204电子天平,梅特勒-托利多仪器(上海)有限公司;HWSY21-K4型电热恒温水浴锅,北京市长风仪器仪表公司。
1.5香菇多糖(Len)体内抗氧化活性试验
1.5.1实验动物灌胃及取样将适应喂养后的小鼠随机分成4组:(1)普通对照组NG(0.9%生理盐水,0.2mL/d);(2)Len低剂量组(1 000mg/kg,0.2mL/d);(3)Len中剂量组(1 800mg/kg,0.2mL/d);(4)Len高剂量组(2500mg/kg,0.2mL/d)。每组10只,灌胃3w,最后1d空腹过夜,第2d称重,眼眶采血,低温离心分离血清(3 000r/min,10min)[14-16]。
1.5.2检测方法在小鼠灌胃过程中,每7d对小鼠体质量进行一次测定,在最后一次灌胃空腹过夜后,对各组小鼠进行眼眶采血并低温分离血清,按各试剂盒的测定要求测定小鼠血清中MDA含量、SOD及GSH-Px活力。
2.1不同剂量香菇多糖对小鼠体质量的影响
小鼠的体质量变化在一定程度上反映了小鼠的生长发育情况。由表1可以发现,随着灌胃天数的增加,各组小鼠的体质量都在不断增加。将香菇多糖组的小鼠体质量与普通对照组比较,并无显著差异(P>0.05),这说明香菇多糖并不影响小鼠的体质量,即不影响小鼠的正常生长发育。
2.2不同剂量香菇多糖对小鼠血清SOD、GSH-Px、MDA的影响
将不同剂量的香菇多糖组与普通对照组相比较可以发现,小鼠在连续灌胃香菇多糖3w后,血清中的SOD和GSH-Px活力均有显著的提高,MDA含量显著减少。MDA是脂质过氧化过程中的代谢产物,其含量间接反映了自由基对机体造成的损伤程度,MDA含量高则表明机体清除自由基的能力较弱,易受到较为严重的自由基攻击[17,18]。由表2数据可得,灌胃不同剂量的香菇多糖都可以显著或极显著降低小鼠血清中的MDA含量,表明Len能够显著或极显著地抑制小鼠体内的脂质过氧化过程,降低自由基对机体的损伤程度。
表1 不同剂量香菇多糖对小鼠体质量的影响
表2 不同剂量香菇多糖对小鼠血清MDA、SOD活力、GSH-Px活力的影响
注:*与普通对照组比较,有显著差异(P<0.05);**与普通对照组比较,有极显著差异(P<0.01)。
SOD能够调节机体的氧化与抗氧化平衡,SOD活性高则机体清除氧自由基的能力高[19-21]。由表2数据可得,灌胃不同剂量的香菇多糖后,小鼠血清中的SOD活性都有极显著的提高,表明香菇多糖可以有效降低体内氧自由基,调节氧化与抗氧化的平衡。
GSH-Px属于过氧化物分解酶,可以分解机体内的过氧化物以及脂质氧化过程中产生的氢过氧化物,降低自由基以及脂质过氧化对机体的伤害。由表2数据得,不同剂量的香菇多糖均能极显著地提高小鼠血清中的GSH-Px活性,这表明香菇多糖可以有效分解过氧化物,降低自由基对机体组织的伤害。
随着香菇多糖剂量的增加,SOD和GSH-Px活力的提高幅度与MDA含量的降低幅度均增加。Len高剂量组较其他香菇多糖组小鼠血清中MDA含量降幅更大,SOD与GSH-Px活力提高幅度更大,能使小鼠血清MDA含量降低26.7%、SOD活力增加21.8%、GSH-Px活力增加41.4%,这表明高剂量的香菇多糖具有更好的体内抗氧化活性。
由香菇多糖体内抗氧化活性研究结果可知,香菇多糖能够显著提高血清中SOD和GSH-Px的活力,同时降低MDA含量,表明香菇多糖具有很好的清除体内自由基的作用,能够有效降低自由基氧化对机体的损伤,起到抗氧化的功能。因此,香菇多糖具有良好的体内抗氧化作用,并随着香菇多糖剂量的增加,抗氧化能力越好,这为今后香菇多糖相关产品的的开发利用提供了一定的科学依据。◇
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(责任编辑李婷婷)
Study on Antioxidation Effect of Lentinan in Vivo
YANG Yi-shuo,ZENG De-yong,LIU Yan,ZHANG Li-xiang,ZHANG Zhi(College of Forestry,Northeast Forestry University,Harbin 150040,China)
lentinan;vivo;antioxidanteffect
东北林业大学本科生创新性实验项目(2014年国家级201410225053)。
杨溢烁(1994—),女,本科生,研究方向:食品科学与工程。
FoodandNutritioninChina