缺血性中风病痰热证病人生物学指标NDKA、UFDP的临床意义

韩秀秀，马　斌，姜　如，王亚云



缺血性中风病痰热证病人生物学指标NDKA、UFDP的临床意义

韩秀秀，马斌，姜如，王亚云

目的探讨缺血性中风病痰热证病人发病72 h内生物学指标NDKA、UFDP对中风病痰热证的诊断意义及对预后的评估价值。方法研究纳入50例符合标准的中风病痰热证病人，检测发病72 h内生物学指标NDKA、UFDP的血清水平，采集发病14 d的美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分、痰热证评分及发病90 d的Barthel指数(BI)评分。同时纳入30名正常人作为对照组。结果中风病发病72 h内，病例组生物学指标UFDP与正常对照组比较有统计学意义(P=0.004)，采用ROC曲线分析发现UFDP的AUC曲线下面积为0.608；生物学指标NDKA与NIHSS评分呈明显正相关(r=0.360，P=0.010)，与痰热证评分相关性无统计学意义(r=0.200，P=0.163)，与BI指数呈明显负相关(r=-0.297，P=0.045)。结论生物学指标UFDP对发病72 h内中风病痰热证具有一定的诊断价值，生物学指标NDKA对中风病痰热证病人的近期神经功能缺损程度及远期功能残疾水平均具有一定的评估价值。

缺血性中风；痰热证；生物学指标；NDKA；UFDP

近年来，中医学术界在“病证结合”研究模式的影响下积极寻找与中风病疾病、证候相关的生物学指标，企图寻找中风病辨证治疗的微观依据，并在生物学指标与证候的相关性研究上取得丰硕成果。基于目前的研究基础，本研究选择生物学指标NDKA(nucleoside diphosphate kinase A)、UFDP(ubiquitin fusion degradation protein)进一步深入探讨其在中风病中的证候诊断意义及预后评估价值。

1　资料与方法

1.1临床资料病例来源于全国9家医院2011年5月—2013年12月神经内科住院病例。共纳入中风病急性期痰热证病人50例，均符合纳入标准及排除标准。纳入标准：①符合2010年中华医学会神经病学分会颁布的《2010中国急性缺血性脑卒中诊治指南》脑梗死的疾病诊断标准；②证候诊断采用国家重点基础研究发展计划(973计划)课题组制定的《缺血性中风证候要素诊断量表》，“痰证”和“热证”诊断同时成立(痰证≥10分，热证≥10分)；③起病72 h以内；④美国国立卫生研究院卒中量表(National Institute of Health Stroke Scale，NIHSS)分值≥5分且≤22分；⑤年龄≥35岁且≤75岁者；⑥意识清醒，能够配合临床四诊信息采集者。排除标准：短暂性脑缺血发作(TIA)；脑出血或蛛网膜下腔出血；经检查证实由脑肿瘤、脑外伤、血液病等引起的卒中病人；合并有肝、肾、造血系统、内分泌系统等严重疾病及骨关节病；精神障碍或严重痴呆；存在意识障碍者；有卒中病史且遗留后遗症者。选择同期门诊体检健康者30名作为正常对照组。

1.2临床评价按照课题组的科研设计方案，制定统一的标准，对受试者的临床评价资料由各研究中心经课题组培训的神经内科医师负责采集。收集每位健康对照者的年龄、性别等基本资料，并一次性采集空腹血样标本。每例病人采集如下临床资料，一般资料：入组当天采集人口学资料、病史、生活习惯、血液检查信息(血常规、血生化、血凝等)、影像学资料(头颅CT或头颅MRI)。②生物学指标：采集病人发病72 h内空腹5 h以上肘静脉血，采用酶联免疫吸附试验检测生物学指标NDKA、UFDP的血清水平。③近期预后：分别评价病人发病14 d疾病、证候的预后情况。疾病：使用美国国立卫生研究院卒中量表评估神经功能缺损程度。证候：使用《缺血性中风证候评价量表》评价证候轻重程度(痰热证评分=痰湿证评分+内火证评分)。 ④远期预后：采用Barthel指数(Barthel index，BI)评价病人发病90 d的功能残疾水平作为远期预后。

2　结　果

2.1一般资料正常对照组采集年龄、性别等基本信息，病例组除此之外采集患病情况如高血压、冠心病、糖尿病、高脂血症。详见表1。

表1　两组基本资料比较

2.2生物学指标NDKA、UFDP对中风病痰热证的诊断价值对病例组与正常对照组的生物学指标血清水平进行组间差异比较和ROC曲线分析。结果显示：正常对照组生物学指标NDKA血清水平为(26.69±2.06)ng/mL，病例组血清水平为(27.68±1.92)ng/mL，两组比较无统计学意义(P=0.727)。正常对照组生物学指标UFDP血清水平为(33.83±1.49)ng/mL，病例组血清水平为(57.05±6.04)ng/mL，两组比较有统计学意义(P=0.004)。两组NDKA、UFDP血清水平均值比较发现：正常对照组<病例组(见图1)。进一步采用ROC曲线分析发现：生物学指标NDKA的AUC曲线下面积(area under the curve，AUC)0.503，提示生物学指标NDKA在中风病发病72 h内对痰热证几乎没有诊断价值(cutoff值：44.07 ng/mL)；生物学指标UFDP的AUC曲线下面积0.608，提示生物学指标UFDP在中风病发病72 h内对痰热证具有较低的诊断价值(cutoff值：44.90 ng/mL，敏感性：46.0%，特异性：99.7%)。详见图2。

注：与正常对照组比较，P<0.05。

2.3生物学指标NDKA、UFDP血清水平与预后的相关性研究选择线性回归方法分析中风病痰热证病人发病72 h内生物学指标NDKA、UFDP与预后的相关性。近期预后评价包括发病第14天疾病、证候两方面评价：疾病评价选用NIHSS评分评价其神经功能缺损程度，证候评价选用《缺血性中风证候评价量表》进行痰热证轻重程度的评价；远期预后选择发病90 d BI指数评价其功能残疾水平。结果发现：生物学指标NDKA与NIHSS评分呈明显正相关(r=0.360，P=0.010)，与痰热证评分无相关性(r=0.200，P=0.163)，与BI指数呈明显负相关(r= -0.297，P=0.045)；生物学指标UFDP与NIHSS评分无明显相关性(r=0.015，P=0.915)，与痰热证评分无明显相关性(r=0.014，P=0.922)，与BI指数无明显相关性(r= -0.060，P=0.693)。详见表2。

表2　生物学指标NDKA、UFDP与预后的相关性

3　讨　论

近年来，中风病研究者们尝试从多角度、多学科进行挖掘探索生物学指标与中风病的关系，并在证候和生物学指标的相关性方面取得丰硕成果[1-2]。如研究者发现急性缺血性中风始发状态火热证组病人的火热证评分与白介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量呈正相关，故认为IL-6、TNF-α升高水平可作为判定火热证与非火热证的微观指标等[3-4]。临床实用的生物学指标，应具有快速、低廉、敏感、特异的特点，如B型利钠肽(BNP)在充血性心力衰竭中的快速诊断作用[5]。但是，目前在临床实践中仍然缺乏与中风病证候相关的特异性指标[6]，因此仍然需要进一步探索方便临床中风病证候诊断的特异、敏感、实验室检测的生物学指标。本研究选择的生物学指标NDKA、UFDP为近年来发现的与中风病急性期相关的相对新颖性指标。NDKA是在神经元中表达，用于催化ATP终端磷酸核苷酸转移三磷酸的酶，目前研究认为其参与脑卒中后的缺血瀑布中[7-8]，并发现NDKA血清水平在中风发病后3 h浓度增加[9]。UFDP是细胞内蛋白质选择性降解主要途径泛素化-蛋白酶体系统(UPS)的重要组成成分，研究发现人死后及其他大脑损伤模型中UFDP脑脊液水平均显著升高，同时发现脑梗死急性发病3 h内UFDP的血清水平上升[10]。因此目前研究认为生物学指标NDKA对缺血性中风病急性期诊断具有一定的价值，可作为缺血性中风病的辅助检查指标。

本研究选用ROC曲线分析中风病痰热证病人发病72 h内生物学指标NDKA、UFDP对中风病痰热证的诊断价值，并发现生物学指标UFDP对中风病痰热证具有一定的诊断价值，这符合目前的研究结果，并在时间维度上增加了UFDP对中风病的诊断价值，但是将其作为中风病痰热证的诊断性生物学指标仍需要进一步研究证实。研究未能发现生物学指标NDKA对中风病痰热证的诊断价值，①可能与脑组织急性缺血后侧支循环建立改善脑组织供血有关；②可能与本研究样本量较少影响了研究质量有关。研究采用线性回归分析中风病痰热证病人发病72 h内生物学指标NDKA、UFDP对其近期预后及远期预后的评估价值，研究分别选择具有较高信度、效度、反应度的神经功能缺损评价量表NIHSS量表[11]采集其NIHSS评分、选择《缺血性中风证候评价量表》采集痰热证评分作为近期预后的疾病、证候评价性指标，选择BI指数分析其功能残疾水平作为远期预后的评价指标。结果发现生物学指标NDKA与发病14 d NIHSS评分、发病90 d BI指数均具有统计学意义，提示其对中风病痰热证病人的近期神经功能缺损程度及远期功能残疾水平均具有一定的评估价值。

本研究虽未能获得中风病急性期证候诊断的敏感特异性指标，但是对中风病急性期相关生物学指标做了进一步筛选。研究发现生物学指标UFDP在发病72 h内对中风病痰热证具有一定诊断价值，生物学指标NDKA对中风病痰热证病人的近期预后、远期预后均具有一定的评估价值，提示可将其作为中风病辅助检查性生物学指标。但是本研究样本量小，尚需临床大样本和基础研究来支持和验证生物学指标NDKA、UFDP的作用。

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(本文编辑郭怀印)

Clinical Significance of Serum NDKA and UFDP in Acute Ischemic Stroke Patients with Phlegm-heat Syndrome

Han Xiuxiu，Ma Bin，Jiang Ru，Wang Yayun

Dongzhimen Hospital of Beijing University of Chinese Medicine，Beijing 100700，China

Ma Bin

ObjectiveTo identify the value of the two biological makers nucleoside diphosphate kinase A(NDKA)，ubiquitin fusion degradation protein(UFDP) for the the diagnosis and evaluation prognosis in acute ischemic stroke patients with phlegm-heat syndrome.MethodsFifty patients with phlegm-heat syndrome and 30 age and gender matched healthy subjects were included in the study. The serum NDKA，UFDP levels were measured by ELISA kits at within 3 days of onset，and NIHSS scores，phlegm-heat syndrome scores were measured at day 14，BI scores were measured at day 90 after the onset.ResultsThere was a significant difference in serum UFDP(P=0.004) between acute stroke patients within 3 days of onset and healthy controls.The ROC curve of UFDP for the diagnosis of phlegm-heat syndrome of traditional Chinese medicine(TCM) in acute ischemic stroke was 0.608. There was a significantly positive correlation between the serum NDKA levels and NIHSS scores(r=0.360，P=0.010)，a significantly negative correlation between it and BI scores (r= -0.297，P=0.045)，but a significant correlation was not found between the NDKA levels and phlegm-heat syndrome scores.ConclusionThe serum UFDP concentration exhibit diagnostic value for the phlegm-heat syndrome of TCM in patients with acute ischemic stroke，and the serum NDKA concentration within 3 days of onset exhibit evaluation value for recent nerve function defect degree and long-term function disability levels in acute ischemic stroke patients with phlegm-heat syndrome.

ischemic stroke；phlegm-heat syndrome；biomarkers；nucleoside diphosphate kinase A；ubiquitin fusion degradation protein

国家自然科学基金项目(No.81173230)；国家科技重大专项资助项目(No.2009ZX09502-028)

北京中医药大学东直门医院(北京 100700)

马斌，E-mail：mabin010@yahoo.com.cn

R743R255.2

A

10．3969/j．issn．1672-1349．2016．16．004

1672-1349(2016)16-1841-03

2015-12-09)