尿足细胞标志蛋白Podocalyxin、Mindin水平与糖尿病视网膜病变的关系

邵雪景　韦玉和　 冯小芬　赵志勇　印　永



尿足细胞标志蛋白Podocalyxin、Mindin水平与糖尿病视网膜病变的关系

邵雪景韦玉和*冯小芬赵志勇印永

目的：探讨2型糖尿病(T2DM)患者尿足细胞标记蛋白Podocalyxin(PCX)、Mindin(MIN)与糖尿病视网膜病变(DR)的关系。方法：选择90例T2DM患者(A组)，依据视网膜病变程度分为3个亚组：糖尿病无DR组(A1组，n=36)、非增生型DR组(A2组，n=29)和增生型DR组(A3组，n=25)；另选32名健康体检者作为对照组(B组)。平行测定各组尿PCX、MIN、血肌酐(Scr)和尿肌酐(Ucr)，计算尿PCX相对值(PCR=尿PCX/Ucr)、尿MIN相对值(MCR=尿MIN/Ucr)和肾小球滤过率(eGFR)，比较各组各指标差异及其相关性。结果：各组PCR、MCR、Scr、eGFR差异均有统计学意义(P<0.01)。A组各亚组MCR、PCR、Scr显著高于B组，eGFR 显著低于B组(均P<0.05)；MCR、PCR从A1-A3组逐渐递增(P<0.05)。PCR与MCR呈正相关(P<0.05)；PCR、MCR与DR分级呈正相关(P<0.05)，且均与Scr呈正相关(P<0.05)，与eGFR呈负相关(P<0.05)。结论：尿PCX、MIN水平升高与DR有关，可作为DM微血管病变观察、治疗的新靶标。

Podocalyxin；Mindin；糖尿病视网膜病变

糖尿病视网膜病变(DR)是糖尿病最常见的慢性并发症，是代谢紊乱和内分泌系统与血液系统损害在视网膜上的反映，可导致视力下降，甚至失明，严重影响患者的生活质量。我国糖尿病人群中DR患病率为24.7%-34.5%。其中增殖期DR比例在3.3%-7.4%[1]。DR与糖尿病肾病(DN)均为糖尿病微血管病变，临床表现往往具有同步性。已有研究表明尿足细胞标志蛋白Podocalyxin(PCX)、Mindin(MIN)可灵敏反映 DN早期病变[2,3]，但尚未见到早期反映DR的临床报道。因此，本文检测分析不同分级DR患者尿PCX、MIN水平变化及其与DN指标变化的一致性，为临床早发现、早治疗DR并兼顾DN提供新方法。

1　资料与方法

1.1对象和分组

2型糖尿病(T2DM)患者90例(A组)，男41例，女49例，年龄31-80岁。诊断均符合1999年WHO的DM诊断标准[4]。排除急、慢性肾炎、自身免疫性肾病、尿路感染等可能影响足细胞的疾病。DR的诊断及分级采用2003年国际临床严重程度分级标准[5]。对所有入选患者按眼底检查结果分为A1组，即T2DM无DR组，36例，男16例，女20例，年龄60.94±11.06岁；A2组，即非增生型糖尿病视网膜病变(NPDR)组，29例，男14例，女15例，年龄63.86±8.15岁；A3组，即增生型糖尿病视网膜病变(PDR)组，25例，男11例，女14例，年龄60.19±8.13岁。另选体检合格的健康人群作为对照组(B组)，32例，男15例，女17例，年龄58.59±5.86岁。四组性别、年龄分布差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。

1.2方法

1.2.1收集基本资料：包括一般性资料如身高、体重、体质量指数(BMI=体重/身高2)、收缩压(SBP)、舒张压(DBP)、糖尿病病程及实验室资料如空腹血糖(FPG)、糖化血红蛋白(HbA1c)、甘油三酯/高密度脂蛋白胆固醇比值(TG/HDL-c)。

1.2.2主要检测指标：各组受检者空腹8h以上清晨采血(患者未服药)5ml,置于普通促凝试管离心分离血清，同时留取晨尿20ml，离心取上清-80℃冻存批检。血肌酐(Scr)及尿肌酐(Ucr)采用日本Olympus公司AU5421型全自动生化分析仪及配套试剂(批号AUZ2084、AUZ0750)测定，并通过肾脏病饮食改良(MDRD)公式[6]估算肾小球滤过率(eGFR，ml/min/1.73m2)[=175×Scr-1.234×年龄-0.179(女性×0.79)]。用ELISA测定尿PCX和尿MIN水平,试剂盒购于武汉优尔生科技有限公司(批号L141016360、L141022468)，参照试剂盒说明书操作，并计算两者与Ucr比值，即尿PCX相对值(PCR，g/μmol)[=尿PCX(ng/ml)/Ucr(μmol/L) ×1 000]，尿MIN相对值(MCR，mg/μmol)[=尿MIN(pg/ml)/Ucr(μmol/L) ×1 000]。由于Ucr排出量昼夜相对恒定,受干扰因素较少,可校正尿量不同及个体差异，故本文以Ucr校正尿PCX及MCR使其更为客观、准确。

1.3统计学处理

2　结　果

2.1各组基本资料比较

各组间BMI、SBP、DBP、FPG、HbA1c、TG/HDL-c差异均有统计学意义(P<0.01)。A1、A2、A3组上述指标水平高于B组(t均>-10.77,P均<0.01)，A3组病程明显长于A1组和A2组(t=-3.68、-2.18,P<0.05)。A3组SBP明显高于A1组和A2组(t=-3.98、-3.13,P<0.05)，其它指标差异无统计学意义(P>0.05)。见表1。

2.2各组主要观察指标比较

各组MCR、PCR、Scr、eGFR差异均有统计学意义(P<0.01)。A1、A2、A3组MCR、PCR、Scr显著高于B组(t均>24.33,P<0.01)，eGFR 显著低于B组(t>4.63、P<0.01)。A2组MCR、PCR明显高A1组(t=13.58、8.70，P均<0.01),A3组MCR、PCR明显高于A2组(t=32.05、-29.49、P均<0.01)。Scr在A2组与A1组差异无充计学意义(P>0.05)，但A3组明显高于A1组和A2组，差异有统计学意义(t=4.89、-6.62,P<0.01)；eGFR在A组内呈递减趋势,但A2组较A1组下降无统计学意义(P>0.05)，A3组较A2组下降明显，差异有统计学意义(t=-3.48，P<0.01)。见表2。

表1　各组基本资料比较±s)

注：与B组比较，1)P<0.01；与A1组比较，2)P<0.05；与A2组比较，3)P<0.05

表2　各组主要观察指标比较±s)

注：与B组比较，1)P<0.01；与A1组比较，2)P<0.01;与A2组比较，3)P<0.01

2.3相关及回归分析

(1)尿MCR与尿PCR水平变化呈正相关(r=0.461，P<0.05)；(2)尿MCR、PCR与DR分级呈正相关(r=0.465、0.480,P均<0.01)。以DR分级为因变量，以MCR和PCR测值为自变量，可得回归方程：Y=1.598+0.00006585MCR+0.02PCR；(3)尿MCR与Scr水平变化呈正相关(r=0.402，P<0.05)，与eGFR水平变化呈负相关(r=-0.398，P<0.05)；尿PCR与Scr水平变化呈正相关(r=0.379，P<0.05)，与eGFR水平变化呈负相关(r=-0.383，P<0.05)。

3　讨　论

DR与DN不仅有共同的发病机制，如高血糖、多元醇代谢异常、蛋白质非酶糖化、细胞因子和自由基作用、炎性介质和氧化应激以及遗传背景等，而且大量研究发现DR与DN患者具有同步性，通过DN可预知DR的发生。熊晓清等[7]将330例T2DM患者以蛋白尿分组研究发现随着DN的加重，DR的发病率也呈明显增加趋势；Yu等[8]也在595例中国北方老年DR的临床特征研究中发现，DN为DR的危险因素，还有一项荟萃分析显示，DR可用于诊断及筛查DN[9]。但也有研究认为，两种病变表现出非同步性[10]，即有蛋白尿患者无视网膜病变，或有视网膜病变患者却无蛋白尿,或蛋白尿量与视网膜病变程度不平行，这些现象的原因有待进一步研究论证。

PCX和MIN蛋白是足细胞标志蛋白，其早期诊断DN得到了大多数学者的认可。Hara等[2]研究发现，PCX为DM患者足细胞损伤的早期标志物。Ye等[12]的研究结果显示PCX有助于DN的早期诊断。Murakoshi等[13]指出MIN是DN的有效生物学标志物。本课题组在此之前的临床观察也验证了尿MIN在DN诊断中的重要价值[14]。但PCX与MIN对DR的诊断意义少有研究报道。基于DR与DN的形成机制及临床表现有较高一致性的特征，本文探讨了PCX、MIN与DR分级的相关性，以及与DN相关指标Scr、eGFR的关联。

本文结果发现，尿PCX、MIN在DR患者水平显著高于对照组及无DR的T2DM患者组，且随分级升高而递增，即反映DR的严重程度随着PCX、MIN水平的升高而加重。提示PCX、MIN可作为DR早期筛查及辅助分级和临床诊断指标。与此同时，我们观察到DR患者Scr升高和eGFR降低(DN表现)，且eGFR降低与PCX、MIN升高呈负相关，即DR患者同时存在DN，两者保持了较好一致性。提示临床分析糖尿病微血管并发症时，要充分考虑DN与DR的紧密关联[15]，兼顾两者的治疗和预后，使患者获得事半功倍的收益。

综上，尿足细胞标志蛋白PCX、MIN水平升高可反映DR及其进展，是DR、DN危险因素，也是早期筛查、诊断糖尿病微血管并发症(DR、DN)的有效指标和临床治疗新靶标。今后还需加强PCX、MIN与传统危险因素(表1)的关联度分析，使之能更好地应用于临床。

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本文第一作者简介：

邵雪景(1984-)，女，汉族，医学硕士，主治医师，主要从事糖尿病及其并发症研究

1中华医学会眼科学分会.我国糖尿病视网膜病变临床诊疗指南(2014年)[J].中华眼科杂志，2014,50(11):851-865.

2Hara M,Yamagata K,Tomino Y,et al.Urinary podocalyxin is an early marker for podocyte injury in patients with diabetes:establishment of a highly sensitive ELISA to detect urinary podocalyxin[J].Diabetologia，2012,55(11):2 913-2 919.

3廖钰，夏宁.Mindin：糖尿病肾病足细胞损伤的新型标记物[J].国际内分泌代谢杂志，2012,32(1):18-20.

4中华医学会糖尿病学分会.中国2型糖尿病防治指南(2013年版)[J].中华糖尿病杂志，2014,6(7)：447-498.

5Wilkinson CP,Ferris FL,Klein RE,et al.Proposed international clinical diabetic retinopathy and diabetic macular edema disease severity scales[J].Ophthalmology,2003,110(9):1 677-1 682.

6Ma YC,Zuo L,Chen JH,et al.Modified glomerular filtration rate estimating equation for Chinese patients with chronic kidney disease[J] J Am Soc Nephrol ,2006,17(10):2 937-2 944.

7熊晓清，李万根.2型糖尿病肾病与糖尿病视网膜病变的相关性与平行性研究[J].临床医学工程，2010，17(9)：34-35.

8Yu X,Song S,Yang F，et al.Clinical features of diabetes retinopathy in elderly patients with type 2 diabetes in Northern Chinese[J].Nigerian Journal of Clinical Practice,2015,18(2):183-187.

9He F,Xia X，Wu XF,et al.Diabetic retinopathy in predicting diabetic nephropathy in patients with type 2 diabetes and renal disease:a meta-analysis[J].Diabetologia,2013,56(3):457-466.

10彭艳,徐勇.糖尿病肾病与糖尿病视网膜病变关系研究进展[J].医学综述，2008,14(20)：3 131-3 134.

11Reidy K,Kang HM,Hostetter T,et al.Molecular mechanisms of diabetic kidney disease[J].J Clin Invest,2014,124(6):2 333-2 340.

12Ye H,Bai X,Gao H,et al.Urinary podocalyxin positive-element occurs in the early stage of diabetic nephropathy and is correlated with a clinical diagnosis of diabetic nephropathy[J].J Diabetes Complications,2014,28(1):96-100.

13Murakoshi M,Tanimoto M,Gohda T,et al.Mindin:a novel marker for podocyte injury in diabetic nephropathy [J].Nephrol Dial Transplant,2011,26(7):2 153-2 160.

14邵雪景,韦玉和,冯小芬,等.2型糖尿病肾病患者尿液Mindin的变化及意义[J].江苏医药，2015,41(8):904-907.

15霍瑞婷,朱潇潇,关小宏.从甲襞微循环探讨糖尿病视网膜病变与糖尿病肾病的对应关系[J].微循环学杂志，2016,26(1):30-33,37.

The Relationship of Urinary Podocyte Marker Protein Podocalyxin and Mindin with Diabetic Retinopathy

SHAO Xue-jing,WEI Yu-he*,FENG Xiao-fen,ZHAO Zhi-yong,YIN Yong

Department of Endocrinology,Affiliated Wujin Hospital,Jiangsu University,Changzhou 213000,China；*Corresponding author

Objective:To investigate the relationship of urinary podocyte marker protein podocalyxin(PCX) and mindin(MIN) with diabetic retinopathy(DR).Method:To choice 90 cases of patients with type 2 diabetes as the case group(group A),another 32 healthy volunteers as control group(group B).On the basis of the presence of retinopathy ,group A was assigned into three subgroups,without diabetic retinopathy(A1,n=36),non-proliferative diabetic retinopathy(A2,n=29) and diabetic retinopathy(A3,n=25).We measured the levels of urinary PCX,MIN,urine creatinine(Ucr) in parallel,calculated the relative value of PCX(PCR=PCX/Ucr),MIN relative value (MCR=MIN/Ucr),glomerular filtration rate(eGFR),and compared the differences of each index and their correlation.Results:The differences of PCR,MCR,serum creatinine (Scr) and eGFR were statistically significant (P<0.05) in each group.The level of MCR,PCR and Scr in each sub gruoup of A was significantly higher than that of B group,eGFR was significantly lower than that of B group (P<0.05).PCR,MCR from the A1-A3 group gradually increased (P<0.05).PCR was positively correlated with MCR (P<0.05),PCR,MCR were positively correlated with DR classification (P<0.05),and were positively correlated with Scr (P<0.05),and negatively correlated with eGFR (P<0.05).Conclusion:Urinary PCX,MIN levels were associated with DR,which can be a new target for the treatment of DM microvascular lesions.

Podocalyxin; Mindin; Diabetic retinopathy

单位]江苏省常州市武进人民医院内分泌科，常州 213000；*

，E-mail:877957735@qq.com.

本文2016-05-09收到，2016-07-06修回

R587.2[文献标识码]A

1005-1740(2016)03-0054-04