老年左心室舒张性心力衰竭患者血清脂联素及骨桥蛋白水平变化及其意义

郇雷 亓华新 王方明 王文明 李文成

临床研究

老年左心室舒张性心力衰竭患者血清脂联素及骨桥蛋白水平变化及其意义

郇雷 亓华新 王方明 王文明 李文成

目的 探讨老年左心室舒张性心力衰竭（DHF）患者血清脂联素（APN）、骨桥蛋白（OPN）的水平变化及其意义。方法 选取莱芜市人民医院2013年6月至2015年7月确诊的87例老年左心室DHF患者为DHF组，同期年龄及性别等基本因素相匹配的87例健康体检者为对照组，分别测定两组血清APN及OPN水平，并进行超声心动图检查，分析其相互性。结果 DHF组患者的血APN为（11.94±2.75）mg/L，OPN为（8.36±2.05）ng/ml，均显著高于对照组的（6.91±1.86）mg/L 和（2.20±0.92）ng/ml（P<0.05）。DHF 组患者的LVEF 为（64.32±7.98）%，Ea/Aa 为 0.64±0.21，Vp 为（0.23±0.18）cm/s，S/D 为 0.91±0.30，均显著低于对照组LVEF（67.98±8.14）%、Ea/Aa 1.27±0.24、Vp（0.58±0.22）cm/s、S/D 1.40±0.35（P<0.05）；DHF 组的 E/Ea 为16.30±3.27，Ar为 32.86±8.95，均显著高于对照组 E/Ea 7.33±1.94、Ar 20.75±6.90（P 均<0.05）；DHF 组患者APN、OPN 与 LVEF 值不具有相关性（P>0.05），与 Ea/Aa、Vp、S/D 值均呈显著负相关（P<0.05），与 E/Ea值、Ar值均呈显著正相关（P<0.05）。结论 老年左心室DHF患者血清APN、OPN水平显著升高，并且与心功能具有一定的相关性。

老年； 左心室舒张性心力衰竭； 脂联素； 骨桥蛋白

舒张性心衰（diastolic heart failure，DHF）是由于左心室舒张期主动松弛能力受损和心肌顺应性降低，心肌细胞肥大伴间质纤维化使其僵硬度增加，导致左心室在舒张期的充盈受损，心搏量减少，左室舒张末期压增高而发生的心衰。单纯性舒张性心衰占心衰患者的20%～60%[1]，其发生机制以及病理生理机制较为复杂[2]。射血分数值能有效评估收缩功能，但目前尚无一类简明的指标用于舒张功能评价，因此寻求一种有效的血清学指标进而协助DHF的早期诊断以及预后评估具有重要的意义。

骨桥蛋白（osteopontin，OPN）作为磷酸化的糖基蛋白，在细胞外基质中广泛存在。OPN广泛参与动脉粥样硬化、心肌梗死的修复等，在DHF及遗传性心肌病中异常表达[3]。血清脂联素（adiponectin，APN）作为脂肪分泌蛋白，具有改善动脉管壁的弹性、减轻血管内皮损伤、抑制动脉粥样硬化的作用[4]。本研究重在探讨APN及OPN在老年心力衰竭患者中的表达及其临床意义，进而揭示其与心功能分级、舒张期心力衰竭指标的关系[5]。

1 对象及方法

1.1 纳入排除标准

1.1.1 纳入标准 ①DHF患者的诊断依据欧洲心脏病协会及心力衰竭超声心动协会制定的DHF诊断标准[6]；②患者的左室射血分数（LVEF）>50%；③年龄≥60岁；④组织多普勒成像E/E值>15；⑤获得患者的知情同意。

1.1.2 排除标准 早期绝经、骨质疏松、风心病、心脏瓣膜钙化、冠心病、心房颤动、恶性心律失常、甲状腺功能障碍、肿瘤等疾病患者。

1.2 研究对象 选取莱芜市人民医院2013年6月至2015年7月确诊的87例DHF患者作为DHF组，同期年龄及性别等基本因素相匹配的87例健康体检者作为对照组。

DHF组男性41例，女性46例，年龄60～79（69.3±4.2）岁，入院时收缩压（145.1±12.6）mm Hg（1 mm Hg=0.133 kPa）、舒张压（78.6±8.3）mm Hg，NT-proBNP（1769.5±209.7）pg/ml。依据纽约心脏病协会（NYHA）心功能分级：Ⅱ级24例、Ⅲ级39例、Ⅳ级24例。对照组男性45例，女性42例，年龄60～79（70.6±4.7）岁。两组对象的年龄、性别构成未见统计学差异（P>0.05）。

1.3 观察指标及检测方法

1.3.1 观察指标 分别测定两组研究对象的血清脂联素（APN）、骨桥蛋白（OPN）水平。采用超声心动图测定两组研究对象的舒张早期血流峰值（E）、舒张早期运动速度（Ea）、舒张晚期运动速度（Aa）、左室射血分数（LVEF）、血流传播速度（Vp）、峰速比（S/D）和反向血流速度（Ar）。

1.3.2 APN及OPN检测方法 ELISA法检测APN及OPN。取两组病例静脉血，经1500 r/min离心5 min后得到血清，4℃保存待测。以标准品稀释液将标准品复溶，静置15 min后混匀，倍比稀释为7个浓度，取出板条，除了对照孔外每个孔加入不同浓度的标准品，剂量为100μl/孔，采用封板盖封住，室温反应120 min，使用PBS液体洗涤3次，除了空白对照孔，每孔加入检测液（100μl），室温孵育 1 h，PBS洗涤 3次，加入底物（50 μl/孔），避光孵育25 min，加入终止液5 min后测定450 nm处吸光度。

1.3.3 超声心动图检测方法 应用GEVIVID7（GE公司，Horten，Norway）彩色多普勒超声诊断仪，S4和M4S经胸探头，设置3～10 mm的取样容积，采用脉冲多普勒模式及连续多普勒模式，测量二尖瓣及组织血流动力学指标。

1.4 统计学方法 数据分析采用SAS 9.2软件包处理。正态分布的计量指标采用±s表示，两组间比较采用t假设检验，三组间比较采用单因素方差分析；相关性分析采用Pearson线性相关分析法。P<0.05表示差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 两组APN、OPN比较 DHF组患者的血APN、OPN水平均显著高于对照组患者，差异有统计学意义（P均<0.05），见表 1。

表1 两组 APN、OPN 比较（±s）

表1 两组 APN、OPN 比较（±s）

注：DHF：舒张性心衰；APN：血清脂联素；OPN：骨桥蛋白

组别 例数 APN（mg/L） OPN（ng/ml）对照组 87 6.91±1.86 2.20±0.92 DHF 组 87 11.94±2.75 8.36±2.05 t值 14.132 25.571 P值 <0.01 <0.01

2.2 不同级别DHF组患者APN、OPN比较 不同NYHA级别DHF组患者的血APN、OPN水平比较差异具有统计学意义（P<0.05），Ⅱ级<Ⅲ级<Ⅳ级。见表2。

表2 不同级别DHF组患者APN、OPN比较（±s）

表2 不同级别DHF组患者APN、OPN比较（±s）

注：DHF：舒张性心衰；APN：血清脂联素；OPN：骨桥蛋白。与心功能Ⅱ级患者比较，aP<0.05；与心功能Ⅲ级患者比较，bP<0.05

组别 例数 APN（mg/L） OPN（ng/ml）心功能Ⅱ级 24 8.36±2.41 6.77±1.83心功能Ⅲ级 39 12.03±2.60a8.20±1.94a心功能Ⅳ级 24 13.95±2.71ab9.41±1.97ab

2.3 DHF组与对照组超声心动图指标比较 DHF组患者的 LVEF、Ea/Aa、Vp、S/D 值均显著低于对照组（P<0.05），DHF组的E/Ea值、Ar值均显著高于对照组（P<0.05），见表 3。

2.4 DHF组APN、OPN与心功能指标的相关性DHF组患者的APN、OPN与LVEF值不具有相关性（P>0.05），与 Ea/Aa、Vp、S/D 值均呈显著负相关（P<0.05），与E/Ea值、Ar值均呈显著正相关（P<0.05），见表 4。

表3 DHF组与对照组超声心动图指标比较（±s）

表3 DHF组与对照组超声心动图指标比较（±s）

注：LVEF：左室射血分数；E：舒张早期血流峰值；Ea：舒张早期运动速度；Aa：舒张晚期运动速度；Vp：血流传播速度；S/D：峰速比；Ar：反向血流速度

组别例数LVEF（%）E/EaEa/AaVp（cm/s）S/DAr（cm/s）对照组 87 67.98±8.14 7.33±1.94 1.27±0.24 0.58±0.22 1.40±0.35 20.75±6.90 DHF 组 87 64.32±7.98 16.30±3.27 0.64±0.21 0.23±0.18 0.91±0.30 32.86±8.95 t值 2.995 22.005 18.426 11.485 9.915 9.995 P值 <0.01 <0.01 <0.01 <0.01 <0.01 <0.01

表4 DHF组APN、OPN与心功能指标的相关性

3 讨论

舒张性心衰可单独存在，也可与收缩功能障碍同时出现。DHF多见于有高血压、糖尿病、左室肥厚的老年女性，并常有冠脉疾病或房颤[7，8]。DHF的发生机制较为复杂[9]，一般认为长期高血容量性前负荷、高血压导致的后负荷增加，可促进心肌细胞损伤和间质成分的代偿性增生，进而促进DHF的发生。但迄今为止临床上对于该项病理过程中特异性血清学标志物的研究较少。超声心动图虽然可以通过检测舒张期二尖瓣及肺动脉瓣血流动力学的改变，进而协助早期诊断，但该影像学检查对于疾病的预后评估价值不高，灵敏度不足50%[10]。血清脑钠肽（brain natriuretic peptide，BNP）可以反映早期舒张性心力衰竭患者心室壁顺应性的改变，对于评估DHF的临床转归具有一定的价值，但特异度不高，因为遗传性心肌病、收缩期心力衰竭及高血容量性心力衰竭患者体内BNP同样显著增加。相关研究证实，BNP诊断或者评估心力衰竭患者的灵敏度不足55%，且特异度不足40%，BNP的临床应用受到了一定的限制[11,12]。基础研究表明，在心力衰竭发生的早期，肾素-血管紧张素-醛固酮系统（RAS）的激活导致AngⅡ型受体上调，APN、OPN可分别上升 20%和 35%[13]。APN、OPN的上升可以降低心肌细胞排列的整体性和有序性，并进一步导致心肌间质细胞增生，降低心室壁的顺应性[14]，可见APN、OPN作为评估心力衰竭的潜在生物指标的作用已越来越受到关注。

本次研究发现，DHF组患者血清中APN、OPN均明显升高，其中OPN升高幅度最为明显，可达（8.36±2.05）ng/ml。APN的升高可以通过影响心肌细胞的氧化代谢及ATP功能，进而导致线粒体损伤，加剧心肌细胞重塑。而OPN的升高是心脏压力过负荷后失代偿、心功能向衰竭转变的反应性应答过程，对于舒张性心力衰竭的发生发展具有重要的随访评估价值。NYHA分级是按诱发心力衰竭症状的活动程度将心功能的受损状况分为4级，分级越高，患者心力衰竭症状越严重。不同分级间的APN、OPN差异较为显著，随着NYHA分级的增加，APN、OPN呈现出持续上升的趋势。NYHA分级与心力衰竭血清生物学指标的平行关系较为显著，提示APN、OPN对于标识心功能损伤的严重程度具有重要的临床意义，临床上对于NYHA分期难以有效评估心力衰竭病情的患者，可以考虑联合检测血清APN或者OPN，进而进一步评估患者的临床转归。Fu等[15]在探讨NYHA分级为Ⅲ～Ⅳ级的左心室DHF患者的血清学心衰指标后发现，OPN在Ⅲ级心衰患者中的表达可达 10.5 ng/ml，而NYHA分级为Ⅳ级的患者血清中OPN的表达可进一步升高至14.6 ng/ml，OPN的血清学表达具有显著的NYHA分级依赖性。血流传播速度（Vp）、峰速比（S/D）更准确地反映心脏舒张功能的变化，克服了血流多普勒测定E/A比值诊断左心室舒张期心力衰竭的灵敏度和特异度不高的问题[16]。DHF患者由于舒张末期心室壁扩张功能不全，血流传播速度（Vp）、峰速比（S/D）及舒张早期运动速度（Ea）/舒张晚期运动速度（Aa）均可明显下降[17]。本研究观察到，DHF患者可同时合并心室收缩功能异常，Vp、S/D、Ea、Aa均明显下降。而相关关系分析可见APN、OPN 与 Ea/Aa、Vp、S/D 值均呈显著负相关；早期E/Ea值、Ar值和左室充盈压密切相关，是测量左室收缩和舒张功能的敏感指标，二者通过左心室舒张功能改变引起的血流速度变化，间接反映左心室舒张功能的APN、OPN与E/Ea值、Ar值的正相关关系较为明显，说明血清OPN及APN浓度的检测有潜力成为辅助临床诊断舒张性心力衰竭的重要血清学参考指标。APN、OPN与心功能指标如Ea/Aa、Vp、S/D的平行关系的探讨，将为心力衰竭患者的病情评估提供新的选择。然而本次研究并未探讨OPN、APN与血清促炎因子（IL-1B、TNF-α）及肾素-血管紧张素-醛固酮系统的关系，存在一定的不足。

DHF患者血清APN、OPN的水平显著升高，并且与患者的心功能NYHA分级及超声多普勒血流检查指标具有一定的相关性。对于老年左心室DHF患者，测定血清中APN及OPN有利于DHF的诊治和预后评估，APN、OPN对于评价心功能程度具有潜在的应用价值。

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Changes of serum osteopontin and APN content in aged DHF and its significance

XUN Lei，QI Hua-xin，WANG Fang-ming，et al.Department of Cardiology，Laiwu People′s Hospital，Laiwu 271100，China

Objective To study of the elderly left ventricular diastolic heart failure（DHF）patients with APN，OPN levels and its significance.Methods Selected the cardiovascular department of internal medicine of Laiwu People′s Hospital from June 2013 in accordance with the diagnostic criteria of 87 patients with DHF diagnosed in July 2015 as the DHF group，in the same period，87 healthy subjects were matched with the basic factors such as age and gender，and the control group was used as the control group.The levels of serum APN and OPN in the two groups were measured respectively，and the relationship between them was analyzed by echocardiography.Results The blood APN and OPN levels were significantly higher in DHF group ［（11.94±2.75）mg/L，and（8.36±2.05）ng/ml］than the control group［（6.91±1.86）mg/L and（2.20±0.92）ng/ml，P<0.05］.In DHF patients，the value of LVEF（64.32±7.98）%，Ea/Aa 0.64±0.21，VP（0.23±0.18）cm/s，S/D ratio of 0.91±0.30 were significantly below than the control group LVEF（67.98±8.14）%，Ea/Aa 1.27±0.24，VP（0.58±0.22）cm/s，S/D 1.40±0.35（P<0.05）.DHF group of E/Ea 16.30±3.27，Ar 32.86±8.95 were significantly higher than the control group E/Ea 1.94±7.33，Ar 20.75±6.90（P<0.05）.The value of APN and OPN has no correlation with LVEF（P>0.05），and Ea/Aa，Vp，S/D values with LVEF showed a significant negative correlation （P<0.05），and E/Aa value，P value showed a significant positive correlation（P<0.05）.Conclusion The serum APN，OPN levels in DHF patients are significantly elevate，and with a certain relevance with cardiac function.

The elderly； Left ventricular diastolic heart failure； APN； OPN

271100 山东省莱芜市，莱芜市人民医院心内科

10．3969/j．issn．1672－5301．2016．11．013

R541.6

A

1672-5301（2016）11-1008-05

2016-03-16）