血清Chemerin及IL-22水平在狼疮性肾炎中的表达及其与疾病活动性的相关性

周璇 寇沛

血清Chemerin及IL-22水平在狼疮性肾炎中的表达及其与疾病活动性的相关性

周璇 寇沛

目的 探讨狼疮性肾炎（LN）患者血清Chemerin及IL-22水平的表达及与疾病活动的相关性。方法 采用ELISA方法检测30例LN患者（活动期17例，静止期13例）和15例正常人群血清Chemerin及IL-22含量，并分析与其他相关指标间的相关性。结果 活动期LN患者Chemerin含量（139.55±21.36）μg/L、静止期患者（132.03±20.14）μg/L均高于健康对照组（98.60±12.25）μg/L（P＜0.01）；但活动期LN患者和静止期患者血清Chemerin含量差异无统计学意义（P＞0.05）。活动期LN患者血清IL-22含量［（328.37±15.86）pg/ml］显著高于静止期患者（239.18±16.75）pg/ml（P＜0.05）；且LN患者血清IL-22含量均显著高于正常对照组（P＜0.01）。活动期血清Chemerin与ESR和疾病活动指数（SLEDAI）评分呈正相关（r=0.431，r=0.557，P＜0.05）；与补体C3呈负相关（r=-0.473，P＜0.05）；IL-22水平与ESR和SLEDAI评分呈正相关（r=0.381，P＜0.05；r=0.658，P＜0.01）。结论 狼疮性肾炎患者血清Chemerin及IL-22水平增高，且与疾病的活动度有关，并可作为监测疾病严重程度和药物疗效的生物指标。

Chemerin IL-22 狼疮性肾炎

狼疮性肾炎（LN）是系统性红斑狼疮（SLE）累及肾脏所引起的一种免疫复合物性肾炎。Chemerin是一种脂肪细胞因子，通过与受体ChemR23结合对树突细胞和巨噬细胞发挥免疫趋化作用［1］。其与炎症标记物如超敏C反应蛋白、IL-6及TNF-α等密切相关［2，3］。在多种自身免疫炎症性疾病存在Chemerin的异常表达［4，5］。IL-22是IL-10细胞因子家族成员之一，其异常表达可见于多种疾病如类风湿关节炎等。研究发现，IL-22基因拷贝数突变是SLE发病的危险因子［6］。作者通过检测LN患者与正常人群外周血中Chemerin和IL-22水平，分析两者与LN临床及血清学指标以及疾病活动指数的相关性，探讨两者在LN发病中的作用。

1 临床资料

1.1 一般资料 2013年6月至2015年5月武汉市第一医院及武汉总医院住院及门诊LN患者30例，均符合1982年美国风湿病学会（ARA）修订的SLE诊断标准，均持续性蛋白尿＞0.5g/24h，镜下血尿、管型尿和（或）肾功能衰竭。所有患者在B超引导下行经皮肾穿刺活检。其中男10例，女20例，平均年龄28.9岁。所有LN患者按Bombardier等SLE疾病活动指数（SLEDAI），分为活动期17例、静止期13例。所有患者近＜4周未服用糖皮质类固醇激素、免疫抑制剂和血管扩张剂类药物，无感染表现。同期健康体检者15例为对照组，其中男6例，女9例；平均年龄27.8岁。

1.2 方法 （1）标本采集：收集LN患者24h尿液，记录其体积并留取10ml，同时空腹采集静脉血5ml，2500r/min，离心5min，留取尿液上清液和分离血清，置-70℃冰箱保存备用。（2）血清Chemerin检测：采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测血清Chemerin。人Chemerin试剂盒购自美国RayBiotech公司，操作严格按照说明书进行。分别设空白孔、标准孔和待测样品孔。加样，将待测样品各100μl依次加入96孔板中，用封板膜封板后置37℃温育2.5h。每孔加满洗涤液洗涤，静置30s后弃去，每孔加入酶标试剂100μl，空白孔除外。用封板膜封板后置37℃温育1h。再次洗涤，然后每孔加入显色剂A100μl，室温下反应45min后再加入显色剂B100μl，室温下反应30min。每孔加终止液50μl，终止反应。使用酶标仪（450nm）测量各孔的吸光度（OD值）。通过标准曲线计算样品浓度。（3）IL-22水平检测：采用ELISA检测血清IL-22。IL-22试剂盒由北京易科攀博公司提供，操作步骤严格按说明书进行。显色后即刻用酶标仪450nm波长检测OD值。（4）临床相关指标检测： 采用全自动生化分析仪检测24h尿蛋白、血清肌酐（Cr），血清补体C3采用单向免疫扩散法，ESR采用魏氏法测定。

1.3 统计学方法 应用SPSS18.0统计软件。计量资料以（±s）表示，组间比较采用方差分析，相关分析采用spearman检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 LN患者活动期和静止期血清Chemerin和IL-22水平 活动期LN患者Chemerin含量（139.55±21.36）μg/L、静止期患者（132.03±20.14）μg/L均高于健康对照组（98.60±12.25）μg/L（P＜0.05）；但活动期LN患者和静止期患者血清Chemerin含量差异无统计学意义（P＞0.05）。活动期LN患者血清IL-22含量（328.37±15.86）pg/ml显著高于静止期患者（239.18±16.75）pg/ml（P＜0.05）；且LN患者血清IL-22含量均显著高于正常对照组（P＜0.01）。见表1。

表1 LN患者及正常对照组血清Chemerin和IL-22水平比较（±s）

表1 LN患者及正常对照组血清Chemerin和IL-22水平比较（±s）

注：与正常对照组比较，*P＜0.01；与静止期比较，#P＜0.05

组别nChemerin（μg/L）IL-22（pg/ml）LN组活动期17139.55±21.36*328.37±15.86*# LN组静止期13132.03±20.14*239.18±16.75*正常对照组1598.60±12.25156.29±11.28

2.2 LN各期患者实验室指标的比较 LN活动期患者ESR和补体C3、SLEDAI评分与静止期比较差异有统计学意义（P＜0.05），血Cr、24h尿蛋白比较差异无统计学意义（P＞0.05）。

表2 LN患者各组临床与实验室指标的比较（±s）

表2 LN患者各组临床与实验室指标的比较（±s）

参数LN活动期组LN静止期组P值年龄（岁）29.3±3.728.1±2.90.175 ESR（mm/h）69.45±27.3235.24±16.610.001补体C3（g/L）62.12±51.24119.42±47.530.001 Cr（μmol/L）202.13±67.38186.36±53.220.236 24h尿蛋白（g/24h）2.126±0.5572.045±0.8120.103 SLEDAI评分11.8±2.91.9±1.370.001

2.3 血清Chemerin和IL-22水平与其他临床指标的相关性 活动期血清Chemerin与ESR和SLEDAI评分呈正相关（r=0.431，r=0.557，P＜0.05）；与补体C3呈负相关（r=-0.473，P＜0.05）；与血Cr、24h尿蛋白无相关性；活动期IL-22水平与ESR和SLEDAI评分呈正相关（r=0.381，P＜0.05；r=0.658，P＜0.01）；与Cr、24h尿蛋白、补体C3均无相关。见表2。

表3 活动期LN患者血清Chemerin和IL-22水平与临床指标的相关性

3 讨论

Chemerin是新发现的脂肪细胞因子。2003年Wittamer等［7］从卵巢癌患者的腹腔积液中纯化出来，并被证明是G蛋白耦联受体ChemR23的天然配体。研究证实Chemerin通过其受体ChemR23发挥对专职抗原提呈细胞（树突状细胞和巨噬细胞）的募集和迁移作用，参与组织免疫和炎症应答。当机体受到损伤、炎症侵袭时，多种蛋白酶可使前体Chemerin活化，与ChemR23特异性结合，促使巨噬细胞和未成熟的树突状细胞到达炎症部位［1］。Berg等［2］研究发现，Chemerin受刺激后可进一步扩增炎症信号，导致炎症因子和基质金属蛋白酶的释放。Chemerin可能在天然免疫与获得免疫的联系中起到桥梁作用。

近年来对Chemerin的研究多集中于糖尿病、代谢综合征、动脉粥样硬化等疾病，而在一些自身免疫性疾病则研究较少。研究发现在银屑病及系统性红斑狼疮皮肤受累患者皮损处的真皮层可见Chemerin的高表达［8，9］，在狼疮肾炎患者的肾组织管状上皮细胞及淋巴管内皮细胞周围Chemerin表达增高［10］。作者通过酶联免疫吸附试验检测Chemerin在LN患者及正常人外周血中的表达情况，结果显示LN患者外周血中Chemerin的浓度显著高于正常对照组，提示Chemerin参与LN发病。LN活动期外周血Chemerin水平高于静止期，提示外周血Chemerin表达水平与病情活动相关。ESR是临床最常用的评价病情活动的炎症指标。SLEDAI评分是评估SLE病情活动和严重性的国际通用标准之一。其能较好的反映SLE疾病的病情程度。补体C3在SLE疾病中降低，与SLE病情活动存在相关性，可作为监测疾病活动的参考指标。本资料显示，LN患者外周血中Chemerin水平与ESR、SLEDAI评分呈正相关，与补体C3呈负相关。故LN患者外周血中Chemerin表达水平与炎症指标及LN病情活动程度密切相关，可作为评价LN病情活动的一个指标。

IL-22是T细胞自分泌和旁分泌的细胞因子，参与多种自身免疫性疾病，和肿瘤的免疫耐受有关，如银屑病，炎症性肠病等［11］。IL-22分泌过多，可以使B细胞自发性过度兴奋，从而直接导致由浆细胞产生的自身抗体增多，循环免疫复合物堆积，引起组织和器官损伤，这在SLE发病机制中可能起重要作用。

研究报道，在SLE患者血清中IL-22的水平显著低于正常人［12］，Cheng等［13］认为IL-22水平与SLEDAI评分呈正相关。Qin等［14］研究发现分泌IL-22的CD4+T细胞的数量与SLE患者SLEDAI评分呈显著正相关。而Pan等［15］认为活动期SLE患者与非活动期SLE患者间IL-22水平无差异，IL-22水平与SLEDAI评分无相关性。目前研究认为SLE患者外周血IL-22水平下降，但IL-22与系统性红斑狼疮的活动性关联仍存在争议。因此IL-22是否参与SLE发病，其在SLE受损组织中局部表达如何，目前并不清楚。本资料显示，活动期LN患者血清IL-22含量显著高于静止期患者，且LN患者血清IL-22含量均显著高于正常对照组。活动期IL-22水平与ESR和SLEDAI评分呈正相关，与Cr、24h尿蛋白、补体C3均无相关。赵令等［16］研究认为，与健康对照组比较，SLE患者血浆中IL-17和IL-22的表达水平明显升高（P＜0.05）；SLE患者IL-22+CD4+T和IL-22-Th17细胞的比例随SLEDAI的升高而升高。这些研究结果提示细胞因子IL-22可能在SLE的发病中起致病性作用，并可作为监测疾病严重程度的生物指标。

总之，LN患者外周血Chemerin和IL-22水平较正常对照人群明显增高，且与炎症指标和疾病活动度明显相关，提示Chemerin和IL-22在LN发病中起重要的作用。

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Objective To investigate the relationship between level of serum Chemerin and IL-22 and disease activity in lupus nephritis patients. Methods 30 patients with lupus nephritis were enrolled in the study（active stage 17 cases，resting stage 13 cases），and 15 healthy individuals as a normal control. Chemerin and IL-22 levels in serum were examined with enzyme-linked immunosorbent assay （ELISA）. And their relations to other related indicators at different stages were studied. Results Serum Chemerin level in active patients with LN（139.55±21.36）μg/L and resting patients（132.03±20.14）μg/Lwere signifi cantly higher than that of healthy controls（98.60±12.25）μg/L（P＜0.05），but there was no difference in active stage and resting stage（P＞0.05）. serum IL-22 level in active patients with LN（328.37±15.86）pg/mL was signifi cantly higher than that of resting patients（239.18±16.75）pg/mL（P＜0.05），and serum IL-22 level in patients with LN was signifi cantly higher than that of healthy controls（P＜0.01）；The level of serum Chemerin in active patients with LN was positively correlated with ESR and SLEDA score（r=0.431，r=0.557，P＜0.05），and were negatively correlated with C3 levels（r=-0.473，P＜0.05）.The level of serum IL-22 in active patients with LN were positively correlated with ESR and SLEDA score（r=0.381，P＜0.05；r=0.658，P＜0.01）.Conclusion The levels of serum Chemerin and IL-22 expression in patients with LN are high，and positively correlated with disease activity，and can be used as a monitoring disease severity and effi cacy of biological indicators.

Chemerin IL-22 lupus nephritis

·诊治分析·

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