血清脂蛋白相关磷脂酶A2与不稳定心绞痛患者主要危险因素的相关性

张卫萍， 马云龙， 马　琼， 陈　涛， 郜珊珊

(西安交通大学第一附属医院心脏内科，西安　710061; *通讯作者，E-mail:docping@qq.com)



血清脂蛋白相关磷脂酶A2与不稳定心绞痛患者主要危险因素的相关性

张卫萍*， 马云龙， 马琼， 陈涛， 郜珊珊

(西安交通大学第一附属医院心脏内科，西安710061;*通讯作者，E-mail:docping@qq.com)

目的探讨血清脂蛋白相关磷脂酶A2(Lp-PLA2)与不稳定心绞痛患者主要危险因素的相关性。方法选择本院心脏内科2015-03～2015-06不稳定心绞痛住院就诊的52例患者为研究组，同期58例因胸痛行冠状动脉造影术(CAG)冠状动脉狭窄<30%且排除冠心病的患者为对照组。不稳定心绞痛患者入院后24 h内采用TIMI评分进行危险分层以及Gensini积分，并检测血压，心率，肝、肾功能，血脂，凝血功能，心肌酶，N端脑利钠肽前体(NT-proBNP)，高敏性C反应蛋白等指标。ELISIA法测定血清Lp-PLA2水平，并评价Lp-PLA2与不稳定心绞痛主要危险因素的相关性。结果不稳定心绞痛组脂蛋白(a)、低密度脂蛋白、肌钙蛋白I、肌酸激酶、NT-proBNP、纤维蛋白降解产物(FDP)、hs-CRP和Lp-PLA2水平明显高于对照组(P<0.05或P<0.01)，Apo-A1则明显降低(P<0.05)；TIMI评分高危组和中危组Lp-PLA2水平与Gensini积分高于低危组(P<0.01)；不稳定心绞痛组血清Lp-PLA2水平与TIMI评分、Gensini积分、LDL、脂蛋白a、APTT以及D-二聚体呈现明显的正相关(P<0.05)；Lp-PLA2水平与TIMI评分、Gensini积分、LDL和脂蛋白a呈线性回归。结论Lp-PLA2水平是不稳定心绞痛高危人群危险程度和冠脉病变严重程度的有力预测因素，并且Lp-PLA2水平的升高也直接反映了LDL和脂蛋白(a)与动脉粥样硬化不稳定斑块发展的相关性。

脂蛋白相关磷脂酶A2;不稳定心绞痛;危险因素;相关性

血脂代谢紊乱、炎症和氧化应激目前被认为是动脉粥样硬化病理生理发生和发展的重要机制。而脂蛋白相关的磷脂酶A2(Lp-PLA2)是磷脂酶超家族中的亚型之一，通过水解ox-LDL中的氧化磷脂，可生成脂类促炎物质，是具有血管特异性的炎症标志物[1]。因此目前许多研究认为Lp-PLA2可作为冠心病和缺血性卒中的独立危险因素[2,3]，但是Lp-PLA2与不稳定心绞痛患者主要危险因素之间是否存在相关性还没有确切的报道，本研究通过不稳定心绞痛与非冠状动脉疾病患者对比，旨在探讨不稳定心绞痛患者Lp-PLA2水平变化及其与冠心病主要危险因素之间的关联性，有助于全面认识其在冠心病发展过程中的综合作用。

1　资料和方法

1.1一般资料

选择西安交通大学第一附属医院心脏内科2015-03～2015-06因冠心病不稳定心绞痛住院就诊的52例患者为研究组，纳入标准依据美国心脏病学会基金会(ACCF)/美国心脏协会(AHA)发布的2012版《不稳定型心绞痛和非ST段抬高型心肌梗死治疗指南》。排除标准包括陈旧性心肌梗死、心肌炎、心肌病、心脏瓣膜病等在内的心脏疾病，未经控制的严重心律失常或高血压，慢性严重心力衰竭(NYHA Ⅲ、Ⅳ级)，严重肝、肾疾病，甲状腺疾病，外周血管疾病，急、慢性炎症性疾病(肺炎、胆囊炎等)，恶性肿瘤，全身免疫性疾病及其他严重合并症的患者。另外选取同期58例因胸痛行冠状动脉造影术(CAG)冠状动脉狭窄<30%且排除冠心病的患者为对照组。研究组男39例，女13例，年龄39-80岁，平均(61±11)岁。对照组男38例，女20例，年龄22-85岁，平均(60±16)岁。

1.2研究方法

1.2.1临床资料记录患者性别、年龄、发病至就诊的时间，有无高血压病、糖尿病、脑卒中等既往病史，同时进行呼吸、心率、收缩压、舒张压等指标的测量。

1.2.2样本采集与检测所有患者冠脉造影前经肘正中静脉取血5 ml，2 500×g常温离心15 min，分离血清，分装后置于-80 ℃冰箱中保存，同时由本院检验中心进行肝、肾功能，血脂，同型半胱氨酸，超氧化物岐化酶，凝血功能包括血浆凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血酶原时间(APTT)、血浆凝血酶时间(TT)、纤维蛋白降解产物(FDP)、纤维蛋白原(Fig)以及D-二聚体，心肌酶，N端脑利钠肽前体(NT-proBNP)和高敏性C反应蛋白(hs-CRP)等指标检测。

1.2.3血清Lp-PLA2水平检测采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定Lp-PLA2含量，试剂盒由中美合资天津康尔克生物科技有限公司所提供，检测过程均严格按照说明书进行操作。

1.2.4冠脉病变评分采用心肌梗死溶栓治疗(the thrombolysis in myocardial infarction, TIMI)评分对冠心病心绞痛进行危险分层[4]，按照TIMI危险评分系统分别积分并加和，再根据各患者总积分将其分为低、中、高危患者(TIMI：0-2分低危，3-4分中危，5-7分高危)。采用Gensini积分进行冠脉病变程度的评价[5]。主要以每一冠状动脉的狭窄基本评分乘以该病变部位的系数，即为该病变血管的评分，各病变血管得分总和即为该患者冠状动脉病变狭窄程度的总评分。

1.3统计学分析

2　结果

2.1两组患者基本临床资料比较

两组间年龄、性别、高血压、糖尿病、血压、心率、HAb1c、高密度脂蛋白、甘油三酯、同型半胱氨酸、超氧化物岐化酶、谷丙转氨酶(ALT)、肌酐(Cr)、PT、APTT、TT、Fig、D-二聚体差异无统计学意义。不稳定心绞痛组脂蛋白(a)、低密度脂蛋白、肌钙蛋白Ⅰ、肌酸激酶、NT-proBNP、FDP水平明显高于对照组，Apo-A1低于对照组，差异具有统计学意义(P<0.05或P<0.01，见表1)。

2.2两组Lp-PLA2与hs-CRP水平的比较

不稳定心绞痛组hs-CRP和Lp-PLA2水平明显高于对照组，差异具有统计学意义(P<0.01，见表2)。

2.3TIMI评分危险分层各组患者血清 Lp-PLA2水平的比较

对TIMI评分危险分层的三组患者Lp-PLA2水平与Gensini积分进行比较，单因素方差分析显示三组间Lp-PLA2与Gensini积分存在显著性差异，高危组Lp-PLA2水平与Gensini积分高于低危组(P<0.01)，同时中危组Lp-PLA2水平和Gensini积分高于低危组(P<0.01)，高危组与中危组之间比较则差异无统计学意义。

2.4Lp-PLA2与主要危险因素的相关性分析

不稳定心绞痛组血清Lp-PLA2水平与TIMI评分(r=0.668，P=0.012)、Gensini积分(r=0.368，P=0.020)、LDL(r=0.277，P=0.004)、脂蛋白a(r=0.529，P=0.000)、APTT(r=0.385，P=0.000)、D-二聚体(r=0.385，P=0.000)呈现明显的正相关。与年龄、血压、同型半胱氨酸、PT、TT、hs-CRP以及心肌酶的相关指标无明显相关性。

表1两组患者基本临床资料比较

Table 1Baseline characteristics of the patients in two groups

项目 不稳定心绞痛组(n=52)对照组(n=58)t/χ2P年龄(岁)61±1160±160.3780.71男性[例(%)]39(75.0)38(65.5)1.1740.28高血压[例(%)]30(57.7)40(69.0)1.5060.22糖尿病[例(%)]14(26.9)11(19.0)0.9890.32收缩压(mmHg)133±21 138±26 -1.101 0.27舒张压(mmHg)75±1176±12-0.4540.65心率(次/min)75±1476±16-0.3470.73ALT(U/L)65.18±12.2969.47±19.02-1.387 0.17Cr(μmol/L)67.98±17.6367.45±22.190.1380.89HAb1c(%)6.07±1.435.85±1.130.8990.37脂蛋白(a)(mg/L)205±87 161±87 2.6480.00甘油三酯(mmol/L)1.71±1.251.55±1.050.7290.47低密度脂蛋白(mmol/L)2.37±0.842.01±0.652.5280.012高密度脂蛋白(mmol/L)1.00±0.301.05±0.32-0.8430.40Apo-A1(g/L)1.07±0.171.15±0.22-2.1160.04Apo-B(g/L)0.70±0.200.75±0.25-1.1500.25肌钙蛋白I(ng/ml)0.14±0.050.12±0.042.3270.02肌酸激酶(U/ml)113±10977±382.3610.02同型半胱氨酸(μmol/L)18.89±10.1516.95±8.91 1.0680.29超氧化物岐化酶(U/ml)131±18 135±21 -1.066 0.29NT-proBNP(pg/ml)1301±254 975±486 4.3340.00PT(s)13.50±0.70 13.60±1.07 -0.572 0.57APTT(s)35.49±4.11 36.19±4.17 -0.8850.38TT(s)16.72±0.79 16.55±1.34 0.7990.45FDP(mg/L)1.67±0.281.58±0.191.9900.04Fig(mg/L)3.15±1.253.31±2.18-0.4650.64D-二聚体(mg/L)0.65±0.330.77±0.68-1.1560.25

组别nhs-CRP(mg/L)Lp-PLA2(ng/ml)不稳定心绞痛组5230.73±11.21191±85对照组588.85±4.38122±77 t13.7464.467 P0.000.00

分组nLp-PLA2(ng/ml)Gensini积分低危组14139±3512.15±3.26中危组21 187±42**17.22±4.17**高危组15 218±57**18.42±3.08**

与低危组比较，**P<0.01

2.5Lp-PLA2与TIMI评分及主要危险因素的回归分析

分别将Lp-PLA2与TIMI评分进行Logistic 回归分析以及与Gensini积分、LDL、脂蛋白a等变量进行线性回归分析，结果显示Lp-PLA2与TIMI评分回归系数r=0.648(P=0.000)，Lp-PLA2与Gensini积分、LDL、脂蛋白a的回归系数r分别为0.468(P=0.022)、0.345(P=0.041)、0.529(P=0.000)。

3　讨论

目前认为炎症反应在动脉粥样硬化斑块由稳定到不稳定的发展中具有重要的作用。炎症反应诱导斑块破裂、血小板活化，继而血栓形成，引起冠状动脉管腔严重狭窄甚至闭塞，最终导致心肌缺血性损伤和坏死。Lp-PLA2是由441个氨基酸残基组成的一种丝氨酸酯酶，主要由成熟的巨噬细胞、泡沫细胞、T淋巴细胞及肥大细胞等炎性细胞在粥样斑块及肝脏中产生[6]。目前已经证实，冠心病患者血浆 Lp-PLA2水平或活性显著升高，它独立于传统危险因素及 hs-CRP 等炎性指标来预测冠心病事件的发生，是新的冠心病独立危险因素[7]。但是Lp-PLA2与传统危险因素之间的关系并未有明确的说明。本研究结果再次验证冠心病主要危险因素LDL、脂蛋白a以及甘油三酯明显高于非冠状动脉疾病人群，Apo-A1则明显下降；同时不稳定心绞痛患者血清Lp-PLA2与hs-CRP水平也明显增高，提示炎症激活是导致不稳定斑块发展的重要机制，进一步通过TIMI分层研究显示，高危组不稳定心绞痛患者血清Lp-PLA2水平明显高于低危组，说明Lp-PLA2水平与不稳定心绞痛危险严重程度有密切的联系。同时Lp-PLA2水平分别与TIMI评分和Gensini积分的相关及Logistic回归分析结果进一步证实Lp-PLA2对不稳定心绞痛危险程度和冠脉病变程度具有重要的预测价值。

Lp-PLA2与不稳定心绞痛主要危险因素的相关分析及回归结果显示，年龄、血压、HAb1c以及心肌酶等指标与Lp-PLA2水平无明显相关，提示Lp-PLA2是一个相对独立、稳定的风险预测因素。而Lp-PLA2与LDL、脂蛋白a、APTT、D-二聚体水平呈现正相关，说明在不稳定斑块发展过程中，炎症反应、脂质代谢紊乱以及凝血功能激活三者存在密切联系。同时进一步的分析显示Lp-PLA2与LDL、脂蛋白a具有一定程度的线性相关，不仅说明斑块发展过程中炎症与脂质代谢紊乱存在密切的关系，而且Lp-PLA2升高也部分反映了LDL和脂蛋白a变化对不稳定心绞痛的促进作用。有研究显示脂蛋白a是评价不稳定心绞痛的较佳的标志物，与不稳定冠脉综合征及治疗预后密切相关[8,9]。而另一方面的研究显示，循环中80%以上的Lp-PLA2与LDL结合。动脉管壁上的LDL在氧化应激的作用下转化为氧化性低密度脂蛋白(ox-LDL)，ox-LDL表面较多的氧化磷脂可以激活LDL中的Lp-PLA2，从而产生氧化脂肪酸(OxFA)和溶血磷脂酰胆碱(lysoPC)，刺激巨噬细胞增殖，炎症细胞趋化，产生基质金属蛋白酶，诱导斑块不稳定[10]。这些都进一步证实Lp-PLA2是反映冠脉病变不稳定斑块发展的一个重要标志物。这与既往类似的研究基本一致[11]。但是本研究也提示Lp-PLA2与hs-CRP之间也无明显相关性，可能与各自在炎症反应中的作用机制有关，Lp-PLA2与非感染性炎症有关，在动脉粥样斑块中的巨噬细胞表达较多[12]。hs-CRP是由肝脏合成的一种全身性炎症反应急性期的非特异性标志物，对于冠脉粥样硬化炎症变化敏感性高，但特异性差。

通过本研究可以认为，Lp-PLA2水平变化对不稳定心绞痛危险程度和冠脉病变严重程度的预测具有重要的参考价值，并且Lp-PLA2水平的升高也直接反映了LDL和脂蛋白a对冠脉病变斑块稳定性的影响，这对于不稳定心绞痛中高危患者指导强化药物治疗及早期冠脉血运重建发挥重要作用。但是本研究当前入组的样本例数仍较少，仍需要更大样本研究重复验证该研究结论；此外由于未涉及Lp-PLA2抑制剂的研究，因此Lp-PLA2水平的降低与LDL和脂蛋白a之间的相关性尚需进一步研究。

[1]Du Y,Wei F,Dong Z,etal.Prognostic value of serum LP-PLA2 and hs-CRP in unstable atherosclerotic plaques[J].Clin Exp Hypertens,2011,33(2):113-116.

[2]Tonkin AM,Blankenberg S,Kirby A,etal.Biomarkers in stable coronary heart disease,their modulation and cardiovascular risk:The LIPID biomarker study[J].Int J Cardiol,2015,201:499-507.

[3]Persson M,Berglund G,Nelson JJ,etal.Lp-PLA2 activity and mass are associated with increased incidence of ischemic stroke:a population-based cohort study from Malm?[J].Atherosclerosis,2008,200(1):191-198.

[4]Marwick T,D’Hondt AM,Baudhuin T,etal.Optimal use of dobutamine stress for the detection and evaluation of coronary artery disease:combination with echocardiography or scintigraphy,or both[J].J Am Coll Cardiol,1993,22(1):159-167.

[5]Hess EP,Agarwal D,Chandra S,etal.Diagnostic accuracy of the TIMI risk score in patients with chest pain in the emergency department:a meta-analysis[J].CMAJ,2010,182(10):1039-1044.

[6]Tousoulis D,Papageorgiou N,Androulakis E,etal.Lp-PLA2-a novel marker of atherosclerosis:to treat or not to treat[J].Int J Cardiol,2013,165(2):213-216.

[7]Packard CJ,O’Reilly DS,Caslake MJ,etal.Lipoprotein-associated phospholipase A2 as an independent predictor of coronary heart disease.West of Scotland Coronary Prevention Study Group[J].N Engl J Med,2000,343(16):1148-1155.

[8]Konishi H,Miyauchi K,Kasai T,etal.Impact of lipoprotein(a) as residual risk on long-term outcomes in patients after percutaneous coronary intervention[J].Am J Cardiol,2015,115(2):157-160.

[9]Niccoli G,Chin D,Scalone G,etal.Data on the lipoprotein(a),coronary atherosclerotic burden and vulnerable plaque phenotype in angiographic obstructive coronary artery disease[J].Data Brief,2016,7:1409-1412.

[10]Ikonomidis I,Kadoglou NN,Tritakis V,etal.Association of Lp-PLA2 with digital reactive hyperemia,coronary flow reserve,carotid atherosclerosis and arterial stiffness in coronary artery disease[J].Atherosclerosis,2014,234(1):34-41.

[11]Maiolino G,Bisogni V,Rossitto G,etal.Lipoprotein-associated phospholipase A2 prognostic role in atherosclerotic complications[J].World J Cardiol,2015,7(10):609-620.

[12]Ferguson JF,Hinkle CC,Mehta NN,etal.Translational studies of lipoprotein-associated phospholipase A2in inflammation and atherosclerosis[J].J Am Coll Cardiol,2012,59(8):764-772.

Correlation between lipoprotein-associated phospholipase A2 and main risk factors in unstable angina pectoris patients

ZHANG Weiping*, MA Yunlong, MA Qiong, CHEN Tao, GAO Shanshan

(DepartmentofCardiovascularMedicine,FirstAffiliatedHospitalofXi’anJiaotongUniversity,Xi’an710061,China;*Correspondingauthor,E-mail:docping@qq.com)

ObjectiveTo investigate the correlation between lipoprotein-associated phospholipase A2(Lp-PLA2) and main risk factors of unstable angina pectoris(UA).MethodsTotally 52 patients with UA in Department of Cardiovascular Medicine from March 2015 to June 2015 were chosen as study group, and 58 chest pain patients with coronary stenosis<30% detected by coronary angiography and non-coronary heart disease were chosen as control group. All UA patients were subjected to risk assessment and stratification with TIMI risk score and Gensini score within 24 h after admission, and blood pressure, heart rate, liver and renal function, blood lipids, coagulation function including prothrombin time(PT), activated partial thromboplastin time(APTT), fibrin degradation product(FDP), fibrinogen and D-dimer, myocardial enzymes, NT-proBNP, and high sensitivity C reactive protein(hs-CRP) were determined. Lp-PLA2 was measured by enzyme-linked immunosorbent assay and its relationship with risk factors of UA was analyzed.ResultsThe levels of Lp-PLA2, lipoprotein(a),low density lipoprotein, troponin I, creatine kinase, NT-proBNP,FDP and hs-CRP were significantly higher in UA group than in control group(P<0.05 orP<0.01), but Apo-A1 level was lower(P<0.05). Lp-PLA2 level and Gensini score were significantly elevated in high and middle risk groups compared with low risk group(P<0.01). Lp-PLA2 level was positively correlated with TIMI risk score,Gensini score,LDL,lipoprotein(a), APTT and D-dimer(P<0.05). There was a linear regression between Lp-PLA2 level and TIMI risk score,Gensini score, LDL and lipoprotein(a).ConclusionThe level of Lp-PLA2 is a potent predictive factor as hazardous level and the severity of coronary lesion in UA patients.The higher level of Lp-PLA2 also directly suggests the relation of LDL and lipoprotein(a) with unstable atherosclerotic plaque.

Lp-PLA2;unstable angina pectoris;risk factors;relation

国家自然科学青年基金资助项目(81102843)

张卫萍，女，1973-07生，博士，主治医师，E-mail：docping@qq.com

2016-04-27

R541.4

A

1007-6611(2016)08-0685-04

10.13753/j.issn.1007-6611.2016.08.002