98株肺炎链球菌的临床分布及耐药性分析

孔　山，忽胜和，杨新原，赵卫东*

（1.大理大学临床医学院，云南大理　671000；2.大理大学附属医院，云南大理　671000）

98株肺炎链球菌的临床分布及耐药性分析

孔山1，忽胜和2，杨新原2，赵卫东1*

（1.大理大学临床医学院，云南大理671000；2.大理大学附属医院，云南大理671000）

目的：分析大理大学附属医院肺炎链球菌的临床分离情况及耐药性，为临床诊断和治疗提供参考和依据。方法：收集2011年3月至2014年3月分离的98株肺炎链球菌，菌株鉴定和药敏试验采用法国生物梅里埃VITEK-2 Compact全自动微生物鉴定与药敏分析仪，药敏结果判读采用美国临床实验室标准协会（CLSI）2012版，耐药性分析采用WHONET5.6软件。结果：98株肺炎链球菌中，分离自痰液77株、咽拭子15株、血液3株、脑脊液2株；科室来源以儿科、呼吸内科、ICU、皮肤科为主，分别为34株、27株、16株和11株；年龄分布≤5岁儿童52株，≥60岁老年人34株。该菌对红霉素、四环素和复方新诺明的耐药率较高，分别为90.8%、81.6%和80.6%，对青霉素的耐药率为26.5%，对头孢噻肟、厄他培南、阿莫西林、美罗培南和头孢曲松的耐药率较低，均小于20%，未发现耐万古霉素、莫西沙星和利奈唑胺菌株。结论：肺炎链球菌感染以呼吸系统感染为主，感染人群以儿童和老年人为主。临床应合理使用抗生素，防止耐药菌的不断增加。

肺炎链球菌；临床分布；耐药性

［DOI］10.3969/j.issn.2096-2266.2016.08.017

肺炎链球菌（Streptococcus pneumoniae）是社区获得性肺炎的主要病原菌之一，易感人群主要是2岁以下婴幼儿及65岁以上的老年人，据世界卫生组织统计，肺炎链球菌性疾病每年在全球造成约160万人死亡，其中5岁以下儿童约占死亡人数的63%。大多数菌株不致病或致病力很弱，仅部分菌株有致病力，主要引起大叶性肺炎，其次是支气管炎，也可侵入机体其他部位，引起中耳炎、脑膜炎和败血症等疾病〔1〕。近年来，肺炎链球菌对临床常用抗生素如β-内酰胺类、大环内酯类、磺胺类和氟喹诺酮类耐药情况不容乐观，甚至出现了同时对几类抗生素耐药的多重耐药菌株，给临床治疗带来许多困难。为了解本院肺炎链球菌的临床分布和对主要抗生素的耐药特点，对2011年3月至2014年3月我院临床科室分离的肺炎链球菌进行分析。

1　材料

1.1菌株来源收集2011年3月至2014年3月大理大学附属医院临床送检的标本，包括痰液、咽拭子、血液和脑脊液等标本，共非重复分离到肺炎链球菌98株。

1.2仪器与试剂CO2培养箱（HEAL FORCE）、全自动血液培养仪（Bact/ALERT 3D）、全自动微生物鉴定与药敏分析仪（VITEK-2 Compact）、哥伦比亚血琼脂平板和肺炎链球菌药敏AST-GP68卡（Bio-Merieux）。

2　方法

2.1分离培养将临床送检痰液、咽拭子、脑脊液等标本接种于哥伦比亚血琼脂平板，置37℃含5% CO2的培养箱中培养24～48 h，挑选菌落周围有草绿色溶血环、边缘隆起、中央凹陷、呈脐窝状的可疑单个菌落，接种于哥伦比亚血平板进行菌落纯化。

2.2初步鉴定对可疑菌落进行革兰染色、镜检；挑选出革兰染色呈阳性，菌体成双排列，呈矛头状，无鞭毛、芽孢的菌落，做进一步的Optochin敏感试验。

2.3上机鉴定及药敏试验挑选对Optochin敏感的菌株，用VITEK-2 Compact及配套肺炎链球菌AST-GP68卡进行菌株鉴定和药敏试验，质控菌株为肺炎链球菌ATCC 49619，采用WHO提供的WHONET5.6软件进行耐药性分析。

2　结果

2.1标本来源与分布98株肺炎链球菌主要分离自≤5岁儿童和≥60岁老年人，其中儿童52株（53.1%），老年人34株（34.7%）；主要来自口痰、咽拭子、血液、脑脊液标本，其中分离自痰液77株（78.6%）、咽拭子15株（15.3%）、血液3株（3.1%）、脑脊液2株（2.0%）。见表1。科室来源以儿科、呼吸内科、ICU、皮肤科为主，分别为34株（34.7%）、27株（27.6%）、16株（16.3%）、11株（11.2%）。见表2。

表1　肺炎链球菌的标本来源构成比

表2　肺炎链球菌的科室分布构成比

2.2肺炎链球菌的药敏结果分析98株肺炎链球菌对15种抗生素的耐药情况。见表3。

3　讨论

肺炎链球菌是引起社区获得性肺炎的主要病原菌之一，常引起儿童肺炎、中耳炎，严重者可引起脑膜炎、败血症等疾病。但其大部分菌株在正常人的口腔及鼻咽部经常存在，一般不致病，只形成带菌状态，只有在免疫力下降时才致病，尤其在呼吸道病毒感染后或婴幼儿，年老体弱者易发生肺部感染〔2〕。

肺炎链球菌感染最常发生在冬季和初春，这个时段也正是上呼吸道疾病的高发季。从本研究资料看，分离的标本主要来源于痰液（78.6%），其次是咽拭子（15.3%），人群也主要来源于≤5岁儿童和≥60岁的老人，这与儿童尤其是婴幼儿的免疫系统尚未发育完全以及老年人免疫力相对低下、易受侵袭有关〔3〕。

表3　98株肺炎链球菌对常用抗生素的药敏情况

青霉素作为肺炎链球菌感染的首选药物，但耐药株的流行已成为全球性问题，目前临床上常用苯唑西林药敏试验来预测肺炎链球菌对青霉素的敏感性〔4〕。本研究其耐药率为26.5%，应给予持续监测与关注。其他β-内酰胺类抗生素，如头孢菌素，已成为一线药物，与万古霉素联合，来治疗脑膜炎及社区感染的重症肺炎。该菌虽对β-内酰胺类耐药率虽较低，均小于20%，但对其耐药的肺炎链球菌也常表现对大环内酯类、磺胺类等药物多重耐药〔5〕。氟喹诺酮类药物在呼吸道感染的治疗中应用广泛，但由于此类药物的软骨毒性，儿童感染者应选头孢菌素类抗生素为佳。万古霉素、莫西沙星和利奈唑胺虽未见耐药菌株，但由于剂量、入侵组织、价格等原因限制了其在临床中的广泛应用〔6-7〕。

大环内酯类抗生素的广泛应用、耐药菌株的克隆传播被认为是肺炎链球菌对大环内酯类抗生素耐药的重要原因，耐药机制主要是通过erm介导的核糖体甲基化和由mef介导的外排泵系统〔8〕。本院肺炎链球菌对红霉素耐药率高达90.8%，且大多数大环内酯类抗生素具有相似或相近的化学结构，肺炎链球菌在产生对红霉素耐药的同时，也会对阿奇霉素、克拉霉素等新型大环内酯类产生交叉耐药，该类药物已不适用于作为治疗肺炎链球菌感染的常用药物〔9〕。

在某些国家和地区，易发肺炎链球菌感染的高危人群（包括小儿，尤其是患有镰状细胞病的儿童或先天性无脾脏或脾切除而缺乏脾脏功能的患者最易感染）用多价肺炎链球菌多糖疫苗预防〔10〕。我国使用的肺炎链球菌疫苗为美国默沙东公司研制生产的“多价肺炎链球菌疫苗”（纽莫法23），该疫苗是将肺炎球菌灭活，提取其荚膜多糖制成的，接种后诱发产生抗体，可以有效的预防肺炎链球菌肺炎和败血症。

综上所述，考虑到肺炎链球菌所致疾病的临床重要性，准确掌握肺炎链球菌的耐药现象是至关重要的。临床医师必须合理、审慎使用抗生素以减少选择性压力，从而控制肺炎链球菌耐药株的播散。结合药敏试验结果和药效学及药动学资料，根据当地监测数据来制定合适的用药方案，将有助于控制肺炎链球菌耐药的发展。

〔1〕扈秀武.肺炎链球菌致双耳化脓性中耳炎1例报道〔J〕.检验医学与临床，2011，8（14）：1792.

〔2〕MARC G R，MARK W H，RÉKA G，et al.Large Community Outbreak of Streptococcus pneumoniae Serotype 5 Invasive Infection in an Impoverished，Urban Population〔J〕.Clinical Infectious Diseases，2008，47：768-774.

〔3〕闵小春，罗少锋，伍婷婷，等.肺炎链球菌的耐药性监测〔J〕.中华医院感染学杂志，2014，24（13）：3149-3151.

〔4〕林雪峰，周文斐，江丹英，等.儿童肺炎链球菌对青霉素耐药性分析〔J〕.中华医院感染学杂志，2011，21（9）：1881-1883.

〔5〕徐敏，张建华，臧国庆.肺炎链球菌对抗菌药物耐药机制研究进展〔J〕.中华医院感染学杂志，2008，8（2）：152-156.

〔6〕孟爱华，张帅，张淑明，等.肺炎链球菌药物敏感性分析〔J〕.中国临床医生，2014，42（3）：36-37.

〔7〕朱旭慧，孙自镛，李丽，等.肺炎链球菌的分布及耐药性分析〔J〕.现代检验医学杂志，2010，25（2）：100-102.

〔8〕陈蓉，赵根明.肺炎链球菌对大环内酯类抗生素耐药的研究进展〔J〕.中国感染与化疗杂志，2010，10（3）：230-233.

〔9〕马巧红，陈群英，何娟妃，等.114株肺炎链球菌的临床分布及药敏分析〔J〕.中国微生态学杂志，2012，24（2）：162-164.

〔10〕秦颖，余宏杰.2012年WHO关于肺炎链球菌疫苗立场文件的解读〔J〕.中华预防医学杂志，2014，48（2）：85-90.

〔Abstract〕Objective:To investigate the clinical distribution and antibiotic resistance of Streptococcus pneumoniae in the Affiliated Hospital of Dali University in order to provide reference for clinical diagnosis and treatment.Methods:A total of 98 S.pneumoniae were obtained from March 2011 to March 2014.The identification and drug sensitive test of all strains were measured by VITEK-2 Compact analyzer.Drug sensitivity results were interpreted by using the American Clinical and Laboratory Standards Institute（CLSI）2012 Edition.The resistance results were analyzed via WHONET 5.6 software.Results:Among 98 strains of S.pneumoniae，77 strains were isolated from sputum，15 from pharynx swab，3 from blood and 2 from cerebrospinal fluid.Those strains were mainly from Paediatrics，Respiratory Medicine，ICU，and Dermatology，respectively 34，27，16，and 11.52 of the strains were from children of 5 and under，and 34 were from the elderly people of 60 or over.The assay showed that the resistance rates of S.Pneumoniae to erythromycin，tetracycline and SMZ-TMZ were relatively high，reaching 90.8%，81.6%and 80.6%respectively.The resistance rateto penicillin was 26.5%.The resistance rates to cefotaxime，ertapenem，amoxicillin，meropenem and ceftriaxone were less than 20%.No vancomycin and moxifloxacin and linezolidresistant strain was found.Conclusion：S.pneumoniae infection were mainly caused by respiratory infection. S.pneumoniae infection was the commonest in children and the elderly.We should use antibiotics rationally so as to prevent the increase of drug-resistant bacteria.

〔Key words〕Streptococcus pneumoniae；clinical distribution；antibiotic resistance

（责任编辑董杰）

Analysis of the Clinical Distribution and Antibiotic Resistance of 98 Strains of Streptococcus Pneumoniae

Kong Shan1，Hu Shenghe2，Yang Xinyuan2，Zhao Weidong1*
（1.Clinical College，Dali University，Dali，Yunnan 671000，China；2.Dali Affiliated Hospital of Dali University，Dali，Yunnan 671000，China）

R446.5

B

2096-2266（2016）08-0062-03

云南省科技厅应用基础研究基金资助项目（2013FD095）

2015-07-15

2015-10-30

孔山，讲师，主要从事临床病原微生物研究.

赵卫东，博士研究生.