可溶性内皮细胞蛋白C受体和高敏C反应蛋白水平预测糖尿病患者血管并发症的价值

蒙绪标，符兰芳，刘婷婷，郑地明

（中南大学湘雅医学院附属海口医院 内分泌科，海南 海口 570208）

论著

可溶性内皮细胞蛋白C受体和高敏C反应蛋白水平预测糖尿病患者血管并发症的价值

蒙绪标，符兰芳，刘婷婷，郑地明

（中南大学湘雅医学院附属海口医院 内分泌科，海南 海口 570208）

目的探讨可溶性内皮细胞蛋白C受体（sEPCR）和高敏C反应蛋白（hsCRP）预测糖尿病（DM）患者血管并发症的价值。方法20例1型DM患者、30例2型DM患者及30例健康志愿者纳入该次研究。酶联免疫吸附法（ELISA）来测定受试者血清sEPCR和hsCRP含量。结果与对照组相比，两种类型糖尿病患者中sEPCR和hsCRP水平都升高。sEPCR能够预测1型糖尿病患者大血管并发症和血栓形成，P值分别为0.016和0.015。而hsCRP可以明显预测2型糖尿病患者的大血管并发症，P=0.042。结论1型和2型糖尿病患者sEPCR和hsCRP水平高于健康志愿者，提示其血管内皮功能损伤。sEPCR对1型糖尿病患者大血管并发症和血栓形成有一定预测作用，而hsCRP对2型糖尿病患者大血管并发症有一定预测作用。

糖尿病；sEPCR；hsCRP；血管并发症

血管内皮功能障碍是1型和2型糖尿病（diabetes mellitus，DM）患者微血管和大血管病变重要因素[1]。血管内皮功能障碍不仅是血管并发症的重要发病因素，也是影响其发展进程与临床后遗症的重要因素[2]。大血管并发症的类型主要有冠状动脉疾病、外周动脉疾病及中风，而微血管并发症主要包括糖尿病肾病、糖尿病神经病变及糖尿病视网膜病变。内皮功能障碍是指内皮层失去生理特性，转变为血管收缩、血栓或致炎因子状态[3]。可溶性内皮细胞蛋白C受体（soluble endothelial protein C receptor，sEPCR）是内皮细胞蛋白C受体胞外域裂解产物[4]。内皮细胞蛋白C受体是1型跨膜蛋白，主要在大血管内皮中表达[5]。全身炎症患者体内sEPCR水平将升高，并且可能引发血栓[6]。抗凝血疗法可降低sEPCR水平[7]。高敏C反应蛋白（high sensitivity C reactive protein，hsCRP）是急性期反应物，也是炎症敏感标志物。许多研究证实，即使是在临床正常范围内，hsCRP也是代谢综合征前兆，是2型糖尿病患者早期心血管疾病的独立预测因子。本研究主要探讨1型与2型糖尿病患者内皮损伤标志物sEPCR和hsCRP水平，预测糖尿患者血管并发症的价值。

1　资料与方法

1.1研究对象

本研究纳入2013年1月-2013年12月在海口医院内分泌门诊就诊的20例1型DM患者和30例2型DM患者，同时纳入同期在本院进行体检的30例健康志愿者作为对照组。1型糖尿病患者平均病程（12.2±9.4）年（1～31年），中位值为10年。2型糖尿病患者平均病程（10.8±5.7）年（4～25年），中位值为9年。50例糖尿病患者中16例男性和34例女性。1型DM患者组中，10例（50%）伴有高血压，3例（15%）伴有微血管并发症，1例伴有神经病变，2例伴有肾病，4例（20%）伴有冠状动脉疾病（大血管并发症），1例（5%）伴有肾病和冠状动脉疾病，6例（30%）为单纯性DM，无其他并发症。2型DM患者组中，18例（60%）伴有高血压，6例（20%）伴有微血管并发症，1例伴有神经病变，4例伴有肾病，1例伴有视网膜病变，3例（30%）伴有大血管并发症，其中有2例伴有冠状动脉疾病、1例伴有外周动脉疾病，1例（3.3%）伴有肾病兼冠状动脉疾病，8例（26.7%）为单纯性DM，无其他并发症。患者用药史：23%的患者曾服用辛伐他汀（降血脂药物），33%的患者曾服用镇痛剂（24%对乙酰氨基酚，9%阿司匹林）。41%的患者曾服用抗高血压剂（22%血管紧张素酶抑制肽，9%钙通道阻滞剂，6%选择性β受体阻滞剂，4%非选择性β受体阻滞剂）。9%的患者曾服用黄嘌呤氧化酵素抑制剂，6%的患者曾服用呋喃苯肢酸。6%的患者曾服用硫酸低铁。24%的患者曾摄入钙与维生素D（13%维生素D，11%钙）。另外，11%的患者曾服用叶酸，11%的患者曾服用雷尼替丁，6%的患者曾服用奥美拉唑。1型糖尿病患者曾接受胰岛素治疗。2型糖尿病患者曾单独或与二甲双胍联合口服降糖药。所有糖尿病患者均有完整病史资料。吸烟或全身炎症疾病或感染患者被排除在研究之外。对照组为8名男性和22名女性。

1.2样本采集

试验组与对照组受验者空腹12 h后，无菌条件下采集3m l静脉血。血液离心15min，将血清分离成两部分。一部分用于测定生化标志物，而另一部分保存在-80℃冰箱中，用于测定sEPCR和hsCRP。

1.3检测方法

采用酶联免疫吸附法（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）测定可溶性内皮细胞蛋白C受体和高敏C反应蛋白水平。sEPCR ELISA和hsCRP试剂盒购自美国R&D公司。hsCRP试剂批内精度CV%为8.3%～15.2%，而hsCRP试剂批间精密度CV%为7.8%～9.9%。贝克曼生化仪测定血糖、尿素、肌酐、胆固醇、三酰甘油、高密度脂蛋白（high densityl ipoprotein，HDL）和低密度脂蛋白（low density lipoprotein，LDL）。

1.4统计学方法

采用SPSS 18.0统计软件。计量资料用均数±标准差（）、中位数或范围表示。根据数据分布，组间比较采用t检验或Mann-Whitney U检验。多重回归分析hsCRP和sEPCR与血管并发症和血栓形成的独立相关性。P<0.05为差异具有统计学意义。

2　结果

2.1患者一般资料

1型糖尿病患者包括男性7例和女性13例（男女比例为1∶1.9），2型糖尿病患者包括男性12例和女性18例（男女比例为1∶1.5）。1型糖尿病组，年龄18～70岁，平均（45.9±16.7）岁。2型糖尿病组，年龄22～80岁，平均（52.4±13.6）岁。1型糖尿病组和2型糖尿病组患者年龄比较，差异无统计学意义（P=0.136；见表1）。两组间患者病程差异也无统计学意义（P=0.246；见表1）。对照组8例男性和22例女性，男女比例为1∶2.8；年龄20~60岁，平均（36.6±12.5）岁。与对照组相比，两组糖尿病组的患者年龄都较大。与对照组相比，1型糖尿病患者血糖和肌酐水平升高，而胆固醇、三酰甘油和糖化血红蛋白水平增加。LDL、HDL与尿素差异无统计学意义。另一方面，与对照组相比，2型糖尿病患者血糖、肌酐和三酰甘油水平升高。此外，胆固醇和糖化血红蛋白水平也增加。LDL与尿素差异无统计学意义。1型DM患者与2型DM患者相比，所有生化参数差异均无统计学意义（表1）。

表1　患者一般资料 （）

表1　患者一般资料 （）

注：P1是与对照组比较，P2是指2型和1型糖尿病患者比较

参数2型糖尿病组年龄/岁　36.6±12.5　45.9±16.7　52.4±13.6 t/P值　t=7.883，P1=0.041　t=15.721，P1=0.000；t=2.172，P2=0.136葡萄糖/（mg/dl）　85.8±17.1　211.8±109.0　171.9±83.6 t/P值　t=18.272，P1=0.000　t=19.287，P1=0.000；t=1.873，P2=0.175胆固醇/（mg/dl）　160.8±29.1　206.1±61.5　201.9±51.8 t/P值　t=10.283，P1=0.009　t=13.874，P1=0.004；t=0.943，P2=0.804三酰甘油/（mg/dl）　87.5±43.5　146.7±92.5　192.8±131.3 t/P值　t=8.487，P1=0.017　t=17.627，P1=0.000；t=1.422，P2=0.180 HDL/（mg/dl）　52.2±10.8　50.2±18.4　42.9±13.8 t/P值　t=1.042，P1=0.754　t=9.473，P1=0.013；t=1.972，P2=0.116 LDL/（mg/dl）　106.3±22.5　118.4±38.4　120.8±40 t/P值　t=1.563，P1=0.371　P1=0.168；P2=0.831尿酸/（mg/dl）　29.5±7.9　41.8±34.2　35.6±28.7 t/P值　t=2.169，P1=0.138　t=1.485，P1=0.478；t=1.463，P2=0.491肌酐/（mg/dl）　0.4±0.1　1.2±0.9　1.2±0.9 t/P值　t=14.892，P1=0.001　t=19.286，P1=0.000；P2=0.825糖化血红蛋白%/（mmol/mol）　4.6±0.7（27±16）　10.2±2.7（88±6）　7.9±2.6（63±5）t/P值　t=13.874，P1=0.004　t=15.126，P1=0.003；t=1.981，P2=0.115对照组1型糖尿病组

2.21型、2型糖尿病患者及健康志愿者sEPCR和hsCRP水平比较

与对照组相比，1型DM患者sEPCR和hsCRP水平均升高（P<0.05），而2型DM患者的sEPCR和hsCRP水平升高。1型DM患者与2型DM患者相比，sEPCR和hsCRP水平差异无统计学意义（表2）。根据糖尿病患者并发症情况分组分析后发现，与对照组相比，单纯糖尿病患者的sEPCR和hsCRP水平升高；并发高血压的糖尿病患者hsCRP水平升高，但sEPCR水平差异无统计学意义；伴大血管并发症和血栓形成的糖尿病患者sEPCR和hsCRP水平均升高；伴微血管并发症的糖尿病患者sEPCR水平升高，但hsCRP水平差异无统计学意义（表3）。

2.3sEPCR和hsCRP与糖尿病患者临床参数相关性分析

多元回归分析表明1型DM患者的sEPCR水平与病程显著相关（F=4.691；b=0.455；P=0.040），而hsCRP与病程及高血压均显著相关（与病程相关时，F=4.282；b=0.583；P=0.018；与高血压相关时，b=0.522；P=0.031）。2型DM患者sEPCR与病程、高血压等参数均无显著相关性，而hsCRP与血糖显著相关（F=3.314；b=0.400；P=0.030）。1型DM患者sEPCR水平（b=0.539；t=2.706；P=0.016）和BMI（b=-0.503；t=-2.402；P=0.030）能够预测大血管并发症（表4）。2型DM患者hsCRP（b=0.365；t=2.138；P=0.042）和胆固醇（b=0.455；t=2.706；P=0.012）能够预测大血管并发症（表4）。两种DM患者中，sEPCR和hsCRP都不能预测微血管并发症。1型DM患者sEPCR水平（b=0.526；t=2.742；P=0.015）和胆固醇（b=0.463；t=2.234；P=0.046）能够预测血栓形成。

表2　1型、2型糖尿病患者与对照组受试者sEPCR和hsCRP水平比较

表3　不同并发症糖尿病患者sEPCR和hsCRP水平比较

表4　1型和2型糖尿病患者大血管并发症和血栓形成的预测因素

3　讨论

心血管疾病是糖尿病常见并发症，也是糖尿病患者死亡的主要原因。内皮功能障碍与1型和2型 DM相关[3]。该实验发现糖尿病患者组血浆sEPCR水平明显高于健康对照组（P<0.05），这可能是由于EPCR从内皮细胞表面不断脱落引起，VAN-WISSEN等[8]研究结果与本研究结果一致。VAN-WISSEN等还认为sEPCR值较高可能与DM患者炎症反应和内皮细胞损伤有关。此外，该结果还发现sEPCR和hsCRP无相关性，提示除炎症反应外，还有多种因素影响DM患者sEPCR水平升高。本研究还发现sEPCR与糖尿病病程显著正相关，提示内皮细胞损伤程度与病程有关，这也被认为是1型DM患者sEPCR升高的混杂因素。此外，单纯性糖尿病、伴大血管并发症和血栓形成糖尿病患者sEPCR水平明显高于健康对照组（P<0.05）。与此相反，对照组与伴高血压及微血管并发症（P>0.05）糖尿病患者间sEPCR水平差异无统计学意义。sEPCR能够抑制APC抗凝血活性，所有sEPCR较高患者都处于血栓前状态，更容易形成血栓[9]。此外，尽管大血管并发症和血栓形成患者sEPCR更高，但糖尿病患者亚组内sEPCR水平差异无统计学意义，这可能由于样本数较少的原因（大血管并发症患者n=8，血栓形成患者n=5）（P>0.05）。将大血管并发症和血栓形成作为独立变量，每种类型DMsEPCR与其他参数作为因变量，进行多元回归分析分发现sEPCR可能对糖尿病患者大血管并发症和血栓形成发病机制起着关键作用，能够预测这些并发症发生。本研究是国内首次证实sEPCR能够作为糖尿病患者大血管并发症和血栓形成的预测因子。

本研究还发现1型和2型糖尿病患者hsCRP水平明显高于健康对照组（均P<0.05）。高血糖症可以促进多种细胞释放肿瘤坏死因子α（TNF-α）和白细胞介素6（IL-6）等炎症细胞因子，这些细胞因子可以促进肝脏生成与释放hsCRP，从而使血液循环中hsCRP水平升高[10]。本组2型DM患者hsCRP与血糖呈正相关，1型DM患者病程与高血压都与hsCRP显著相关，也可以被认为是1型DM患者hsCRP升高的独立混杂因素。以往研究证实高血压与hsCRP血浆水平呈正相关[11]。高血压可能增加血管氧化应激和对动脉壁的促炎性作用。男性患者hsCRP与血糖呈显著正相关（r=0.5；P=0.01），而女性患则无此相关性。因此，性激素可能影响血糖与hsCRP相关性，这可能是男性患者心血管疾病风险较高的一个原因[12]。此外，与对照组相比，单纯DM、微血管和大血管并发症、血栓形成和同时罹患高血压和DM患者hsCRP水平均明显增加（P<0.05）。本研究中，hsCRP被认为是2型糖尿病患者大血管并发症的重要预测因子，可以作为此类患者检测大血管并发症的早期标志物。

总之，与健康对照组相比，1型和2型糖尿病患者表现出较高的sEPCR和hsCRP水平，说明这些患者可能存在内皮损伤。sEPCR可以被用作1型DM患者大血管并发症和血栓形成的预测因子，而hsCRP可以被用作2型DM患者大血管并发症和血栓形成的预测因子。

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（张西倩编辑）

Role of sEPCR and hsCRP levels in prediction of vascular complications of patients with diabetes mellitus

Xu-biao Meng，Lan-fang Fu，Ting-ting Liu，Di-ming Zheng
（Department of Endocrinology，the Affiliated Haikou Hospital of Xiangya Medical College，Central South University，Haikou，Hainan 570208，China）

Objective To measure soluble endothelial protein C receptor（sEPCR）and high-sensitivity C reactive protein（hsCRP）levels as markers of endothelial damage in both types of diabetes mellitus（DM）and to determine if they can be used as predictors of vascular complications.Methods Fifty patients with DM（20 with type 1 and 30 with type 2 DM）and 30 healthy subjects were included.All were subjected to measurement of sEPCR and hsCRP by enzyme linked immunosorbent assay.Results sEPCR and hsCRP were significantly increased in both types of DM when compared to the control group.sEPCR was a significant predictor of macrovascular complications and thrombosis in type 1 DM（P=0.016 and P=0.015，respectively），while hsCRP was a significant predictor of macrovascular complications in type 2 DM（P=0.042）.Conclusions Patients with type 1 or type 2 DM exhibit higher sEPCR and hsCRP levels compared to healthy controls，which suggest endothelial damage.sEPCR could be used as a predictor of macrovascular complications and thrombosis in type 1 DM，whereas hsCRP might be used as a predictor of macrovascular complications in type 2 DM.

diabetes mellitus；sEPCR；hsCRP；vascular complication

R587.1

A

10.3969/j.issn.1005-8982.2016.14.012

1005-8982（2016）14-0058-05

2015-12-28

郑地明，E-mail：32170485@qq.com