幽门螺杆菌CagA、VacA基因分型

邵礼成，余志辉，王介朱



·临床医学·

幽门螺杆菌CagA、VacA基因分型

在2型糖尿病患者中的表达与分析

邵礼成，余志辉，王介朱

目的：探讨幽门螺杆菌(Helicobacterpylori，Hp)不同基因分型在2型糖尿病(T2DM)患者中的表达及临床意义。方法：170例T2DM患者纳入观察组，并将同时期的170例非T2DM患者纳入对照组，比较2组空腹血糖、体质量指数、腰臀比等一般资料；比较2组间Hp感染、Hp细胞毒素相关蛋白、空泡毒素相关蛋白基因型感染的差异性；同时比较观察组中Hp感染患者与非Hp感染患者糖化血红蛋白、空腹胰岛素以及胰岛素敏感指数水平。结果：观察组患者空腹血糖、体质量指数、腰臀比、Hp感染率、糖化血红蛋白以及Hp细胞毒素相关蛋白、空泡毒素相关蛋白阳性率均显著高于对照组(P<0.01)；同时观察组中Hp感染组患者的糖化血红蛋白和空腹胰岛素水平显著高于非感染组，而胰岛素敏感指数则显著低于非感染组(P<0.01)。结论：Hp细胞毒素相关蛋白基因和空泡毒素相关蛋白基因分型在 T2DM的发生过程中具有重要意义。

幽门螺杆菌；糖尿病，2型；幽门螺杆菌细胞毒素相关蛋白；空泡毒素相关蛋白；糖化血红蛋白

随着社会的高速发展以及人民生活水平的显著提高，糖尿病患者数也呈现逐年递增的趋势，其中2型糖尿病(T2DM)患者数量占据越来越多的比重。我国预计到2025年T2DM患者将突破5 000万，成为全球T2DM患者最多的国家[1-2]。糖尿病的持续病变能够导致患者发生各种严重的并发症，对患者的生命健康造成了巨大的威胁。近年研究[3]表明，幽门螺杆菌(Helicobacterpylori，Hp)的感染与糖尿病的发病存在着密切的关系。与此同时，细胞毒素相关蛋白(CagA)、空泡细胞毒素相关蛋白(VacA)与Hp毒素的表达释放密切相关，并通过诱导细胞凋亡和免疫细胞释放细胞因子来加重机体的免疫损伤[4]。本研究运用多种检测手段探讨Hp不同基因分型在T2DM发病机制的作用，从而为临床预防和治疗T2DM提供参考依据。现作报道。

1　资料与方法

1.1一般资料将我院2013年1月至2014年4月收治的170例内分泌门诊及住院的T2DM患者纳入观察组，其中男117例，女53例；年龄45～67岁。所有患者均符合世界卫生组织T2DM诊断标准(1999年)；均排除心、肝、肾等脏器疾病。选择同时期在我院就诊的170例非T2DM患者纳入对照组，其中男112例，女58例；年龄43～63岁。2组患者性别和年龄均具有可比性。

1.2方法当日测定血压、身高及体质量。所有患者禁食12 h以上，采静脉血测定空腹血糖(FBG)、糖化血红蛋白(HbA1c)、空腹胰岛素(FINS)以及胰岛素敏感指数(ISI)；采用高效液相层析法通过普莱默斯PDQ型(Premier Hb 9210)糖化血红蛋白分析仪检测2组HbA1c水平。采用14C-尿素酶呼气实验确定Hp是否感染，由安徽养和医疗器械设备有限公司提供14C-尿素酶呼气实验所用胶囊、同位素比值谱分析仪以及Hp检测仪呼气卡，当患者14C 尿素呼气实验判断值值在100 dpm时即为阳性，在100 dpm以下时为阴性。采集所有患者静脉血2 mL，按照Hp免疫斑点实验检测试剂盒说明书(深圳欣康数码科技有限公司)操作，并采用配套的XK2100型生物芯片阅读仪对检测结果进行分析。

1.3统计学方法采用t(或t′)检验和χ2检验。

2　结果

2.12组患者体质量指数(BMI)、腰臀比和FBG比较观察组患者BMI、腰臀比和FBG均显著高于对照组(P<0.01)(见表1)。

表1　2组患者体质量指数、腰臀比和FBG比较

2.22组患者Hp感染率比较观察组Hp感染率为62.4%，明显高于对照组的13.5%(P<0.01)(见表2)。

表2　2组Hp感染率比较(n)

2.32组患者HpCagA和VacA基因型阳性率比较观察组患者Hp CagA和VacA阳性率分别为61.2%和57.6%，均明显高于对照组的12.4%和11.2%(P<0.01)(见表3)。

表3　2组患者Hp CagA和VacA阳性率比较

2.4观察组中Hp感染患者和非感染患者HbA1c、FINS及ISI比较Hp感染组患者的HbA1c和FINS水平均显著高于非感染组，而ISI水平则显著低于非感染组(P<0.01)(见表4)。

*示t′值

3　讨论

糖尿病是一种由环境因素、遗传因素以及生活方式等多种因素共同作用所导致的一种全身慢性代谢疾病[5]。同时随着社会经济的高速发展以及人们生活水平的提高，再加上人们生活方式的改变，社会老龄化程度的加剧，无论是在发达国家还是发展中国家，糖尿病的患病率都呈现逐年增长的趋势，其中T2DM的比例又占到90%以上[6-7]。随着近年来医学工作者对于T2DM的深入研究，发现T2DM与炎症的发展有着密切的关系，炎症可能通过诱导胰岛B细胞凋亡和胰岛素抵抗导致T2DM。由于T2DM患者糖代谢的紊乱、免疫功能受损等，往往会出现呼吸道、泌尿道、皮肤等多种形式的急慢性感染。Hp的感染与T2DM有着密切的关系[8]。本研究显示，观察组Hp感染率为62.4%，而对照组仅为13.5%，Hp感染率显著高于对照组(P<0.01)。同时在T2DM患者中Hp感染组患者的HbA1c和FINS水平均显著高于非感染组，而ISI水平则显著低于非感染组(P<0.01)，说明Hp感染与糖尿病的发生发展有着密切的关系。研究[9]表明，Hp能够破坏成人耐糖量，并且与HbA1c水平呈正相关，同时较高的BMI也能够增强这种作用；同时Hp能够显著影响T2DM患者的血糖波动，根除Hp的感染能够有效地控制患者血糖、减少低血糖事件以及保证患者血糖平稳[2]，Hp在成人糖尿病中扮演着重要的角色。本研究中，观察组BMI、腰臀比以及HbA1c均显著高于对照组(P<0.01)，这种作用可能与患者Hp感染后胃蠕动以及胃动力下降，同时糖尿病患者胃肠激素分泌失调有关。

自从Hp被人们发现以来，世界医学界对其进行了深入的研究，发现Hp是特异性生长在人胃黏膜以及黏膜下层，能够产生毒素的一种革兰阴性菌，同时还具有基因组的多样性。CagA与毒素的表达密切相关，其主要是通过细菌的4型分泌装置将其注入细胞中，通过磷酸化扰乱细胞通路信号的正常转导，从而导致细胞的异常增殖，同时诱导多种炎症因子的分泌，加重胃黏膜的炎症反应。VacA是一种由Hp分泌的相对分子质量为95 000的常见蛋白质毒素，其进入宿主细胞内，通过改变细胞上离子的聚集，增加细胞膜的通透性，使水分子内流，从而在细胞内形成空泡；同时其还能够通过诱导细胞凋亡，增加炎症因子的释放，从而加重患者的免疫损伤，帮助细菌逃脱机体的免疫监视[10-11]。本研究结果显示，观察组CagA与VacA的阳性率分别为61.2%和57.6%，均显著高于对照组(P<0.01)。由此也表明CagA与VacA在检测糖尿病的发生发展中有着重要的地位，亦与其发病机制密切相关，值得进行进一步的研究。

[1]JEON CY,HAAN MN,CHENG C，etal.Helicobacterpyloriinfection is associated with an increased rate of diabetes[J].Diabetes Care,2012,35(3):520.

[2]OLUYEMI A,ANOMNEZE E,SMITH S,etal.Prevalence of a marker of activeHelicobacterpyloriinfection among patients with type 2 diabetes mellitus in Lagos,Nigeria[J].BMC Res Notes,2012,5:284.

[3]梁志丽,肖金朋,王谏珠,等.2型糖尿病患者中幽门螺杆菌感染与胰岛素抵抗的相关性分析[J].中外医学研究,2014,12(10):3.

[4]LI J,OU ZY,WAGN FJ,etal.Distinctiveness of the cagA genotype in children and adults with peptic symptoms in South China[J].Helicobacter,2009,14(4):248.

[5]杨馥宁,王诗洋,高丽君,等.HbA1c、血小板活化标志物在糖尿病及其并发症诊断和监测中的作用[J].北华大学学报(自然科学版),2014,15(3):338.

[6]WALEED IA.Helicobacterpyloriinfection and its relationship to metabolic syndrome:is it a myth or fact?[J].Saudi J Gastroenterol，2011,17(3):165.

[7]陈海潮,单平囡,许德顺.联合检测幽门螺杆菌CagA、VacA、Ure、Hsp60及RdxA的临床价值[J].中华医院感染学杂志,2012,22(11):2268.

[8]NAJA F，NASEREDDINE L，HWALLA N.Association ofH.pyloriinfection with insulin resistance and metabolic syndrome among Lebanese adults[J].Helicobacter,2012,17(6):444.

[9]姚岚，刘玉兰.幽门螺杆菌感染与 2 型糖尿病的相关性[J].中国医药导报,2013,10(13):23.

[10]GUO X，ZHAO BH，ZHANG MX.Risk factors ofHelicobacterpyloriinfection among adults in northern China[J].Hepatogastroenterology,2011,58(106):306．

[11]COHEN D，MUHSEN K.Association between gastricHelicobacterprioricolonization and glycated hemoglobin levels:is this another reason to eradicate.Pyloriinadulthood[J].J Infect Dis,2012,205(8):1183.

(本文编辑刘梦楠)

Expression and significance of the genotype CagA and VacA of Helicobacter pylori in patients with type 2 diabetes

SHAO Li-cheng,YU Zhi-hui,WANG Jie-zhu

(DepartmentofInternalMedicine,TheFifthPeople′sHospitalofFoshan,FoshanGuangdong528211,China)

Objective:To explore the expressions of the different genotypes ofHelicobacterpylori(Hp) in patients with type 2 diabetes mellitus(T2DM).Methods:One hundred and seventy patients with T2DM and 170 non-T2DM were divided into the observation group and control group,respectively.The fasting blood glucose,body mass index,ratio of waist to hip,Hp infection,genotypes of cytotoxin associated protein and vacuolating cytotoxin associated protein of Hp,and the levels of glycated haemoglobin,fasting insulin and insulin sensitivity index between two groups were compared and analyzed.Results:The fasting blood glucose,body mass index,ratio waist to hip,infection rate of Hp,and the positive rates of cytotoxin associated protein and vacuolating cytotoxin associated protein of Hp in observation group were significantly higher than those in control group(P<0.01).The levels of glycated haemoglobin and fasting insulin in observation group were significantly higher than those in control group,the insulin sensitivity index in observation group was significantly lower than that in control group(P<0.01).Conclusions:The genotypes of cytotoxin associated protein and vacuolating cytotoxin associated protein of Hp play an important role in the occurrence process of T2DM.

Helicobacterpylori;diabetes,type 2;cytotoxin associated protein;vacuolating cytotoxin associated protein;glycoseylated hemoglobin

2014-11-26

佛山市科学技术局医学类科技攻关项目(2014AB00395)

单位] 广东省佛山市第五人民医院 内科，528211

[作者简介] 邵礼成(1978-)，男，副主任医师.

1000-2200(2016)07-0863-03

R 378；R 587.1

A

10.13898/j.cnki.issn.1000-2200.2016.07.007