影响马氏珠母贝植核育珠绩效的关键技术研究

符韶，梁飞龙，邓岳文（广东海洋大学珍珠研究所，广东　湛江　524025）

影响马氏珠母贝植核育珠绩效的关键技术研究

符韶，梁飞龙，邓岳文
（广东海洋大学珍珠研究所，广东湛江524025）

摘要：本研究在海水珍珠养殖核心区域流沙湾，通过设置不同术前处理方法、不同配液进行小片保养和不同模式育珠三个实验，比较其对马氏珠母贝植核育珠绩效的影响。术前处理方法分别为抑制性腺、温度差促排、盐度差促排和对照组（A1、A2、A3、AD）；小片保养分别为配液1号、配液2号、配液3号、和对照组（B1、B2、B3、BD）；育珠模式分别为海区休养与育珠、池塘休养与育珠和池塘休养与海区育珠（C1、C2、C3）。经休养、育珠结束后，比较其育珠绩效相关指标值的差异。实验结果显示：实验Ⅰ中各术前处理组间育珠贝的育珠绩效值差异不具有统计学意义（P＞0.05），而各处理组（A1、A2、A3）育珠贝的成活率、留核率、成珠率、优良珠率和育珠绩效值均显著高于对照组（AD）（P＜0.05），其中温度差促排组（A2）具有最高的育珠绩效值；实验Ⅱ中各不同配液保养组间育珠贝的育珠绩效值差异不具有统计学意义（P＞0.05）；而通过细胞小片保养各组（B1、B2、B3）的育珠绩效值都显著高于对照组（BD）（P＜0.05）。其中配液1号组（B1）具有最高的育珠绩效值；实验Ⅲ中各不同育珠模式组间育珠贝的成活率和留核率：（C1）与（C2）之间差异不具有统计学意义（P＞0.05），而和（C3）之间存在统计学意义；育珠贝的成珠率、优良珠率和育珠绩效值：（C1）与（C3）之间差异不具有统计学意义（P＞0.05），而和（C2）之间存在统计学意义（P＜0.05），；其中池塘休养与海区育珠组（C3）具有最高的育珠绩效值。

关键词：马氏珠母贝；细胞小片；术前处理；养殖模式；育珠绩效

马氏珠母贝（Pinctada martensii）是我国南部沿海生产海水珍珠的主要珍珠母贝［1］，其所产珍珠占全国海水珍珠的95%以上［2］。中国利用马氏珠母贝培育的珍珠被世人称为“南珠”，已有60多年人工养殖的历史，在发展高峰期，养殖面积达l万hm2，最高年产珍珠达30 t［3］，曾是国家出口创汇和南海部分地区海洋经济发展的支柱产业［2-4］。但由于前一段时期，养殖规模无度扩展、养殖环境不断恶化以及从业者生产行为的不规范，造成珍珠贝病死率高，育珠产量低，珍珠质量差；加上自然灾害频发所造成的危害，导致南珠产业不断萎缩，产业效益和市场竞争力日益下滑。针对马氏珠母贝珍珠产业存在的问题，相关科研单位研究人员和从业者在马氏珠母贝的优良品种选育［5-11］、养殖容量与生产规律的探索［12-15］和养殖与育珠的生产技术改进［16-20］等方面都进行了大量深入的研究，为珍珠贝的种质改良、区域养殖容量合理标准的确定、养殖育珠技术的提高提供了科学依据。近年来，相关业者还借鉴国内外淡水珍珠养殖的成功经验［21-23］，利用池塘培育海水珍珠，对减轻海区生产负荷、修复海区生态环境作了初步的尝试，并总结了一定的经验［4，24-25］。本文主要针对影响马氏珠母贝植核育珠绩效的几个关键技术环节，试图探索提高马氏珠母贝植核育珠效果的技术手段、有效方法和最佳模式。笔者通过采用不同的处理方法进行母贝术前处理、不同的配液进行小片保养和不同的育珠模式进行休养育珠的相关对比实验，并取得了不错效果和可靠的依据。

1　材料与方法

1.1材料

1.1.1实验贝来源于流沙湾养殖海区经人工选育的马氏珠母贝速长系F5，植核贝选1.5～2.5龄，壳高5.5～6.5 cm，贝体健康无病害者；小片贝年龄1.0～1.5龄，壳高5.0～6.0 cm，贝体健康、体表鳞片生长旺盛、放射肋清楚，壳内边缘珍珠层呈银白色伴虹彩色明显者。

1.1.2珠核珠核由深海贝类砗磲的贝壳研磨加工而成的正圆形，直径6.3～7.0 mm。

1.1.3生态系休养池塘池塘面积约30 hm2，呈长方形，池水深度200～250 cm。靠潮位差纳、排自然海水，并施肥和接人藻种，确保池塘良好的养殖生态环境。吊养浮筏由木桩、胶丝绳和塑料浮球组成。

1.2方法

1.2.1术前处理根据预植核贝性腺发育状况，分别采用抑制性腺法和促进排放法进行术前处理。针对性腺发育尚未成熟但生理机能较强的母贝，加大其吊养密度、控制饵料、水流促使性腺退化；选择较成熟的母贝，促使性腺发育成熟后，一是采用阴干与调节吊养水层的温度差刺激诱导性腺排放；二是采用经淡水浸泡后再吊进海区的盐度差刺激诱导性腺排放。经抑制或促排处理的母贝，都要经过一周左右的休整期，才可进行植核手术。

1.2.2植核手术挑选经术前处理的预植核贝通过排贝、栓口；细胞小片经保养液浸泡5～10 min后，按常规的植核方法与程序完成植核和贴片手术。

1.2.3术后休养植核后的手术贝，以每笼40只装笼，根据实验需要分别吊养于生态系池塘或海区休养。休养期间，定期检查、清理死贝及吐核，统计病死率和吐核率。休养期1个月左右，休养结束经统计后并笼转入珍珠育成。育珠期间根据附着生物的附着情况，约每隔3个月左右清理育珠贝一次及更换养殖网笼具。

1.3实验设计

分别设置不同术前处理方法、不同配液进行小片保养和不同育珠模式三个实验，比较其对马氏珠母贝植核育珠绩效的影响。实验Ⅰ术前处理方法：设置抑制性腺组（A1）、温度差促排组（A2）、盐度差促排组（A3）和生产对照组（AD）四个组合，每组合用贝5 000只，设三个重复组；实验Ⅱ小片保养：设置配液1号组（B1）、配液2号组（B2）和配液3号组（B3）和生产对照组（BD）四个组合，每组合用贝5 000只，设三个重复组；实验Ⅲ育珠模式：设置海区休养与育珠组（C1）、池塘休养与育珠组（C2）和池塘休养与海区育珠组（C3）三个组合，每组合用贝5 000只，设三个重复组。

各实验组均按照常规技术进行植核与育珠管理。实验期间，海区的海水温度16.1～31.9℃，海水盐度21.9～27.6，pH值8.1～8.2。

1.4数据处理

实验过程中，通过统计各组合的成活率、留核率、成珠率、收珠率和优良珠率等性能指标，并计算出育珠绩效值。育珠贝成活率=开珠贝数/植核贝数，育珠贝留核率=留核数/开珠贝数，育珠贝成珠率=收商品珠数/留核数，优良珠率=优良珠数/商品珠数（优良珍珠评价标准：形状圆形、表面光洁无瑕疵、色泽莹润、珠层厚度300 μm以上），育珠绩效值为各项指标值相乘之积。育珠期结束后，利用单因素方差（ANOVA）分析比较实验内各组合的成活率、收珠率、优珠率和育珠绩效值差异。若差异显著，再采用LSD进行各组合间均值比较，显著性水平设为P ＜0.05。

2　结果与分析

2.1不同术前处理方法对马氏珠母贝育珠绩效的影响

实验结果表明，各处理组间育珠贝的成活率、留核率、成珠率、优良珠率和育珠绩效值差异不具有统计学意义（P＞0.05）；各处理组（A1、A2、A3）育珠贝的成活率、留核率、成珠率、优良珠率和育珠绩效值均显著高于对照组（AD）（P＜0.05），其中温度差促排组（A2）具有最高的育珠绩效值。

2.2不同配液进行小片保养对马氏珠母贝育珠绩效的影响

实验数据显示，各不同配液保养组间的育珠贝成活率、留核率、成珠率和优珠率分别存在具有统计学意义差异（P＜0.05）和差异不具有统计学意义（P ＞0.05），最终的育珠绩效值差异不具有统计学意义（P＞0.05）；而通过细胞小片保养各组的育珠绩效值都显著高于对照组（P＜0.05）。其中配液1号组（B1）具有最高的育珠绩效值。

2.3不同育珠模式对马氏珠母贝育珠绩效的影响

从表3可见：各不同育珠模式组间育珠贝的成活率和留核率：（C1）与（C2）之间差异不具有统计学意义（P＞0.05），而和（C3）之间存在统计学意义差异；育珠贝的成珠率、优良珠率和育珠绩效值：（C1）与（C3）之间差异不具有统计学意义（P＞0.05），而和（C2）之间存在统计学意义（P＜0.05），其中池塘休养与海区育珠组（C3）具有最高的育珠绩效值。

表1　马氏珠母贝不同术前处理方法的育珠绩效比较

表2　马氏珠母贝不同配液进行小片保养的育珠绩效比较

表3　不同育珠模式的育珠绩效比较

3　讨论

3.1术前处理对马氏珠母贝育珠绩效的影响

术前处理是人工培育珍珠的关键技术之一，其目的是通过人为方法将植核母贝的生理机能调整到适应植核手术的最佳状态，以达到提高植核育珠贝的成活率、留核率和优珠率，最终提高育珠绩效。有文献报道了术前处理方法对提高大珠母贝（P. maxima）［26］、珠母贝（P.margaritifera）［27-28］、马氏珠母贝（P.martensii）［29］和企鹅珍珠贝（Pteria penguin）［30］育珠效果影响。例如符韶、邓陈茂等［28］在珠母贝的植核育珠中，通过对母贝的阴干和温差促排处理，使育珠贝成活率提高了12.3%，留核率和收珠率分别提高了35.7%和62.1%。本研究的实验结果表明：经过术前处理各试验组的平均成活率、留核率、成珠率、优珠率和育珠绩效值比未处理组分别提高12.1%、11.8%、10.6%、17.9%和64.1%。这说明了术前处理具有显著提高马氏珠母贝植核育珠绩效的作用。根据笔者生产实践经验分析，其原因主要是：植核贝未经术前处理，其生理机能旺盛，当受到手术的突然刺激时，神经和内分泌系统发生异常的应激反应，使其身体对植入的珠核和异体组织（细胞小片）的排斥与抗拮作用较强烈，容易造成吐核，且小片移植后形成珍珠囊的过渡时间较长，容易形成菱柱珠或脓包珠，降低成珠率。此外，未经术前处理的植核贝，部分性腺较丰满，不但对植核手术有妨碍，而且植核后容易形成污珠、尾巴珠和异形珠，影响珍珠质量；另一方面，由于对手术的应激反应过量，破坏了手术贝自身生理活动的平衡协调，也易造成手术贝的过度衰弱、甚至死亡［31］。本研究根据马氏珠母贝预术贝的生理状态，分别采用相应的术前处理方法，将其生理机能调整到植核的最佳状态，降低其对手术的过激反应和排斥、抗拮作用，维持自身生命活动的平衡与协调，术后恢复快，从而提高植核育珠贝的成活率、留核率和珍珠质量。

3.2小片保养对马氏珠母贝育珠绩效的影响

育珠细胞小片的处理技术主要围绕提高小片细胞的活力，促进细胞的分泌，增强小片与组织、珠核的亲和力，防止感染，促进伤口愈合，降低手术贝死亡等目的进行。相关的研究包括对处理液药物种类筛选、配方比较、小片处理方法及程序等方面［32］。从实验的结果看，各个实验小组的成活率和留核率均高于对照组的，说明处理液起到了增强组织亲和力、提高留核率和抗感染降低病死率的预期作用；各处理组的平均成活率为67.1%、64.9%和66.7%，均高于对照组的57.4%；平均留核率为76.2%、76.4%和73.9%，均高于对照组的68.3%。这与李咏梅等［3 3］用不同处理液在海南陵水进行育珠的效果实验的数字所反映的两大处理组的平均吐核率（12.70%、14.65%）和平均病死率（7.90%、8.60%）均远低于对照组20.80%的吐核率和13.80%的病死率有近似的结果。在育珠贝的成珠率、优良珠率方面，各实验组与对照组之间相比，分别存在差异不具有统计学意义（P＞0.05）和差异具有统计学意义（P＜0.05），从育珠效果综合评价的育珠绩效值看，各实验组之间差异不具有统计学意义（P＞0.05），而各实验组与对照组相比具有统计学意义（P＜0.05）。可见通过细胞小片的保养处理，对提高小片细胞的活力，促进细胞的分泌，加速珍珠层的形成具有显著的效果。

3.3育珠模式对马氏珠母贝育珠绩效的影响

优化休养与育珠模式是提高马氏珠母贝育珠绩效的一个关键技术环节，通过实验得知，休养与育珠模式对育珠贝成活率存在显著性影响（P＜0.05）。根据实验统计，休养期池塘休养成活率95.5%高于海区休养成活率的88.2%，但育珠期海区育珠成活率71.9%又高于池塘育珠成活率的62.6%，最终育珠贝成活率是海区休养与育珠组（C1）为63.41%略高于池塘休养与育珠组（C2）的59.8%，两组组合为池塘休养与海区育珠组（C3）的育珠贝成活率为68.7%，这一组合模式大大提高了育珠贝的成活率。休养与育珠模式的育珠绩效值存在统计学意义差异（P＜0.05），其中池塘休养与海区育珠绩效值0.196显著高于海区休养与育珠的0.164及池塘休养与育珠的0.121。其原因在于：休养期自然海区的相关理化因子和生态环境不稳定，容易造成手术贝的感染、死亡和吐核；而生态系育珠池塘的生态环境相对稳定，有利于手术贝的渐进式恢复和生长，故可使手术贝获得较高的成活率和留核率。在育珠期间，由于池塘休养与海区育珠组在植核手术后，先在生态系育珠池塘中进行休养获得较高的成活率和留核率的前提下，再移往养殖海区进行育珠管理，这样既可避免海区休养期的高病死率、高吐核率，又可避免育珠期在生态系育珠池塘中受夏季高温威胁和饵料生物不足的不利影响，整个休养育珠过程，既保证了前期的环境稳定，有利于育珠贝的成活与留核，又保证了后期的营养供应，有利于珍珠质的快速分泌，从而取得较高的成活率、留核率和成珠率。因此池塘休养与海区育珠组（C3）可比海区休养与育珠组（C1）和池塘休养与育珠组（C2）获得更高的育珠绩效值。这一结果与符韶等［4］与贾友宏等［19］实验结果相符。

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资助项目：广东省海洋渔业科技推广专项项目（Z2014008；Z2015005）

中图分类号：S968.35

文献标志码：A

文章编号：1004-2091（2016）07-0045-06

doi：10.3969/j.issn.1004-2091.2016.07.009

收稿日期：（2015-12-22）

作者简介：符韶（1955-），男，教授级高工，研究方向为珍珠及名贵海产贝类养殖.E-mail：fushao2188@163.com

Studies on the techniques to affect pearl production performances in pearl oyster Pinctada martensii

Fu Shao，Liang Feilong，Deng Yuewen
（Pearl Institute，Guangdong Ocean University，Zhanjiang 524025，China）

Abstract:Three experiments（Exp I，Exp II and Exp III）were conducted to investigate the effects of condition before nucleus-inserting operation，mantle tissue piece solution and culture method on pearl production performance in pearl oyster Pinctada martensii.In Exp I，four groups（A1，A2，A3and AD）were set.The A1，A2and A3were conditioned by inhibiting gonad development，gamete release by water temperature change and gamete release by water salinity change，respectively.The AD group was not conditioned.In Exp II，four groups（B1，B2，B3and BD）were set.The mantle tissue piece in the B1，B2and B3groups were treated by Solution 1，2 and 3，which contained chemical compositions.The mantle tissue pieces in the BD group was not treated.In Exp III，three groups（C1，C2and C3）were set.The oysters in C1，C2and C3groups were farmed by the protocols of recuperation and culture in the sea，recuperation in the ponds and culture in the sea，and recuperation and culture in the ponds.Pearl production performance was evaluated among the groups in Exp I，Exp II and Exp III.The results showed that there were significant differences in pearl performance values among the four groups in Exp I. Survival rates，retention rates，commercial rates，perfect pearl rates and pearl performance values of the A1，A2and A3groups were significantly larger than those in the AD group（P＜0.05）.The A2group had the largest pearl performance values in Exp I.The pearl performance values of B1，B2and B3were significantly larger than that of the BD group（P＜0.05）.The B1group had the largest pearl performance value in Exp II.The survival rates and retention rates of the C1and C2were significantly larger than those of the C3group in Exp III（P＜0.05）.The commercial pearl rates，perfect rates and pearl performance values of the C1and C3groups significantly larger than those of the C2group.The C3group had the largest pearl performance value in the Exp III.

Keywords:Pinctada martensii；mantle tissue piece；condition；culture method；pearl performance value