瓜蒌对心梗后心衰大鼠心功能及心肌细胞凋亡的影响

张　腾，张艳军，庄朋伟，张密霞，王子璇，秦袖平

(天津中医药大学，天津市中药药理重点实验室，天津　300193)



瓜蒌对心梗后心衰大鼠心功能及心肌细胞凋亡的影响

张腾，张艳军，庄朋伟，张密霞，王子璇，秦袖平

(天津中医药大学，天津市中药药理重点实验室，天津300193)

Effects of Gualou on cardiac function and cardiomyocyte apoptosis in heart failure following myocardial infarction in rats

ZHANG Teng,ZHANG Yan-jun, ZHUANG Peng-wei,ZHANG Mi-xia,WANG Zi-xuan,QIN Xiu-ping

(TianjinUniversityofTraditionalChineseMedicine，TianjinKeyLabforPharmacologyofTraditionalChineseMedicine，Tianjin300193，China)

doi:10.3969/j.issn.1001-1978.2016.08.031

瓜蒌；心梗后心衰；心功能；心肌细胞凋亡；Bcl-2；Bax

瓜蒌是一味止咳化痰平喘中药，目前对其研究主要集中于瓜蒌皮药理作用的研究[1-3]，因此,本文采用全瓜蒌考察其对心梗后心衰大鼠心功能及心肌细胞凋亡的影响，以期为全瓜蒌的深入研究与临床应用提供借鉴。

1　材料与方法

1.1材料

1.1.1实验动物100只♂ SD大鼠，体质量(230±20) g，购于北京华阜康生物科技有限公司，许可证号：SCXK(京)2014-0004。饲养于中国科学院生物医学工程研究所实验动物中心。

1.1.2药物与仪器全瓜蒌(产地：江苏，批号：110201，北京华邈中药工程科技开发中心)。超高分辨率小动物超声实时影像系统(加拿大VEVO2100)，PCR仪：伯乐。

1.2方法全瓜蒌用水煎煮后，旋成浸膏。模型复制方法参照以往报道[1]，手术1周后，进行超声心动图检查，选用LVEF≤45%[4]的模型大鼠进行后续实验。分成模型组(Model组)、瓜蒌组(GL组)、假手术组(Sham)，每组15只大鼠。假手术组和模型组给予蒸馏水，瓜蒌组按5.4 g·kg-1·d-1(相当于临床等效剂量的4倍)给药，各组给药量均按10 mL·kg-1灌胃给药，每天1次，连续给药3周。

1.2.1检测指标给药3周后，对大鼠进行心功能检查，每组分别取5只大鼠心脏，制作病理切片，按TUNEL试剂盒步骤进行染色，并计算凋亡指数(AI)/%=凋亡心肌细胞数/心肌细胞总数×100%。每组分别取3只大鼠心脏，称取100 mg缺血边缘区心脏组织，提取总RNA，RT-PCR法检测缺血边缘区凋亡相关基因Bcl-2、Bax mRNA的表达。

2　结果

模型组大鼠心室扩张，心功能下降，促进心肌细胞凋亡，抗凋亡基因表达下降，凋亡基因表达升高，其比值下降。给药3周后，瓜蒌治疗后可以抑制心梗后心衰大鼠心室扩张，改善心功能，抑制心肌细胞凋亡，促进抗凋亡基因表达，抑制凋亡基因表达，提高两者的比值。见Tab 1～3。

Tab 1　Comparison of cardiac function in each group of rats

**P<0.01vssham;#P<0.05vsmodel

Tab 2　Influence of Gualou on myocardial cell apoptosis rate

**P<0.01vssham;##P<0.01vsmodel

Tab 3　Bcl-2,Bax mRNA expression levels of rat myocardial cells

**P<0.01vssham;##P<0.01vsmodel

3　讨论

心肌梗死后,心脏遭受重构的过程,包括左心室扩张和收缩功能障碍,这些常常导致心脏衰竭。急性心肌梗死后的缺血性损伤诱发细胞凋亡，而心衰时的细胞凋亡又能引起心肌细胞死亡。心肌细胞的缺失(死亡和凋亡)和心室重构是心功能下降的最主要的原因。Bcl-2和Bax基因是Bcl-2家族成员，调节细胞凋亡的内在途径，它们决定了凋亡刺激后细胞的生存或死亡[4-5]。有报道表明，改变Bcl-2家族中促凋亡和抗凋亡成员的比值能够确定凋亡的程度，而不是任何单一的Bcl-2成员基因的绝对表达水平[6]。

本实验复制了大鼠心梗后心衰模型，治疗前通过超声心动图检查筛选出LVEF≤45%心衰成模大鼠进行后续实验，以便更加准确地考察药物的疗效；治疗后再次进行超声心动图检查评价大鼠心功能的变化，明确了瓜蒌对心梗后心衰大鼠心功能的影响，并从心肌凋亡角度对其作用机制进行了探讨。结果表明，瓜蒌能抑制心梗后心衰大鼠心室扩张，改善心功能，抑制心肌细胞凋亡，促进心肌抗凋亡基因的表达、抑制凋亡基因的表达，提高两者的比值，即瓜蒌改善心梗后心衰大鼠心功能，其机制可能是抑制心肌细胞凋亡。

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[1]Sun J, Zhao Q T, Huang Z H, et al.Protection and anti-peroxidation of Trichosanthes pericarpium extract on rats acute myocardial infarction[J].PharmacolClinChinMed,2013,29(3):114-6.

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[3]Liu S Y，Gu B，Lu X H，et al.Effects of extractive pericarpium trichosanthes on apoptosis of HUVECs induced by high glucose[J].ChinPharmacolBull，2015,31(7):988-93.

[4]Zhao X, Geltinger C, Kishikawa S, et al. Treatment of mouse melanoma cells with phorbol 12-myristate 13-acetate counteracts mannosylerythritol lipid-induced growth arrest and apoptosis[J].Cytotechnology, 2000, 33(1-3): 123-30.

[5]Lee Y S, Kang Y J, Kim H J, et al. Higenamine reduces apoptotic cell death by induction of heme oxygenase-1 in rat myocardial ischemia-reperfusion injury[J].Apoptosis, 2006, 11(7): 1091-100.

[6]Harris M H, Thompson C B. The role of the Bcl-2 family in the regulation of outer mitochondrial membrane permeability[J].CellDeathDiffer, 2000, 7(12):1182-91.

Gualou; heart failure after myocardial infarction;cardiac function; cardiac myocyte apoptosis;Bcl-2;Bax

2016-03-11,

2016-04-18

国家重点基础研究发展计划(973计划)资助项目(No2011CB505300,2011CB505302)

张腾(1986-)，女，博士，研究方向：中药药理学，E-mail：zhangtengfeier@163.com;

张艳军(1967-)，男，博士，教授，博士生导师，研究方向：中药药理学，通讯作者，E-mail：zyjsunye@163.com

A

1001-1978(2016)08-1183-02

R-332；R282.71；R322.11；R329.25；R331.31；R541.61；R542.22

网络出版时间：2016-7-19 10:43网络出版地址：http://www.cnki.net/kcms/detail/34.1086.R.20160719.1043.062.html