2013—2015年贵州省市、县两级兽医实验室检测能力比对考核结果分析

景小金，田海蓉，曾秀玲，李涛，刘霞，张霞，王慧，李照伟，熊力

(贵州省动物疫病预防控制中心，贵州 贵阳 550008)

2013—2015年贵州省市、县两级兽医实验室检测能力比对考核结果分析

景小金，田海蓉*，曾秀玲，李涛，刘霞，张霞，王慧，李照伟，熊力

(贵州省动物疫病预防控制中心，贵州 贵阳 550008)

对2013—2015年由贵州省动物疫病预防控制中心组织实施市、县两级兽医实验室检测能力比对考核工作结果进行分析，参加比对考核的市级兽医实验室9个，占全省市级实验室的100%(9/9)，参加比对考核的县级兽医实验室60个，占全省县级兽医实验室的68.2%(60/88)，全省比对考核的实验室占市县实验室总数的71.1%(69/97)。比对考核实验涉及ELISA、布病虎红平板凝集试验、RT－PCR和H5亚型－HI 4个检测项目，均是当前动物疫病诊断与监测的重要检测方法，3年中ELISA、布病虎红平板凝集试验、RT－PCR、H5亚型－HI的正确率分别是92.8%、86.7%、84%、80.5%。表明本省市级实验室基本掌握了血清学和病原学检测，县级实验室也基本掌握了血清学检测，但与全国省级实验室检测平均水平比较还有一定差距，需加强专项技能培训与学习。

贵州省;市、县兽医实验室;检测能力;比对考核

兽医系统实验室是指隶属于各级兽医主管部门，并承担动物疫病诊断、监测和检测等任务的国家级区域兽医实验室、省级兽医实验室、地(市)级兽医实验室和县(市)级兽医实验室。贵州省兽医系统实验室主要是指省、市、县三级动物疫病预防控制中心兽医实验室。为了评估和提高各实验室管理水平和检测能力，2010年起至今，农业部组织开展全国兽医系统实验室检测能力比对考核工作，我省以实验室检测能力比对考核为契机，连年组织开展了市、县级兽医实验室检测能力比对考核，了解和掌握全省市、县两级兽医实验室检测能力和水平，深入分析查找不足，进一步完善实验室质量管理体系，完善实验室能力建设长效机制，对于提高兽医实验室管理水平和检测能力起到积极的推动作用，达到了预期效果。2013—2015年，全省组织开展兽医系统实验室检测能力比对考核市级实验室9个、县级实验室60个。检测比对实验主要是根据监测任务需要的检测方法为主，主要有CSF－ELISA、H5亚型－HI、PRV－gE－ELISA、FMDV－3ABC－ELISA、布病虎红平板凝集试验、HP－RRSV RT－PCR、H5－AIV荧光RT－PCR 7项实验。

1 材料与方法

1.1 比对试验名称、所用试剂厂家、检测依据为了避免试剂盒的差异，制备盲样所用试剂盒和考核下发的试剂盒的厂家、型号、批号均相同。见表1。

1.2 比对样品制备每年检测4个项目，市、县级兽医实验室各完成3个项目。每个比对项目设置5个检测盲样，其中3个阳性，2个阴性，每管的分装量是单次试验的4倍量。定性试验处理到3个阳性状态:强阳、中阳、弱阳。盲样均从试剂厂家直接购买标准阴性和阳性样品，阳性样品做适量梯度稀释后分装，阴性样品直接分装。各盲样间数量与颜色眼观无差异，统一编号，分包，制样完毕。盲样密闭低温保存，及时分发到各靶实验室。

2 结果

2.1 参加比对实验室情况

2.1.1 市级实验室:3年中参加比对考核市级实验室9个，实现全省市级实验室全覆盖。

2.1.2 县级实验室:3年中参加比对考核县级实验室共有60个，占全省县级实验室的68%(60/88)。

2.2 2013—2015年参加比对的市、县实验室正确率比较2013—2015年，参加比对的县级实验室正确率分别是76.2%、61.5%、75.6%;参加比对的市级实验室正确率分别是67%、78%、78%，市级实验室的正确率略高于县级实验室。见表2。

表2 2013—2015年参加比对的市、县实验室正确率比较

2.3 不 同类型实验结果比较ELISA是目前血清学试验最常用的检测方法，也是市、县两级兽医实验室做得最多的实验，故正确率最高，为92.80%;RTPCR、布病虎红平板凝集试验正确率均小于90%，有待提高检测能力与水平;H5亚型－HI是定量试验，影响结果因素较多，结果判定主观性较强，实验员较难掌握，正确率最小，仅为80.5%。见图1。

图1 2013—2015年比对考核4种检测项目正确率比较

2.4 全省9个地区比对考核实验室在ELISA、H5亚型－HI和RT－PCR 3个检测项目上比较从ELISA来比较，黔南州、安顺和铜仁的正确率为100%，正确率最低的是毕节，仅有81%，其次是黔东南，正确率是89.3%。从H5亚型－HI比较，铜仁的正确率为100%，黔南州和安顺正确率大于90%，毕节的正确率在83.3%，其它5个地区的正确率均低于80%。从RT－PCR比较，黔南、安顺、毕节、贵阳、黔西南和六盘水的正确率均为100%，6个地级实验室具备了RTPCR的检测水平，完全有能力开展相关核酸检测工作;黔东南的正确率为67%，铜仁的正确率为33%，3个比对考核失误了2次;遵义3年比对考核，因仪器原因，只有2015年参加了RT－PCR，结果错误，因此正确率为0。从布病虎红平板检测比较，黔南、安顺、贵阳、黔西南、六盘水和遵义地区的正确率均为100%，毕节和铜仁的正确率为66.7%，黔东南的正确率最低，只有50%。从4个检测项目综合成绩来看，黔南和安顺整体检测水平较高。见表3。

表3 2013—2015年贵州省9个地区实验室4个检测项目正确率比较%

表12013 —2015年检测项目、试剂生产厂家、检测依据

3 讨论

3.1 高致病性禽流感、口蹄疫、猪瘟、高致病性猪蓝耳病均是国家重大动物疫病，也是国家实行强制动物免疫的病种。血清学检验是检测动物免疫抗体水平、检验免疫效果和评价疫苗的有效方法，当前最常用的是ELISA、HI和平板凝集试验。病原学检测是诊断动物疫病，找出病原的重要手段，RT－PCR是国标规定的诊断方法，其敏感性和特异性高，用时少，是病原学检测的首选。

3.2 2013—2015年3年中共涉及ELISA、H5亚型－HI、RT－PCR、平板凝集4类实验方法，与2013—2014年农业部组织的全国省级兽医系统实验室检测能力比对结果比较:本省地、县实验室ELISA、H5亚型－HI、RT－PCR实验室正确率分别为92.8%、80.5%和84%，全国省级兽医系统实验室检测能力比对结果中ELISA、H5亚型－HI、RT－PCR实验室正确率分别为100%(32/32)、94%(30/32)和98%(123/126)［1，2］，3项结果明显高于贵州省级兽医系统实验室正确率，说明贵州省市、县实验室的检测水平还有待提高。

3.3 2013—2015年3年中县级实验室比对结果比较:3个项目比对全部正确的市级实验室百分率分别为67%、78%、78%，总体正确率略高于县级实验室，县级实验室正确率分别为76.2%、61.5%、75.6%。

3.4 ELISA和H5亚型－HI是3年均考核的项目，ELISA检测项目的正确率是92.8%，是检测项目中正确率最高的;其次是布病虎红平板凝集试验正确率86.7%，RT－PCR正确率84%，H5亚型－HI正确率80.5%。从本组数据来看，市级实验室的RT－PCR的检测综合水平不是很理想，需加强核酸检测技术的培训。H5亚型－HI是一个定量的试验，主观与客观影响结果因素多，在全省范围内尽量统一实验操作用品与实验条件，有助于提高结果统一性。布病虎红平板凝集试验是2014年本省首次考核项目，正确率为86.7%，略低于2013年全国省级兽医系统实验室检测能力比对中省级实验室正确率87%［1］。随着近年来布病疫情呈现上升趋势，布病虎红平板凝集试验是目前检测布病快速有效的方法，对于基层实验室很适用，建议进一步加强推广使用。

3.5 从2013—2015年贵州省9个地区实验室4个检测项目正确率比较结果来看，毕节和黔东南地区实验室要加强ELISA的检测能力;贵阳、黔西南、六盘水、毕节、黔东南和遵义6个地区实验室要加强H5亚型－HI的检测能力;铜仁、黔东面和遵义地区实验室要加强RT－PCR的检测能力;毕节、铜仁和黔东南地区实验室要加强布病虎红平板试验的检测能力。

3.6 通过以上对贵州省3年来兽医实验室检测能力比对考核工作的综合分析，兽医实验室检测能力比对考核工作很有必要性，达到了预期目标，整体推动了全省兽医实验室检测工作的开展和能力提高。各实验室发现问题及时处理，有的放矢地完善实验室管理，取长补短，不断进步。特别是某些经济较落后、地理位置较偏远的少部分县级实验室，从考核前不重视实验室建设，没有固定实验人员状况，通过考核，加强了兽医实验室的建设，并配备实验室专业人员。同时，开展兽医实验室检测能力比对，是评价兽医实验室检测技术水平的重要手段，也是加强兽医实验室质量控制的有效方法［3］。尽管当前贵州省市、县两级兽医实验室检测能力与省级兽医实验室检测水平还有一定差距，省动物疫病预防控制中心要多开展实验室检测专项技能培训，继续开展全省各级兽医实验室检测能力比对考核工作，使全省兽医系统实验室成为动物疫病预防控制工作战线上过硬的检测队伍。

［1］刘伟，张劭俣，董昕欣，等.2013年全国省级医系统实验室检测能力比对结果分析［J］.中国畜牧兽医，2013，49(10):91－94.

［2］董昕欣，刘伟，邴国霞，等.2014年全国省级医系统实验室检测能力比对结果分析［J］.中国畜牧兽医，2014，50(10):101－103.

［3］王文，张继红，兰玲，等.2010年新疆兽医系统实验室检测能力比对试验的探讨与建议［J］.中国动物检疫，2011，28(9):19－21.

S851.34

B

1007－1474(2016)05－0030－03

2016－07－12

景小金(1981—)，男，兽医师，主要从事动物疫病防控工作。

*通讯作者