鬼箭羽与其伪品大果榆的薄层色谱鉴别研究*

王　相　郭丁丁　陈静静　李先荣



鬼箭羽与其伪品大果榆的薄层色谱鉴别研究*

王相郭丁丁△陈静静李先荣

山西省中医药研究院(太原 030012)

摘要：目的建立区分鬼箭羽与其伪品大果榆的薄层色谱鉴别方法，为鬼箭羽药材的鉴别提供更加方便、快捷的依据。 方法通过系统的对比研究，采用薄层色谱法对鬼箭羽及大果榆进行定性鉴别。 结果在鬼箭羽与大果榆的薄层色谱鉴别结果中存在一特殊斑点，利用该斑点可以区分两者。 结论研究所建立的薄层色谱方法操作简单、可行性高，可以作为鬼箭羽与大果榆的鉴别依据。

关键词：鬼箭羽；大果榆；薄层鉴别

鬼箭羽，又名卫矛、鬼箭、六月凌等，为卫矛科植物卫矛Euonymusalatus(Thunb.)Sieb.的具翅状物的嫩枝或翅状附属物。具有破血通经、解毒消肿、杀虫之功效。近代研究表明，其化学成分主要为黄酮类[1]、甾体类、萜类及多糖类[2]等，且其药理活性研究主要集中在黄酮类成分[3]的活性研究。大果榆，为榆科植物大果榆UlmusmacrocarpaHance.的干燥茎，具有祛痰、利尿、杀虫之功效。二者来源不同，但因其茎亦为圆柱状，具不规则木栓翅，枝坚硬而韧，故目前药材商品流通中常常可见以大果榆冒充鬼箭羽药材。为了保证药材质量及临床用药安全，本文系统的研究了鬼箭羽与大果榆在薄层色谱的主要差别，已达到有效鉴别真伪的目的，保证药材质量及临床用药安全。

1　仪器与试药

KQ-3200DB型数控超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司)；BP-211D型电子天平(德国赛多利斯)；DZKW-4型电子恒温水浴锅(北京中兴伟业仪器有限公司)；DFT-200C型粉碎机(上海比朗仪器有限公司)；薄层层析硅胶G(化学纯 青岛海洋化工有限公司)；薄层层析硅胶GF254(化学纯 青岛海洋化工有限公司)；β-谷甾醇对照品(中国药品生物制品检定所，批号：110851-201206)；蒸馏水；其他试剂均为分析纯。

鬼箭羽药材分别购自成都、河北、山西等地，另有自采自山西沁水县鬼箭羽药材，共13批，经山西省食品药品检验所王春芳教授鉴定1，2，7号样品为榆科植物大果榆UlmusmacrocarpaHance.，其余样品为卫矛Euonymusalatus(Thunb.)Sieb.具体信息见表1。

表1　鬼箭羽药材收集情况

2　试验方法与结果

曾参照不同文献中记载鬼箭羽药材的薄层色谱鉴别方法对10份鬼箭羽药材及3份大果榆药材进行鉴别。结果如下。

2.1方法一[4]取样品粉末2 g，加甲醇30ml，超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。以β-谷甾醇为对照，照薄层色谱法(《中国药典》2010年版一部附录VI B)试验，吸取上述四种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-乙醚(3∶2)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，置日光下检视。其结果见图1。

图1　薄层色谱鉴别1-13：供试品　B：β-谷甾醇对照品

实验结果显示，利用该方法进行薄层鉴别，以β-谷甾醇为对照，鬼箭羽与大果榆均在相同位置显示相同颜色斑点，该成分在两种药材中均含有，选用该方法未能区分两者，无鉴别意义。

2.2方法二[5]取样品粉末5 g，加乙酸乙酯50ml，超声2小时，提取液回收乙酸乙酯至近干，残渣加乙酸乙酯2ml使溶解，作为供试品溶液，另取齐墩果酸对照品，加乙酸乙酯制成每1ml含2mg的对照品溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2010年版一部附录VI B)试验，分别吸取上述溶液各5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以氯仿-甲醇(10∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%硫酸乙醇液，在105℃加热至斑点显色清晰。结果见图2。

图2　薄层色谱鉴别1-13：供试品　B：齐墩果酸对照品

实验结果显示，利用该方法进行薄层鉴别，以齐墩果酸为对照，3份大果榆样品中均未显示对应斑点，而10份鬼箭羽药材中却在某些批次中显示该斑点，有些批次中并未显示该斑点，利用齐墩果酸为对照，未能达到区分所有鬼箭羽与大果榆的目的。

2.3方法三基于以上实验结果，并结合相关文献资料，对鬼箭羽样品进行了系统的薄层色谱条件研究。

2.3.1供试品溶液的制备取本品粉末2 g，加甲醇30ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取鬼箭羽对照药材，同法制成对照药材溶液。

2.3.2不同展开条件下薄层鉴别

2.3.2.1不同展开体系下对鬼箭羽与大果榆的薄层鉴别照薄层色谱法(《中国药典》2010版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，分别以正丁醇-醋酸-水(12∶5∶4)、甲苯-乙酸乙酯-甲酸(9∶4∶1)[6]，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。结果见图3、4。

图3　硅胶G板 365nm检视正丁醇-醋酸-水(12∶5∶4)1，3：样2(大果榆) 2，4：样10(鬼箭羽)5：样9(鬼箭羽)

实验结果显示，利用该两种方法进行薄层鉴别，图3薄层结果中大果榆与鬼箭羽存在差异，但鬼箭羽主斑点Rf值太大，未能显示更多信息，图4薄层结果中二者均有相同主斑点，但大果榆结果在Rf值约0.4左右有一斑点，鬼箭羽未显示相同斑点，但当所有批次药材均在该薄层条件下展开时，并未出现相同薄层行为，某些批次鬼箭羽样品中也显示相同斑点，因此对该方法进行进一步优化研究，以期达到区分所有批次鬼箭羽与伪品大果榆的目的。

2.3.2.1同一展开体系下不同薄层板对鬼箭羽与大果榆的薄层鉴别照薄层色谱法(《中国药典》2010版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G、GF254薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(9∶4∶1)，展开，取出，晾干，置紫外光灯(254nm)下检视。结果见图4、5。

图4　硅胶G板 365nm检视甲苯-乙酸乙酯-甲酸(9∶4∶1)1，3：样2(大果榆) 2，4：样10(鬼箭羽) 5：样9(鬼箭羽)

图5　硅胶GF254板 254nm检视1：样品2(大果榆)2：样品10(鬼箭羽)3-4：样品9(鬼箭羽)

实验结果显示，利用该种方法进行薄层鉴别，大果榆与鬼箭羽在Rf值约0.95附近有一斑点存在差异，但该主斑点Rf值偏大，故调整该薄层展开剂体系，以寻求更好的薄层鉴别方法。

2.3.2.1同一展开体系下不同极性展开剂对鬼箭羽与大果榆的薄层鉴别照薄层色谱法(《中国药典》2010版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(9∶4∶1)、甲苯-乙酸乙酯-甲酸(9∶9∶1)、甲苯-乙酸乙酯-甲酸(20∶1∶0.5)，展开，取出，晾干，置紫外光灯(254nm)下检视。结果见图6、7、8。

图6　硅胶GF254板 254nm检视1-13：样1-13甲苯-乙酸乙酯-甲酸(9∶4∶1)

图7　硅胶GF254板 254nm检视1-13：样1-13甲苯-乙酸乙酯-甲酸(9∶9∶1)

图8　硅胶GF254板 254nm检视1-13：样1-13甲苯-乙酸乙酯-甲酸(20∶1∶0.5)

由以上试验结果可知，在硅胶G254薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(20∶1∶0.5)为展开剂进行展开，得到的结果能较好的区别鬼箭羽药材与大果榆药材。故将其薄层鉴别方法定为：取本品粉末2 g，加甲醇30ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取鬼箭羽对照药材，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2010版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(20∶1∶0.5)，展开，取出，晾干，置紫外光灯(254nm)下检视。

2.3.3薄层板耐用性考察观察在不同厂家生产的薄层板上的层析效果。将相同的供试品溶液分别点样于自制硅胶GF254板和青岛海洋化工厂分厂购买的硅胶GF254板上，用相同的展开系统展开，结果显示两个薄层板上的展开效果均较理想，所得斑点清晰，且分离效果好。结果见图8、9。

图8　硅胶GF254板 254nm检视(自制)1-13：样1-13

图9　硅胶GF254板 254nm检视(青岛海洋化工厂)1-13：样1-13

3　讨论

鬼箭羽在临床中的应用越来越广泛，市场中常有其伪品出现，鬼箭羽与伪品大果榆的鉴别已有相关报道[7]，但通过实验验证，发现其重复性较差，往往得不到预期的结果。目前，湖南、湖北、甘肃等地的药材地方标准中收载有鬼箭羽药材的薄层色谱鉴别方法，但所建立的方法标准[1，8～9]中所收载的定性鉴别方法分别以β-谷甾醇、异鼠李素等对照品来鉴别鬼箭羽，均未能用于区分其与大果榆。另外，文献报道中作为对照使用的香橙素、柚皮素、山奈酚等多为实验室自制，不易购得。本文通过系统的研究，以鬼箭羽药材为对照来区分鬼箭羽及其伪品大果榆，并找出定性区别鬼箭羽与大果榆的方法，经过考察，该方法可行性高、直观、方便，为区别鬼箭羽与大果榆提供了有利的依据。区别鬼箭羽与其伪品大果榆的斑点成分结构鉴定将另文报道。

参考文献

[1]巴寅颖，石任兵，刘倩颖,等.鬼箭羽中黄酮类化学成分研究[J].中草药，2012，2(43):242-246.

[2]巴寅颖，张兰珍，石任兵.HPLC法同时测定鬼箭羽药材中4种有效成分含量[J].药物分析杂志，2010,30(6):991-994.

[3]李玉杰，龚慕辛，来媛媛,等.鬼箭羽不同提取部位对糖尿病大鼠药理作用的研究[J].北京中医药大学学报，2010,33(3):179-182.

[4]辽宁省食品药品监督管理局.辽宁省中药材标准[S].沈阳：沈阳科学技术出版社，2009:130.

[5]刘赘,周欣，龚小见,等.鬼箭羽药材的薄层色谱鉴别[J].贵州师范大学学报(自然科学版),2009, 27(3):113-115.

[6]徐小琼,王西芳,张伟,等.金柴胡总黄酮的含量测定及薄层鉴别[J].现代中医药，2012，32(6)：61-63.

[7]张超,龚慕辛,罗云,等.鬼箭羽正品饮片与伪品大果榆饮片的区别研究[J].北京中医药，2011，30(2):136-139.

[8]湖南省食品药品监督管理局编.湖南省中药材标准[S].长沙：湖南科学技术出版社,2009:99.

[9]甘肃省食品药品监督管理局编.甘肃省中药材标准[S].兰州：甘肃文化出版社,2009:295.

*基金项目：山西省中药材、中药饮片地方药材标准研究(No.2012016A)

通讯作者△

doi:10.3969/j.issn.1003-8914.2016.01.024

文章编号：1003-8914(2016)-01-0050-04

收稿日期：(本文校对：刘言言2015-01-17)

The TLC Study of Euonymus Alatus and Its Adulterants Ulmus Macrocarpa

WANG XiangGUO Dingding△LI Xianrong

(Shanxi Institute of Prescription of TCM, Shanxi, Taiyuan 030012, China)

Abstract：ObjectiveTo establish the TLC methods of the Euonymus alatus and Ulmus macrocarpa in order to make its identification easier and convenient. MethodsAccording to its systems research, using TLC methods can identify the Euonymus alatus and Ulmus macrocarpa. ResultsThere is a special spot in TLC results which can distinguish the two herbs between the Euonymus alatus and Ulmus macrocarpa. ConclusionThe method is easy and reliable with good reproducibility, and can be used as quality control standard of Euonymus alatus and its adulterants Ulmus macrocarpa.

Key words：Euonymus alatus; Ulmus macrocarpa; TLC