加工工艺对酶活作用的影响研究

张开松

（河南省水产科学研究院，郑州450044）

加工工艺对酶活作用的影响研究

张开松

（河南省水产科学研究院，郑州450044）

酶制剂因在制粒环节失活而影响其作用的发挥，因此本试验从酶制剂的添加工艺入手，避免酶活的损失，并验证其养殖效果。试验采用2种添加工艺，分别是用酶制剂预处理原料后制粒，以及制粒后采用液体酶制剂喷涂。经过为期两个月的养殖试验，后喷涂酶制剂组明显促进鲤鱼生长，而两种工艺均能提高鲤鱼免疫力。

鲤鱼；酶制剂；预处理；后喷涂；养殖效果

酶制剂作为“绿色”添加剂能够提高饲料的转化率，促进动物的生长，降低环境污染，综合提高动物的生产性能，具有广阔的应用前景，被认为是一种无残留、无污染、无公害的环保型添加剂。但因其热敏性问题严重制约了酶制剂在饲料工业中的应用，如何在加工工艺上最大限度减少酶制剂的损失是当今研究的热点。本研究主要解决的问题就是酶制剂添加工艺的改进，这对降低饲料成本，提高饲料综合利用率具有积极作用，并使大规模生产“绿色”饲料成为可能。

1 材料与方法

1.1 材料

试验用鱼为鲤鱼，共1800条。试验共分5个处理（对照组、木聚糖酶组、纤维素酶组、β-葡聚糖酶组和后喷涂木聚糖酶组），每个处理4个重复。共20个缸，每缸放养 90条，鲤鱼的平均体重为 34.25± 3.12 g。

1.2 试验饲料

试验所用饲料以鱼粉、豆粕、膨化大豆、玉米蛋白等原料为主要蛋白原（表1）。原料经粉碎后通蒸汽熟化，熟化后成粉状料平均分成5份，其中3份粉状料中分别添加0.8%的木聚糖酶、纤维素酶和β-葡聚糖酶，在含水量为12%、温度为40℃的条件下反应8 min，经灭活后由无锡华明HKJ-218配合颗粒饲料机制成粒径为1.5 mm的硬颗粒饲料。

另外2份经熟化的粉状料，由无锡华明HKJ-218配合颗粒饲料机制粒，其中一份作为对照组饲料为基础饲料，另外一份颗粒饲料用后喷涂的方法添加0.8%的液体木聚糖酶，所有饲料经自然风干后备用。

表1 基础饲料主要成分含量

1.3 饲养管理

试验鱼养殖于室内循环水系统中。用基础饲料投饲驯化到鱼主动来抢食为止，驯化时间15天，正式饲喂60天。每天投喂3次，时间分别为7:30、11: 30、16:30。投饲率为鱼体重的2-3%，每周调整一次投饲率。试验期间水温为23±2℃，池水pH为7.3-8.0，溶氧>5 mg/L。

1.4 测定

1.4.1 生长性能

试验开始及结束时分别对各水族缸的鱼进行称重并记录其初重（g）和末重（g），计算其增重率及饵料系数。

增重率=（末重－初重）（g）/初重（g）×100%

饵料系数=总投饲量（g）/（末重－初重）（g）

1.4.2 生化指标

从每个水族缸随机抽取6尾鱼，于尾动脉取血。首先每条鱼抽取1mL血液并用柠檬酸钠溶液抗凝，之后马上用于血红蛋白的测定。接下来每条鱼抽取全血，无须抗凝，4℃放置 2 h后，于离心机中3500 r/min、4℃离心30 min，取上清为血清，所取血清-20℃保存用于超氧化物歧化酶（SOD）及溶菌酶（LSZ）的测定。以上指标的测定均采用南京建成生物技术研究所生产的测试盒进行测试。

SOD计算公式如下：

式中各符号意义如下：A-对照管吸光度；Aw-测定管吸光度；V-反应液总体积 (mL)；V0-取样体积(mL)。

LSZ计算公式如下：

式中符号表示如下：A-测定管透光度；A0-空白管透光度；Aw-标准管透光度；T-标准管浓度；N-样本稀释倍数。

1.5 数据分析

应用SPSS11.0进行One-Way ANOVA分析，Duncan多重比较，数据为平均值±标准差表示。

2 试验结果

2.1 养殖效果试验

养殖试验中0组为对照组，饲喂基础饲料。试验1、2、3组是酶预处理饲料，就是在基础饲料中分别添加0.8%的木聚糖酶、β-葡聚糖酶和纤维素酶，在含水量为12%、温度为40℃的条件下反应8 min后制成颗粒饲料。试验4组是在基础饲料表面后喷涂液体木聚糖酶，添加比例为0.8%。

表2 酶制剂的添加对鲤鱼生长指标的影响

从表2可以看出，经过60天的饲喂，第4组鲤鱼的增重率与对照组相比有显著性差异 （p＜0.05），较对照组提高了10.29%，第1、2、3组鲤鱼的增重率与对照组相比差异不显著（p＞0.05）。第3和第4组的饲料系数与对照组相比有显著性差异 （p＜0.05），分别较对照组降低了9.01%和11.23%。

2.2 免疫指标

从表3中各组的血红蛋白含量可以看出，第4组也就是后喷涂木聚糖酶组鲤鱼血液中的血红蛋白含量最高，并且显著高于其它各组（p＜0.05），其中较对照组提高了11.58%。第1、2、3组与对照组相比没有显著性差异（p＞0.05）。

超氧化物歧化酶（SOD）是使细胞免受氧化伤害的关键酶之一，也就是SOD的含量越高，动物体的免疫力越强。从表3中可以看出，第1组即用木聚糖酶预处理饲料组鲤鱼血清中SOD含量与对照组0组相比有显著性差异 （p＜0.05），较对照组提高了24.08%。第2、3、4组鲤鱼血清中SOD的含量与对照组相比没有显著性差异（p＞0.05）。

溶菌酶（LSZ）也是衡量机体免疫力的指标之一，血清中LSZ的含量高在一定程度上也说明了动物体有较强的免疫力。从表3各组鲤鱼血清中LSZ的数值可以看出，第4组即后喷涂液体木聚糖酶组鲤鱼血清中LSZ的含量显著高于对照组（p＜0.05），较对照组提高了43.98%。第1、2、3组与对照组相比没有显著性差异（p＞0.05）。

3 讨论

酶制剂作为一种新型“绿色”环保型添加剂，在生产中的正效应已得到了充分验证，但是饲用酶制剂属于蛋白质，在饲料的成型加工工艺中，因制粒过程中温度及压力的急剧升高，大部分酶活都会消失。为了解决这一问题，本研究主要从酶制剂的添加工艺入手，避免酶活的损失，使酶制剂的效果得以真正实现。本次试验主要采用两种添加工艺，分别是用酶制剂对饲料原料进行预先处理然后再制粒，以及制粒结束后，在颗粒饲料表面进行液体酶制剂的喷涂。通过养殖试验对其作用效果进行验证。从上面的试验结果可以看出，后喷涂液体木聚糖酶组鲤鱼的增重率较对照组显著提高，饲料系数较对照组显著降低。用纤维素酶预处理饲料组的鲤鱼饲料系数也较对照组显著降低。因此，就鲤鱼的生长效果来看，后喷涂酶制剂的作用效果更加明显。

通过对鲤鱼免疫指标的测定可以看出，用后喷涂酶制剂的方法可以显著提高鲤鱼血液中血红蛋白及血清中溶菌酶的含量。而用木聚糖酶预先处理饲料原料的方法，可以显著提高鲤鱼血清中超氧化物歧化酶（SOD）的含量。因此，用酶制剂预处理饲料原料及用液体酶后喷涂颗粒饲料的方法都可以起到提高养殖鱼类免疫力的作用。

Study on the effects of processing technology on enzyme activity

Zhang Kaisong

(Henan Academy of Fishery Science,Zhengzhou 450044,Henan,China)

Owing to the inactivation of enzyme preparation in the granulation step,which affected the function of the enzyme preparation.Therefore,this experiment started from the adding process of the enzyme preparation for the sake of avoiding the enzyme activity loss,then the effects of the corresponding feed was verified in a growth trial.Two adding processes,namely the raw materials pretreated with enzyme preparation and then granulated,as well as liquid enzyme preparation spraying after the granulation were adopted.After a two-month growth trial,the growth performance of common carp was obviously promoted in the enzyme preparation post-spraying group.Both processes can improve the immunity of common carp.

common carp;enzyme preparation;pretreatment;post-spraying;growth performance

表3 酶制剂的添加对鲤鱼免疫指标的影响