白灵菇液体菌种的制备应用试验

卢朝亮（山东省淄博市高青县食品药品监督管理局，山东 淄博 256300）



白灵菇液体菌种的制备应用试验

卢朝亮
（山东省淄博市高青县食品药品监督管理局，山东 淄博 256300）

关键词白灵菇；液体菌种；麦粒菌种；菌丝长势

白灵菇（Pleurotus nebrodensis）又名白灵侧耳，子实体洁白，肉质细腻，口感脆滑，菌肉肥厚，有很高的营养价值及药用价值，其产品在国内外食用菌高端市场供不应求。由于白灵菇的人工栽培历史较短，且发菌、制种周期较长，生物转化率低，满足不了市场的需求，而采用液体菌种发酵技术制种，有明显的优越性。

液体菌种具有生产时间短，接种方便，接种后菌丝萌发快，生长迅速的特点。为充分发挥液体菌种的优势，需要找出白灵菇液体菌种的最佳培养时间（菌龄），避免因培养时间过短，菌丝生物量过少，或培养时间过长，菌丝体老化、自溶等。笔者对此进行试验，结果如下。

1　材料与方法

1.1试验材料

白灵菇菌种由山东梁山正大食用菌研究所提供，斜面母种在冰箱中4 ℃下保藏。

母种培养基配方为葡萄糖2.0%，土豆15.0%，麦麸5.0%，琼脂2.0%。将土豆切片和麦麸共煮20 min，四层纱布过滤，弃去滤渣，葡萄糖、琼脂溶入滤液，加水至预定体积，pH值自然，0.1 MPa，121 ℃灭菌20 min。

液体培养基配方为豆饼粉1.0%，玉米粉2.0%，葡萄糖2.0%，酵母膏0.2%，KH2PO40.1%， MgSO40.1%，pH自然，0.1 MPa，121 ℃灭菌20 min。

麦粒培养基配方为麦粒99%，石灰粉1%，另加石膏粉1%，KH2PO40.1%，MgSO40.1%。用清水淘洗小麦粒2次，去除杂质，用1%的温石灰水浸泡12 h以上，煮沸后文火保持30 min，以麦粒煮透无白心不破皮为度，将煮好的麦粒沥水捞出，晾至麦粒表皮无水渍为止。按照配方将各种原辅料拌匀，将配好的料装入500 mL输液瓶，装至瓶肩处，清洁瓶口、瓶身，塞好棉塞，棉塞松紧适度。0.15 MPa、121 ℃保持2 h。

1.2试验方法

（1）母种的制 备。将白灵菇菌种活化后接至试管母种培养基，置于恒温箱中24 ℃培养至菌丝满管，置冰箱中4 ℃保藏备用。

（2）白灵菇菌丝体一级摇瓶菌种接种及培养。250 mL三角瓶（摇瓶）装液量为100 mL，每个摇瓶接种活化过夜的白灵菇母种2块，每块为1 cm2，摇床转速为150 r/min，培养温度25 ℃，采用不同培养时间的液体菌种接种麦粒培养基（表1），通过菌丝长速得出最佳培养时间。

（3）二级摇瓶菌种接种培养。500 mL三角瓶装液量200 mL，每个摇瓶接种一级摇瓶菌种10 mL，摇床转速为150 r/min，培养温度24 ℃，采用不同培养时间的液体菌种接种麦粒培养基（表1），通过菌丝长速得出最佳培养时间。

（4）不同培养基菌种接种培养。母种接麦粒培养基，每瓶接1 cm2大小的母种块2块，接10瓶；液体菌种接麦粒培养基，每瓶接10 mL，接20瓶；麦粒种接麦粒培养基，每瓶接10粒左右，接10瓶。接种后，在25 ℃、相对黑暗的条件下培养，观察菌丝萌发、菌丝覆盖料面、瓶底出现菌丝、满瓶等的时间，比较不同类型的菌种在麦粒培养基上的生长表现。

2　结果与分析

2.1一级液体菌种的适宜菌龄

将不同培养时间的白灵菇一级液体菌种接入麦粒培养基的试验结果表明（表1），一级液体菌种最佳菌龄为96 h，菌丝生长快、活力强，满瓶时间为8天，优势明显。2.2二级液体菌种的适宜菌龄

表1　白灵菇不同菌龄的一级和二级液体菌种接种后的菌丝长速

将培养时间不同的白灵菇二级液体菌种接入麦粒培养基中，结果如表1所示，二级液体菌种的最佳菌龄为72 h，接种后发菌速度最快，满瓶所需的时间最短。2.3不同类型菌种接种后的菌丝长势

麦粒培养基含有适宜白灵菇菌丝生长所需的营养物质，接种后萌发的菌丝粗壮，吃料快，适应能力强，菌丝发满后用作生产栽培种非常适宜，且主要原料麦粒来源广，价格低。

白灵菇液体菌种接种到麦粒培养基上分散度好，菌丝萌发点多，具有立体发菌优势，发菌时间远快于麦粒菌种及母种（表2）；而麦粒种菌丝粗白浓密，长势好，主要原因可能是麦粒菌种是固体菌种，麦粒内营养丰富，以麦粒菌种接种麦粒培养基，菌丝不需要适应新培养基。

表2　不同类型菌种接种于麦粒培养基上的长势

3　小　结

试验对比发现，不同种龄的液体菌种发菌速度存在很大的差异，其中以培养96 h的一级液体菌种和培养72 h的二级液体菌种接种于麦粒培养基后发菌速度快，相较于母种、麦粒种接种麦粒培养基，液体菌种可大大缩短发菌时间，在白灵菇的生产栽培种具有应用优势。

参考文献

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[3] 黄梅. 香菇液体菌种制备及菌糠资源化研究[D]. 四川师范大学, 2014.

[4] 黎勇, 薛林浩, 王丹. 日引1号杏鲍菇液体制种条件研究 [J]. 食用菌, 2012(3): 22-24.

作者简介：卢朝亮，男，工程师，硕士，毕业于河北大学食药用真菌研究所，长期从事食用菌菌种推广与研发工作

中图分类号：S646

文献标识码：B

文章编号：2095-0934（2016）02-098-02