张巧安
(汉川市人民医院,湖北 汉川 431600)
ELISA法和化学发光法对血清中HIV-1HIV-2抗体、梅毒抗体和丙肝抗体的检测意义
张巧安
(汉川市人民医院,湖北汉川431600)
摘要:目的探讨分析ELLSA法(酶联免疫吸附法)和化学发光法对血清中HIV-1/HIV-2抗体、梅毒抗体和丙抗体的临床检测意义。方法将382份脐血作为研究分析对象,分别采用酶联免疫吸附和化学发光法对所选标本进行检测,包含丙肝抗体、梅毒抗体、HIV-1/HIV-2抗体检测。结果采用ELLSA检测后HIV-1/HIV-2抗体、梅毒抗体、丙肝抗体阳性率分别为0.52%、0.79%、1.05%。采用化学发光法检测HIV-1/HIV-2抗体、梅毒抗体、丙肝抗体3种检测的阳性率分别为0.79%、1.05%、1.31%。标准抗体品梯度稀释后再进行检测,将此3种抗体稀释程度为10 pg/mL,三组抗体采用化学发光法进行检测,其结果均为阳性,采用酶联免疫吸附方式进行检测的只有梅毒抗体呈阳性,其余两项均为阴性。结论化学发光法作为临床进行血清中HIV-1/HIV-2抗体、梅毒抗体、丙肝抗体检测的首选方案,此检测方式具有更高的灵敏性。
关键词:酶联免疫吸附法;化学发光法;血清;HIV-1/HIV-2抗体;梅毒抗体;丙肝抗体
进行血清中HIV-1/HIV-2抗体、梅毒抗体、丙肝抗体等3种检测时较常用酶联免疫试验,为提高检测的敏感性和特异性,汉川市人民医院采用化学发光仪进行检测血液标本。本文选取汉川市人民医院2015年3月至2015年5月期间收集的382份脐血作为研究分析对象,采用回顾分析的方式,意在探讨ELLSA法(酶联免疫吸附法)和化学发光法对血清中HIV-1/HIV-2抗体、梅毒抗体和丙抗体的临床检测意义[1-2]。
1资料及方法
1.1一般资料
选取汉川市人民医院2015年3月至2015年5月期间收集的382份新生儿脐血作为研究分析对象,包含男性患儿201例,占比为52.62%,女性患儿181例,占比为47.38%。
1.2方法
酶联免疫吸附法试剂由北京万泰生物药业有限公司进行提供,化学发光试剂由美国雅培公司进行提供,i2000型化学发光法仪器使用美国生产品。
所采集的血液标本均放置在零下二十度的冰箱中进行保存,待检测前方才取出,在温室进行解冻,检测相关操作按照仪器和试剂盒的使用说明进行操作。
2结果
采用酶联免疫吸附的方式进行检测,其HIV-1/HIV-2抗体、梅毒抗体、丙肝抗体3种检测的阳性率详见表1。采用化学发光法检测HIV-1/HIV-2抗体、梅毒抗体、丙肝抗体3种的阳性率详见表2。
表1 酶联免疫吸附方式检测HIV-1/HIV-2抗体、
表2 化学发光法检测HIV-1/HIV-2抗体、
将两种方式所检测出的结果进行分析后得知,酶联免疫吸附方式所检测出为阳性的采用化学发光法进行检测,其结果仍为阳性,同时将标准抗体品梯度稀释后再进行检测,将此3种抗体稀释程度为10 pg/mL,三组抗体采用化学发光法进行检测,其结果均为阳性,采用酶联免疫吸附方式进行检测的只有梅毒抗体呈阳性,其余两项均为阴性。
3两种检测方式分析
3.1ELISA法
ELISA法中文名称为酶联免疫吸附实验,指固相载体的表面吸附已知的抗体或抗原,使酶标记的抗体或抗原反应在固相表面所进行的技术[2]。此项技术多用于特异性抗体和大分子抗原等的检测中,同时具有一定的优势,如载体标准化的难度较低、检测速度较快、灵敏性高、操作简单等等。此项技术的基本原理为利用抗体或抗原所存在的特异反应将酶和待测物进行连接,底物和酶会产生相应的颜色变化,则进行定量测定,其测定的对象为抗原或抗体。
3.2化学发光法
化学发光状况属于自然现象中较为常见的一种,化学发光法指利用化学发光来测定具有化学发光反应的抑制剂、催化剂、反应物、增敏剂,以及偶合反应中的增敏剂、催化剂、反应物的方式[3]。其基本原理为发光系统和免疫反应两者进行结合,从而对抗原抗体进行检测。
4讨论
本文中所列举的382份血液标本,采用两种方式进行检测HIV-1/HIV-2抗体、梅毒抗体、丙肝抗体,其结果表明,化学发光法检测其较低阳性状况,而采用酶联免疫吸附法进行检测结果有可能出现阴性状况,基本可以证明,化学发光法与酶联免疫法相比,前者的敏感性更高。同时,化学发光法所检测出值小于何数时标本呈阳性,而采用酶联免疫吸附法进行测定标本有可能出现阴性的情况。
综上所述,临床在进行血清中HIV-1/HIV-2抗体、梅毒抗体、丙肝抗体检测时,可将化学发光法作为首选检测方案,此检测方式与酶联免疫吸附检测方式进行比较具有更高的灵敏性,存在较大的临床应用价值。
参考文献:
[1]倪晓媚,徐成芬,曾永,等.ELISA检测HIV抗体中临界值质控血清的制备[J].浙江预防医学,2014,26(4):431-432.
[2]赵晓飞,张彩荣,刘晓娟,等.表达HIV-1 gag蛋白的重组乳酸乳球菌诱导小鼠产生体液免疫应答[J].细胞与分子免疫学杂志,2014,30(11):1142-1145.
[3]张贵强,董娜,王玉霞,等.朝鲜淫羊藿多糖对HIV-1包膜蛋白质gp120的免疫佐剂活性[J].中国药理学与毒理学杂志,2013,27(6):959-965.
The Significance of Detection of ELISA Method and Chemical Luminescence Method for Serum HIV-1HIV-2 Antibody, Syphilis Antibody and Hepatitis C Antibodies
ZHANG Qiaoan
(Hanchuan People’s Hospital, Hubei Hanchuan 431600, China)
Abstract:ObjectiveTo probe into the clinical detection significance of ELLSA method (ELISA) and chemical luminescence method for HIV-1/HIV-2 antibody, syphilis antibody and antibody in serum. Methods382 part of the cord blood were selected as the research object,they were respectively measured by enzyme linked immunosorbent assay and chemical luminescence method of the samples were detected and contains anti HCV, syphilis antibody and HIV-1/HIV-2 antibody detection. ResultsThe ELLSA after the detection of HIV-1/HIV-2 antibody, syphilis antibody, hepatitis C antibody positive rates were 0.52%, 0.79%, 1.05%. By chemical luminescent method to detect the HIV-1/HIV-2 antibody, syphilis antibody, hepatitis C antibody three detection positive rate were respectively 0.79% and 1.05% and 1.31%. In addition, the dilution of the standard antibody was detected, and the dilution of the three antibodies was 10pg/ml, and the three groups were detected by chemical. luminescence method. The results were positive, and the other two were negative. ConclusionThe chemical luminescence law as a clinical in the preferred option for serum antibody HIV-1/HIV-2, syphilis antibody, HCV antibody detection, which this detection method have higher sensitivity.
Key words:ELISA; chemical luminescence; serum; HIV-1/HIV-2 antibody; syphilis antibody; hepatitis C antibody
收稿日期:2015 - 10 - 08
中图分类号:R 446.61
文献标识码:A
文章编号:1006-446X(2016)05-0017-03