□王艳(河北省黄骅市农业局兴牧兽医院)
某规模化鸡场大肠杆菌病诊断及防控
□王艳(河北省黄骅市农业局兴牧兽医院)
2015年2月,黄骅市羊二庄镇某规模化养殖场的大部分蛋鸡突然发生一种以下痢和产蛋下降为主要临床症状的疾病。经微生物学、病理学诊断确诊为大肠杆菌病。用氟苯尼考等8种抗菌药物对纯化的大肠杆菌分离物进行药敏试验。结果表明,该细菌分离物仅对氟苯尼考、阿米卡星和庆大霉素极敏感,对其他药物具有不同程度的耐受性。
黄骅市羊二庄镇某规模化养殖场所养的10000只蛋鸡采食量不断减少,其中900只表现下痢,产蛋率下降15%,少数病鸡死亡。
病鸡的临床症状表现为:采食量少,精神沉郁,羽毛蓬乱,两翅下垂,排浅绿色或灰白色稀粪、肛门周围粘有黄白色腥臭稀粪,腹部肿大、两脚关节肿大不能站立,产蛋量下降,个别病鸡突然死亡。
剖检可见病死鸡消瘦,气囊浑浊;腹腔有淡黄色半透明积液,时间稍长即变为胶冻样;心脏、肝脏等脏器被乳白色纤维膜包裹,并与其他组织黏连,切开包膜可见轮层;肝脏瘀血,胰腺、十二指肠黏膜出血;其中多只送检鸡的小肠、盲肠和输卵管浆膜、肝脏、心脏、脾脏和肾脏被膜等处还可见大小不等的白色结节,呈圆形或椭圆形,有绿豆大至玉米粒大,有明显的蒂;结节质地坚实,有完整的包膜,表面光滑,切面呈灰白色、均质。
4.1 细菌的鉴别培养
用接种环无菌钩取病鸡少许肝组织、脾组织划线接种于麦康凯琼脂培养基,37℃培养24小时后取出观察。在麦康凯培养基上长有边缘整齐或波状,稍凸起,表面光滑湿润,直径1.5~2毫米粉红色或深红色菌落;在普通琼脂平板上长有表面光滑、湿润、半透明、灰白色圆形、微凸起的中等大小菌落。
4.2 染色镜检
用接种环无菌钩取肝组织,脾脏少许划线接种于麦康凯琼脂培养基,置于37℃培养24小时,取出后,选取麦康凯琼脂板上单个红色菌落,用接种环从该菌落中挑一部分涂片,革兰氏染色镜检。染色镜检可观察到该细菌为革兰氏阴性,两端顿圆短粗的小杆菌,多数单个散在,个别成双排列,无芽孢。通过以上试验结果诊断为大肠杆菌病。
用灭菌接种环挑取麦康凯板培养24小时待试细菌的纯培养物(选择的菌落尽量大小一致)。用灭菌尖头镊子,取已制备好的各种干燥抗菌药敏片,密贴于上述培养基表面,用镊子轻按下纸片,试纸片与培养基接触紧密,药敏片标记清楚。将贴药敏片的平板置37℃ 温箱中培养24小时,取出观察结果,测量抑菌圈直径。按抑菌圈直径大小作为判定敏感性的标准:20毫米以上,极敏;15~20毫米,高敏;10~14毫米,低敏;10毫米以下,耐药。
表1 药敏试验结果
通过本次药敏试验结果表明:庆大霉素、阿米卡星、氟苯尼考对大肠杆菌极敏;链霉素、新霉素、对大肠杆菌高敏;强力霉素、四环素、阿莫西林对大肠杆菌耐药。
6.1 根据病鸡的临床表现、剖检病理变化、以及采集的病死鸡的病料接种于麦康凯培养基上,培养基长出中等大小的粉红色光滑菌落,取典型菌落抹片染色镜检可见革兰氏阴性中等大的杆菌,生化试验对葡萄糖、乳糖、麦芽糖和甘露醇产酸产气,与大肠杆菌的特征一致。
6.2 根据药敏试验可得出结论,临床上应用较多的四环素、强力霉素、阿莫西林对大肠杆菌的耐受性很强。应用较少的氟苯尼考,氨基糖苷类药对大肠杆菌有高度的敏感性。
6.3 本病的治疗可根据药敏试验的结果选择合适的药物进行治疗,因此建议在临床上应停用已普遍产生耐药性、临床上已明显无效的药物,选用目前应用较少、经药敏实验证明对大肠杆菌敏感的药物。庆大霉素和氟苯尼考等,对本病通常具有较好的治疗效果。另外,还应考虑采取联合用药、交叉或轮换用药等方法。用药物治疗效果不理想时,用当地分离的菌株制备的大肠杆菌灭活苗对本病也有较好的防制效果。生产中发现,通过接种疫苗来预防大肠杆菌病,效果比较明显,接种疫苗后即使发病也比较轻,而且用药后也容易治愈。