溴氰菊酯残留测定方法及其在金银花中残留动态研究

王玉洁 薛健 顾炎 金红宇 马双成

[摘要]研究溴氰菊酯在金银花中的残留动态规律，为金银花安全监控及生产中的安全合理使用提供科学依据。采用田间试验方法，设对照、喷施推荐剂量、高倍剂量共3个处理，重复3次。于喷施农药后2 h，1，2，3，4，5，7，9，11，13，15 d，采集样品。建立气相色谱测定方法对田间样品进行测定。结果表明，建立的金银花中溴氰菊酯测定法，在3个不同添加水平溴氰菊酯回收率均在764%～869%，RSD小于11%，在5～500 μg·L-1线性关系良好，符合农残测定要求；田间试验得到残留动态方程为高倍剂量C=5992 2e-0338t，推荐剂量C=1536 9e-031t，残留动态符合一级动力学降解规律，农药半衰期为209～224 d。建议在蚜虫发生期按推荐剂量喷施溴氰菊酯乳油，距离采花至少间隔7 d，以保证金银花药材安全。

[关键词]金银花；溴氰菊酯；残留动态；农药安全使用；农药半衰期

[Abstract]This paper reports the residual dynamics of deltamethrin and detection method in Loincerae Japonicae Flos to provide scientific basis for safe and appropriate use of deltamethrin A field experiment was conducted in Fengqiu， Henan Province China The field plots were sprayed with deltamethrin at the recommended dose and a high dose， respectively， and a control was set up， totally being 3 treatments with 3 replications The flowers were picked at 2 hours， 1， 2， 3， 4， 5， 7， 9， 11， 13 and 15 days after pesticide application and then dried The residue of deltamethrin was determined by gas chromatography method with electron capture detector for the above samples Results showed that recoveries of deltamethrin ranged from 764% to 869%，and the relative standard deviation was below 11%，Linearity was observed over a range of 5500 μg·L-1 with correlation coefficient was 0 999 2 The established method meets the requirements of pesticide residue analytical methods The degradation of deltamethrin followed the first order dynamics The residue dynamic equation of the high dose and recommended dose deltamethrin were C=5992 2e-0338t and C=1536 9e-031t respectively， and the halflife of deltamethrin in Loincerae Japonicae Flos was 209224 days， which indicates that deltamethrin is an easily degradable pesticide It is concluded that deltamethrin should be used in aphids occurring period and the safety interval was more than 7 days to ensure the safety of Loincerae Japonicae Flos consuming

[Key words]detalmethrin； Loincerae Japonicae Flos； residual dynamics； safe use of pesticides； halflife of pesticides

doi：10.4268/cjcmm20160811

金银花是常用的大宗药材之一，在种植过程中蚜虫害严重[1]。经调研发现，溴氰菊酯作为一种杀虫剂对蚜虫具有良好的防效，在农作物上被广泛使用，但溴氰菊酯属于限量使用农药，大量接触溴氰菊酯会抑制免疫系统作用，为保证其在金银花上的用药安全，研究其在金银花上的残留动态十分必要。目前，已有溴氰菊酯的残留动态报道[24] ，但并未发现在金银花生产中使用的相关研究。本研究采用田间试验方法对溴氰菊酯在金银花中的残留动态进行了研究，建立气相色谱法并对金银花中溴氰菊酯残留量进行测定，得出残留动态并提出安全使用建议，为其在金银花上的安全使用提供科学依据，对制定农药在其他药材中的安全使用规范也具有指导意义。

1材料

11供试药材

本实验样品由田间试验获得，经中国医学科学院药用植物研究所张本刚研究员鉴定为忍冬科植物忍冬的干燥花蕾（金银花）。

12试剂

丙酮、石油醚（60～90 ℃）、乙醚均为分析纯，北京化工厂；正己烷为色谱纯（Fisher Scientific），溴氰菊酯对照品（100 g·L-1，农业部环境保护科研监测所，编号：GSB0523102008）；弗罗里硅土（Fluca公司，进口分装，60～100目，650 ℃中活化4 h，转移至130 ℃烘箱中保持5 h，储存在不透气的干燥器中，过夜冷却。活化后的弗罗里硅土中小心加入2%的蒸馏水，在机械摇动器上摇动1 h，放置过夜）

13供试药剂

溴氰菊酯，商品名：敌杀死，25 g·L-1乳油，拜耳作物科学（中国）有限公司。

14仪器

Agilent 7890A气相色谱仪，电子捕获检测器，美国安捷伦公司；SB2500DT超声波清洗仪，宁波新芝生物科技股份有限公司。

2方法

21田间试验

田间试验在河南省封丘县进行。试验地选在封丘县黄德镇西于村，金银花品种为大毛花，平地种植，长势良好，植株大小一致，三到四年生，行距约90 cm，株距约75 cm，树冠直径60～80 cm，树高50～60 cm。从中选取约1亩（1亩≈667 m2），根据ny/t 7882004“农药残留试验准则”[5]实施，使用25 g·L-1溴氰菊酯（商品名：敌杀死）乳油，按对照、推荐剂量（75 g·hm-2）和高倍剂量（225 g·hm-2）3个处理，每个处理3个重复小区，试验小区面积15 m2（3 m×5 m），每小区约金银花18株，每小区间设隔离行3 m，按实际浓度配制农药，均匀的喷洒在每一小区的植株上，分别于施药后2 h，1，2，3，4，5，7，9，11，13，15 d在每小区内五点法采集金银花样品约100 g，40 ℃升温至60 ℃，烘干处理20 h后，-20 ℃冰箱储存。

22样品测定

221色谱条件安捷伦HP5石英毛细管柱（032 mm×30 m，025 μm）；电子捕获检测器；载气为高纯氮气（>99999 2%）；进样口温度250 ℃，不分流进样；检测器温度300 ℃；升温程序：初始温度150 ℃，保持3 min，以10 ℃·min-1的速度升温至270 ℃，保持15 min；恒流模式，流速1 mL·min-1；进样量 1 μL；外标法定量。

222样品溶液的制备精密称取金银花粉末20 g（过2号筛）于100 mL具塞三角瓶中。加入丙酮30 mL超声提取15 min，静置，过滤。样品残渣再加入丙酮20 mL超声提取15 min，重复2次，静置，过滤。合并所有滤液。40～45 ℃水浴旋蒸浓缩至近干。浓缩液倾入用10 mL石油醚预淋过的玻璃色谱柱（12 mm×250 mm），色谱柱内的填料从上至下依次为无水硫酸钠2 g、含2%水弗罗里硅土4 g、无水硫酸钠2 g。用石油醚（60～90 ℃）乙醚（4∶1）混合溶液25 mL洗脱，收集洗脱液，于40～45 ℃减压浓缩至近干。残渣用石油醚（60～90 ℃）溶解转移至5 mL具塞试管中，定容至3 mL，即得。

223对照品溶液的制备取溴氰菊酯标准溶液（100 g·L-1）1 mL于10 mL茶色量瓶，加色谱纯正己烷至刻度，得到10 g·L-1溶液作为母液保存于-20 ℃冰箱。取该母液1 mL，稀释100倍即得100 mg·L-1对照品溶液。

3结果与分析

31溴氰菊酯含量测定方法建立

311提取溶剂及净化方法选择对于金银花中溴氰菊酯提取溶剂选择，对其溶解度较好的溶剂丙酮，和文献报道的几种溶剂[乙酸乙酯，石油醚，石油醚丙酮（4∶1）][68]进行考察，结果表明丙酮、乙酸乙酯、石油醚丙酮（4∶1）、石油醚作为提取溶剂对500 μg·kg-1添加样品提取回收率依次为836%，623%，512%，413%。故选择丙酮做为本试验的提取溶剂。

本实验曾尝试标准方法NY/T16032008[8]中的净化方式，发现净化效果不佳。通过比较几种商品小柱（氨基柱、弗罗里硅土柱、中性氧化铝柱）和自填玻璃色谱柱（2%弗罗里硅土与中性氧化铝混合）净化效果，发现几种色谱柱对金银花均有较好的净化效果，考虑到经济成本，最终选择2%水弗罗里硅土填充柱，填料自上而下为2 g无水硫酸钠，4 g 2%水弗罗里硅土，2 g无水硫酸钠。净化效果见图1，经过弗罗里硅土净化后，图1中C和B相比，溴氰菊酯出峰位置干扰峰消失，基线明显降低。

A.对照品；B净化前空白样品；C净化后空白样品；1 溴氰菊酯。

312溴氰菊酯测定方法学考察线性范围：将母液稀释成质量浓度分别为5，10，20，50，100，500 μg·L-1系列对照品溶液，分别进样1 μL，重复2次，以质量浓度为横坐标，峰面积积分值为纵坐标，线性回归处理，得回归方程为Y=58474X-30051，相关系数R2=0999 2。说明在5～500 μg·L-1溴氰菊酯浓度与峰面积线性关系良好。

仪器的精密度与灵敏度：取01 mg·L-1标准溶液重复进样6次，连续3 d进行GCECD测定，得到溴氰菊酯含量的精密度RSD。以信噪比（S/N）为3测得溴氰菊酯检出限（LOD）；以信噪比（S/N）为10测定方法的定量限（LOQ）。结果显示，日内精密度以RSD计为28%，日间精密度为56%，符合测定要求。溴氰菊酯检出限为1 μg·L-1，定量限为5 μg·L-1。

方法准确度和精密度：精密称取空白样品2 g，分别精密添加溴氰菊酯对照品溶液得到500，200，50 μg·kg-1溴氰菊酯添加样品，按222项下提取，净化，重复5次，测得峰面积并计算含量，得到各添加浓度回收率及精密度见表1。3个添加浓度回收率均在764%～869%，精密度（以RSD计）小于11%，符合农残测定[5]（回收率在70%～110%，RSD<15%）及本实验要求。

32金银花中溴氰菊酯残留动态

按21进行田间试验，采集样品99个，按22所述方法对样品进行测定，对照小区样品无溴氰菊酯检出，本试验设计的高低2个浓度溴氰菊酯残留量见表2。

以采样时间为横坐标，金银花中溴氰菊酯残留量为纵坐标绘制金银花中溴氰菊酯残留动态曲线见图2。

根据金银花取样时间（t/d）和其溴氰菊酯残留量（C/mg·kg-1），拟合出高倍剂量和推荐剂量处理残留动态方程分别为C=5992 2e-0338t（R2=0993 2），C=1536 9e-031t（R2=0992 2），残留量随时间呈指数关系，符合一级动力学降解模式。这与文献报道溴氰菊酯在其他作物[4，6910]上的降解动态类似。

通过方程可以得出，喷施高倍剂量和推荐剂量溴氰菊酯在金银花中半衰期分别为205，224 d，喷施15 d都降解98%以上，一般半衰期小于30 d的属于易降解农药 [11] ，因此溴氰菊酯属于易降解农药。

4讨论

41影响金银花上溴氰菊酯残留的因素

本试验2个处理得到半衰期都小于25 d，这是5月中旬在河南封丘试验得到的结果。但是如果施药时间提前气温偏低，则会延长半衰期。另外金银花的种植密度、喷药方式、天气情况如风雨等也会影响残留量。

42溴氰菊酯在金银花上的安全使用建议

安全间隔期是指作物最后一次施药距收获时所需间隔时间，是自作物最后一次喷药后到残留量降到最大残留限量（MRL）以内所需的最短间隔时间[12]。最后一次喷药与收获之间必须大于安全间隔期，以规避安全风险。

目前还没有金银花中溴氰菊酯的最大残留限量标准，我国国家标准“食品安全国家标准食品中农药最大残留限量 GB27632014” [13]中要求，溴氰菊酯在茶叶中最大残留限量为10 mg·kg-1，在花类蔬菜花椰菜中最大残留限量为05 mg·kg-1，茎叶类蔬菜为02 mg·kg-1。若以最严的茎叶蔬菜中的02 mg·kg-1为参考标准，本研究中，喷施推荐剂量（75 g·hm-2）农药7 d后，金银花中的残留量可达到此标准。金银花在山东、河南主产区的采花期一般是5月中旬，因此建议采花前蚜虫发生时喷施溴氰菊酯，采用喷雾施药的方法，喷施剂量为75 g·hm-2，安全间隔期为7 d，即最后一次施药距离采花至少7 d以上，也就是说如果5月5号喷药，最早5月12号才能开始采花。如果施药量增加或施药次数增加则相应延长间隔期。

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[责任编辑吕冬梅]