氯芬黄敏片中人工牛黄鉴别方法改进

黄东萍，何　洁，张国柱，杜远东，黄　文

(汉中市食品药品检验检测中心，陕西 汉中　723000)



氯芬黄敏片中人工牛黄鉴别方法改进

黄东萍，何洁，张国柱，杜远东，黄文

(汉中市食品药品检验检测中心，陕西 汉中723000)

摘要：目的改进氯芬黄敏片中人工牛黄鉴别方法。方法采用薄层色谱方法鉴别人工牛黄、胆酸。结果薄层展开剂采用正己烷—乙酸乙酯—冰醋酸—甲酸系统适用。结论该方法操作简便，能较全面评价氯芬黄敏片中人工牛黄的质量。

关键词：氯芬黄敏片；人工牛黄；鉴别；薄层色谱

人工牛黄由牛胆粉、胆酸、猪去氧胆酸、牛磺酸、胆红素、胆固醇、微量元素等加工而成[1]，或为贝斯素、胆酸、猪去氧胆酸、胆红素、胆固醇、无机盐等配制而成[2]，贝斯素系牛胆粉70%、牛磺酸30%[3]，具有清热解毒，化痰定惊的功效[4]。国家药品标准收载的氯芬黄敏片是含马来酸氯苯那敏、人工牛黄、双氯芬酸钠的解热镇痛类复方制剂，每片含人工牛黄15 mg，对人工牛黄中胆酸的鉴别方法是取1片用60%冰醋酸溶解后，取上清液加新制糠醛溶液和硫酸溶液(1→2)，摇匀，70℃水浴中加热，溶液应显蓝紫色[5]。糠醛易聚合，使用前须蒸馏纯化，操作较繁琐。加上人工牛黄价格较高，市场出现伪品和次品，仅通过理化反应无法评价复方制剂中人工牛黄药材的质量，因此笔者探索采用薄层色谱法进行鉴别。

1仪器与试药

超声仪(AS10000205，天津奥特赛恩斯仪器有限公司)、微量注射器(50 μL，上海注射器三厂)、硅胶G薄层层析板(天津思利达色谱技术开发公司)、电子天平(CPA225D，德国赛多利斯)。

人工牛黄对照药材(中国食品药品检定研究院，121197-201003)，胆酸对照品(中国食品药品检定研究院，100078-200414)。

正己烷、乙酸乙酯、冰醋酸、甲酸为分析纯。

2方法与结果

2.1对照品溶液的制备取胆酸对照品适量，精密称定加甲醇制成每1 mL含1 mg的溶液。

2.2对照药材溶液的制备取人工牛黄对照药材10 mg，加甲醇适量，超声处理使充分溶解，再加甲醇至5 mL，摇匀，静置，取上清液作为对照药材溶液。

2.3供试品溶液的制备取三批氯芬黄敏片的细分约一片量(相当于人工牛黄15 mg)加30 mL甲醇，超声处理使溶解，滤过，取滤液为供试品溶液。

2.4阴性样品溶液的制备根据氯芬黄敏片处方和工艺除去人工牛黄制备没有人工牛黄的阴性样品，同“2.3”法制备阴性样品溶液。

2.5薄层色谱试验吸取上述4种溶液各5 μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷—乙酸乙酯—冰醋酸—甲酸(9∶6∶2∶0.4)为展开剂展开，取出，晾干，在紫外灯(365 nm)下检视，供试品色谱中，在与胆酸和人工牛黄对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点(图1)；喷以10%磷钼酸乙醇溶液，于105℃加热至斑点清晰，供试品色谱中，在与胆酸和人工牛黄对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点(图2)。

图1　紫外灯下检视

注：1 阴性对照；2～4 供试品；5 对照药材；6 对照品。

图2　10%磷钼酸显色

注：1 阴性对照；2～4 供试品；5 对照药材；6 对照品。

3讨论

糠醛为无色或淡黄色油状液体，置空气中或见光易变为棕色[6]，影响鉴别项中的理化显色，使用前必须蒸馏，且现用现制，操作较繁琐。

人工牛黄的主要成分为牛胆粉、胆酸、猪去氧胆酸、牛磺酸、胆红素、胆固醇，以人工牛黄为对照药材、胆酸为对照品，采用薄层色谱法进行鉴别，较糠醛鉴别试验可以更全面评价氯芬黄敏片中人工牛黄的品质。

薄层试验的展开系统参考预试了《中国药典2010年版一部》中人工牛黄、复方牛黄消炎胶囊、牛黄清心丸、安宫牛黄丸、牛黄上清片等多品种项下人工牛黄的薄层鉴别展开系统，牛黄清心丸[7]异辛烷—乙酸乙酯—冰醋酸系统、牛黄上清片[8]正己烷—乙酸乙酯—冰醋酸—甲酸系统均有较好的分离效果，正己烷—乙酸乙酯—冰醋酸—甲酸系统展开的斑点更集中。

除人工牛黄外，体外培育牛黄也是天然牛黄代替品，体外培育牛黄为牛的新鲜胆汁作母液，加入去氧胆红素、胆酸、复合胆红素钙等制成[9]，解热作用强度与天然牛黄相似[10]、抗惊厥镇痛作用明确[11-13]，张轶华等[14]采用薄层色谱法以异辛烷—乙酸乙酯—冰醋酸为展开系统，对小儿氨酚黄那敏颗粒中人工牛黄和体外培育牛黄进行快速鉴别。因未获得体外培育牛黄，所以未验证复方制剂中体外培育牛黄与人工牛黄在正己烷—乙酸乙酯—冰醋酸—甲酸系统的区别。

参考文献：

[1]国家药典委员会.中国药典(一部)[S].北京：中国医药科技出版社，2015：5-8.

[2]国家药典委员会.中华人民共和国卫生部新药转正标准第十七册[S]:120-121.

[3]国家药典委员会.国药典中发[2006]318号关于“人工牛黄”质量标准有关执行内容的函[Z]，2006—10—20.

[4]钟赣生.中药学[M].北京：中国中医药出版社，2012：350.

[5]国家药典委员会.国家药品标准化学药品地标升国标第十一册[S] .2002：69.

[6]国家药典委员会.中国药典(四部)[S].北京：中国医药科技出版社，2015：317.

[7]国家药典委员会.中国药典(一部)[S].北京：中国医药科技出版社，2010：564.

[8]国家药典委员会.中国药典(一部)[S].北京：中国医药科技出版社，2010：555.

[9]国家药典委员会.中国药典(四部)[S].北京：中国医药科技出版社，2015：173-174.

[10] 孟庆云．体外培育牛黄的研制与临床[J].中国中医基础医学杂志，2006，12(10):799-800.

[11] 陈英芳，耿少怡，林燕，等．小儿牛黄清心散治疗小儿上呼吸道感染的临床疗效观察[J].现代中西医结合杂志，2012，21(2):171-172.

[12] 张韶辉，黄铁花，李璐璐，等．体外培育牛黄抑制大鼠三叉神经节细胞电压依赖性钙通道电流参与镇痛机制[J].中国药师，2012，15(9):1232-1234.

[13] 吴涛，张程亮，蔡红娇，等.牛黄及体外培育牛黄的药理作用研究进展[J].中国药师，2014，17(8)：1396-1399.

[14] 张轶华，姜建国，孙婷，等.小儿氨酚黄那敏颗粒中人工牛黄和体外培育牛黄的研究[J].中成药，2015，37(2)：329-331.

Improved identification method of artificial Calculus Bovis in Compound Dicolfenac Sodium and Chlorphenamine Maleate Tablets

HUANG Dong-ping,HE Jie,ZHANG Guo-zhu,et al

(FoodandDrugControlCenter,Hanzhong,Shaanxi723000,China)

Abstract:ObjectiveTo improve the identification of Artificial Calculus Bovis in Compound Diclofenac Sodium and Chlorphenamine Maleate Tablets.Methods We adopted thin layer chromatography to identify artificial Calculus Bovis and cholic acid. Results The system of n-hexane- ethyl acetate- acetic acid-methanoic acid is feasible. Conclusions The method is simple and can control the quality of artificial Calculus Bovis in compound preparation comprehensively.

Key words:Compound Diclofenac Sodium and Chlorphenamine Maleate Tablets；artificial Calculus Bovis；identification；TLC

(收稿日期：2015-10-22，修回日期：2016-01-18)◇临床医学◇

doi:10.3969/j.issn.1009-6469.2016.03.016