左旋芳樟醇及其两种复方精油的催眠镇静作用

李应洪, 李忠海, 付湘晋, 张　慧, 杨海清

(中南林业科技大学食品科学与工程学院, 湖南 长沙 410004)



左旋芳樟醇及其两种复方精油的催眠镇静作用

李应洪, 李忠海, 付湘晋, 张慧, 杨海清

(中南林业科技大学食品科学与工程学院, 湖南 长沙 410004)

摘要:探讨左旋芳樟醇及其两种复方精油(1号复方精油配方：左旋芳樟醇∶薰衣草精油∶依兰依兰油∶柏木油=1∶2∶4∶3,2号复方精油配方：左旋芳樟醇∶薰衣草精油∶依兰依兰油∶柏木油=5∶3∶1∶1)对小鼠的催眠镇静作用，研究精油对小鼠自主活动、阈上剂量戊巴比妥钠致小鼠睡眠潜伏期和睡眠时间、阈下剂量戊巴比妥钠致小鼠睡眠只数的影响.结果表明：3种精油对小鼠均有明显的催眠镇静作用，其中以浓度为10(-3)的2号复方精油的效果最佳；在小鼠自主活动能力测试中，2号复方精油组小鼠的总路程与对照组的差异极显著(P<0.01)，休息时间、活动时间、活跃度、中间区域时间和中央区域路程与对照组的差异显著(P<0.05)；与对照组相比较，2号复方精油极显著缩短小鼠睡眠潜伏期(P<0.01)，从(18.47±2.04) s缩短到(14.13±1.73) s，极显著延长小鼠睡眠时间(P<0.01)，从(27.01±5.84) s延长到(40.41±8.36) s，增加小鼠睡眠只数(P<0.01)，从1只增加到7只.可见，左旋芳樟醇及其两种复方精油具有明显的催眠镇静作用，以2号复方精油的效果最佳.

关键词:左旋芳樟醇; 复方精油; 催眠; 镇静

近年来，由于生活节奏加快，大量人群存在疲劳、情绪暴躁、失眠等亚健康状态，长期依靠药物改善睡眠的人口越来越多.但长期服用药物对身体有一定伤害，甚至会形成依赖性，产生后遗症等[1].芳香疗法可使人放松心情、缓解压力、减少焦虑、改善睡眠等，而且更安全，是上述亚健康状态的重要辅助疗法，已成为研究热点.

目前，芳香疗法所用香料、精油中最常见的挥发性香气分子为芳樟醇，如芳樟油、黄樟油、香柠檬油、薰衣草油和玫瑰木油等均含有芳樟醇[2].国内外研究发现，吸入一定浓度的芳樟醇后可以延长戊巴比妥钠诱导的睡眠时间，减少活动次数[3]；Umezu et al[4]对ICR小鼠进行Geller和Vogel两种冲突试验，给小鼠腹腔注射一定剂量的薰衣草精油后产生抗冲突、抗焦虑作用，经进一步对薰衣草精油中各主要成分进行Geller和Vogel两种冲突试验，发现芳樟醇为薰衣草精油抗焦虑、镇静作用的主要药理活性成分；王善懿[5]用单方薰衣草精油和以薰衣草精油为原料配制的复方精油对昆明小鼠进行催眠镇静作用研究，发现复方精油的催眠镇静作用更好.Sugawara et al[6]研究了芳樟醇不同光学异构体的药理效应差异，分别给受试者吸入左旋、右旋和消旋体芳樟醇，发现吸入左旋芳樟醇的受试者的负面情绪，如激动、不安等得以纠正，吸入消旋体芳樟醇的情况与此相似，而吸入右旋芳樟醇的情况恰好相反，证明左旋芳樟醇的催眠镇静作用优于右旋和消旋体芳樟醇.但以左旋芳樟醇单方或复方作为芳香精油用于芳香疗法来催眠镇静尚未见报道[7-8].

本试验室前期研究以左旋芳樟醇为主要原料，结合几种经过试验证实同样具有镇静催眠、镇痛等作用的芳香精油(薰衣草精油、依兰依兰油、柏木油)进行调配，以香味强弱、香味好感度、香气持久性、透明度和颜色作为评价指标，采用灰色关联度法，确定了两个最佳复方精油配方.1号复方精油配方为：左旋芳樟醇∶薰衣草精油∶依兰依兰油∶柏木油=1∶2∶4∶3；2号复方精油配方为：左旋芳樟醇∶薰衣草精油∶依兰依兰油∶柏木油=5∶3∶1∶1[9].本试验进一步研究这两种复方精油对小鼠的催眠镇静作用，旨在为芳香疗法提供理论依据.

1材料与方法

1.1材料

1.1.1试剂与精油左旋芳樟醇、薰衣草精油、依兰依兰油和柏木油4种精油由厦门牡丹香化实业有限公司提供，用这4种精油按一定的体积比配制上述1和2号复方精油；聚乙二醇-200和戊巴比妥钠均为分析纯.用聚乙二醇-200将左旋芳樟醇、1和2号复方精油分别稀释成10-2、10-3两个浓度梯度.

1.1.2动物健康ICR品系小鼠(体重35~45 g)，购于湖南斯莱克景达实验动物有限责任公司.

1.1.3设备主要设备有ZH-ZFT型自发活动视频分析系统(淮北正华生物仪器设备有限公司).

1.2方法

1.2.1戊巴比妥钠阈上剂量和阈下剂量的测定腹腔注射戊巴比妥钠，使100%小鼠入睡，但又不使睡眠时间过长的注射剂量作为阈上剂量，一般为30~60 mg·kg-1.选取40只小鼠(雌雄各半)随机分为4组，每组10只，分别以35、40、45和50 mg·kg-1为注射剂量，选取在给药后使100%小鼠入睡，睡眠时间不超过1 h的剂量[10].

腹腔注射戊巴比妥钠，使90%~100%小鼠翻正反射不消失的最大剂量作为阈下剂量，一般为20~30 mg·kg-1.选取50只小鼠(雌雄各半)随机分为5组，每组10只，分别以20、23、25、27和30 mg·kg-1为注射剂量，测定阈下剂量[10].

1.2.2精油对小鼠自主活动影响的试验小鼠于试验前8 h禁食、进水，将小鼠(雌雄各半)随机分组，每组10只.设对照组、左旋芳樟醇组和两个复方精油组，其中，将各精油组分为两个浓度组，共7组.取两条闻香试纸条蘸取适量待试精油，对照组蘸取聚乙二醇-200，放进透明玻璃箱(25 cm×50 cm)中5 min，待香气在箱中均匀扩散开来，将小鼠放入箱中嗅闻30 min.嗅闻结束后，将小鼠移入自发活动视频分析装置中，适应3 min后记录小鼠接下来5 min的自主活动情况.通过记录小鼠在5 min内的站立次数、休息时间、活动时间、活跃度、中间区域时间、中央区域路程和总路程来分析小鼠的自主活动情况[11-12].

1.2.3精油对阈上剂量戊巴比妥钠致小鼠睡眠潜伏期和睡眠时间影响的试验取小鼠70只(雌雄各半)随机分为7组，每组10只，嗅闻部分操作与“1.2.2”的步骤相同.各精油组小鼠嗅闻30min后和对照组小鼠腹腔均注射阈上剂量的戊巴比妥钠，给药后小鼠翻正反射消失达1 min者，表明已进入睡眠.以注射戊巴比妥钠至小鼠翻正反射消失之间的时间为睡眠潜伏期，以小鼠翻正反射消失至翻正反射恢复之间的时间为睡眠时间.记录各组小鼠注射戊巴比妥钠的时刻、翻正反射消失的时刻和翻正反射恢复的时刻，计算睡眠潜伏期和睡眠时间[10,13].

1.2.4精油对阈下剂量戊巴比妥钠致小鼠睡眠只数影响的试验取小鼠70只(雌雄各半)随机分为7组，每组10只，嗅闻部分操作与“1.2.2”的步骤相同.各精油组小鼠嗅闻30 min后和对照组小鼠腹腔注射阈下剂量的戊巴比妥钠，以30 min内小鼠翻正反射消失达1 min以上者为睡眠指标，记录各组小鼠30 min内的睡眠只数，计算各组小鼠的睡眠率[10,13].

1.2.5数据处理试验数据以平均值±标准差表示；数据采用SPSS 17.0统计软件处理，组间比较、计量资料采用t检验，计数资料采用Fisher精确概率法分析.

2结果与分析

2.1戊巴比妥钠的阈上剂量和阈下剂量

本试验测得的戊巴比妥钠阈上剂量为45 mg·kg-1，阈下剂量为23 mg·kg-1.

2.2精油对小鼠自主活动的影响

精油对小鼠自主活动的影响见表1、2.

表1　浓度为10-3的精油对小鼠自主活动的影响1)

1)n=10；与对照组相比，**表示差异极显著(P<0.01)，*表示差异显著(P<0.05).

表2　浓度为10-2的精油对小鼠自主活动的影响1)

1)n=10；与对照组相比，**表示差异极显著(P<0.01)，*表示差异显著(P<0.05).

由表1可见：在10-3浓度作用下，左旋芳樟醇组、1和2号复方精油组小鼠的总路程与对照组的差异极显著(P<0.01)，站立次数、休息时间和活动时间与对照组的差异显著(P<0.05)；2号复方精油组的中央区域时间和中央区域路程与对照组的差异极显著(P<0.01)，而左旋芳樟醇组与对照组的差异显著(P<0.05)，1号复方精油组仅在中央区域路程与对照组的差异显著(P<0.05).可见在10-3浓度作用下，2号复方精油的效果优于左旋芳樟醇和1号复方精油.

由表2可见，在10-2浓度作用下，左旋芳樟醇、1和2号复方精油组只有总路程与对照组的差异极显著(P<0.01)，2号复方精油组的站立次数、休息时间、活动时间、活跃度、中央区域时间和中央区域路程与对照组的差异显著(P<0.05)，而左旋芳樟醇组和1号复方精油组仅有部分指标与对照组的差异显著(P<0.05).可见在10-2浓度作用下，2号复方精油的效果优于左旋芳樟醇和1号复方精油.

表1和2表明，3种精油在10-3和10-2两个浓度之间的效果没有表现出明显的差异.

2.3精油对阈上剂量戊巴比妥钠致小鼠睡眠潜伏期和睡眠时间的影响

由表3可见：与对照组相比，10-3、10-2左旋芳樟醇均使阈上剂量戊巴比妥钠致小鼠睡眠潜伏期显著缩短(P<0.05)；1号复方精油没有缩短睡眠潜伏期；10-3、10-22号复方精油分别极显著(P<0.01)和显著(P<0.05)缩短睡眠潜伏期，从(18.47±2.04) s缩短至(14.13±1.73) s.

由表3还可见，与对照组相比，10-3、10-2两个浓度的左旋芳樟醇、1和2号复方精油均可延长阈上剂量戊巴比妥钠致小鼠睡眠时间.其中，10-32号复方精油组小鼠睡眠时间与照组的差异极显著(P<0.01)，从(27.01±5.84) s延长到(40.41±8.36) s；其余组与对照组的差异显著(P<0.05).综合评价睡眠潜伏期和睡眠时间两个因素，以10-32号复方精油的效果最佳.

表3　精油对戊巴比妥钠致小鼠睡眠潜伏期和睡眠时间的影响1)

1)n=10；与对照组相比，**表示差异极显著(P<0.01)，*表示差异显著(P<0.05).

2.4精油对阈下剂量戊巴比妥钠致小鼠睡眠只数的影响

由表4可见：与对照组相比，10-3、10-2左旋芳樟醇均可显著增加阈下剂量戊巴比妥钠致小鼠睡眠只数(P<0.05)；10-31号复方精油可显著增加睡眠只数(P<0.05)，10-21号复方精油没有显著增加小鼠睡眠只数；10-3、10-22号复方精油分别极显著(P<0.01)和显著(P<0.05)增加睡眠只数，对照组睡眠小鼠仅1只，而10-32 号复方精油组达7只.可见，2号复方精油的效果明显优于左旋芳樟醇和1号复方精油.

表4　精油对阈下剂量戊巴比妥钠致小鼠睡眠只数的影响1)

1)与对照组相比，**表示差异极显著(P<0.01)，*表示差异显著(P<0.05).

3讨论与结论

本试验结果表明：10-3、10-2左旋芳樟醇均可明显减少小鼠自主活动，减少阈上剂量戊巴比妥钠致小鼠睡眠潜伏期，延长阈上剂量戊巴比妥钠致小鼠睡眠时间，显著增加阈下剂量戊巴比妥钠致小鼠睡眠只数；以左旋芳樟醇为主要原料配制的1号复方精油在一定程度上也明显减少小鼠自主活动，延长小鼠睡眠时间，缩短睡眠潜伏期，增加睡眠只数，但是效果不及左旋芳樟醇；2号复方精油的效果明显优于1号复方精油和左旋芳樟醇.对比10-3、10-2两个浓度显示，在同一种精油作用下，10-3浓度的效果均优于10-2.

一般情况下，精油的疗效主要由含量最丰的香气成分决定，其他成分如果疗效与主成分相似，则增强该疗效；若次要成分与主成分的疗效相左，其疗效有时会互相抵消.气味相近、植物科属相似或是挥发速度差不多的精油，均可以互相搭配形成复方精油；相邻或同一类精油彼此调和会有较佳的效果和香气.左旋芳樟醇主要有安眠、镇静和安神等作用，气味属木香型；薰衣草精油的主要成分有乙酸左旋芳樟酯、左旋芳樟醇、薰衣草醇和乙酸薰衣草酯，气味属花草香型，有催眠镇静[4]、抗氧化[14-15]、降血压[16]和解痉等作用；依兰依兰油主要成分有左旋芳樟醇、对甲酚甲醚、石竹烯、大根香叶烯和苯甲酸甲酯，气味属花香型，具有镇定安抚、降血压和杀菌等作用，对疲劳产生的食欲不振、神经性失眠和高血压等有帮助[2]；柏木油主要成分有柏木烯和柏木脑，气味属草木香型，可舒缓愤怒情绪、抑郁情绪[2].本试验所选精油的主要成分均有安眠、镇静、安神之功效，而且气味相近、植物科属相似.

参考文献

[1] 崔桂梅,陈宝田.加味酸枣仁颗粒镇静催眠作用实验研究[J].临床心身疾病杂志,2007,13(4):295-296.

[2] 林翔云.调香术[M].2版.北京:化学工业出版社,2008:159-160.

[3] LINCK V M, SILVA A L, FIGUEIRO M, et al. Inhaled linalool-induced sedation in mice [J]. Phyto Medicine, 2009,16(4):303-307.

[4] UMEZU T, NAGANO K, ITO H, et al. Antieonflict effects of lavender oil and identification of its active constituents [J]. Pharrnacol Biochem Behav, 2006,85(4):713-721.

[5] 王善懿.一种复方香精油的镇静催眠功效及应用研究[D].上海:上海交通大学,2010.

[6] SUGAWARA Y, HARA C, TAMURA K, et al. Sedative effect on humans of inhalation of essential oil of linalool: Sensory evaluation and physiological measurements using optically active linalools [J]. Anal Chim Acta, 1998,365(1/3):293-299.

[7] 刘静,徐江涛.芳香疗法镇静催眠作用的研究进展[J].医学综述,2012,18(5):756-758.

[8] 翟秀丽,俞益武,吴媛媛,等.芳香疗法研究进展[J].香精香料化妆品,2011(6):45-50.

[9] 杨海清,李忠海,付湘晋,等.以左旋芳樟醇为主要原料配制复方精油的研究[J].中南林业科技大学学报,2013,33(3):112-114,118.

[10] 陈奇.中药药理研究方法学[M].2版.北京:人民卫生出版社,2006:805.

[11] 买文丽,王琼,刘新民,等.小鼠自主活动实验中的评价指标[J].中国实验动物学报,2008,16(3):173-175.

[12] WITT R, GALLIGAN M, DESPINOY J, et al. Olfactory behavioral testing in the adult mouse [J]. Journal of Visualized Experiments, 2009,23:949.

[13] 赵江丽,吴向阳,仰榴青,等.夏枯草镇静与催眠作用的初步研究[J].时珍国医国药,2009,20(2):443-444.

[14] PAREJO I, VILADOMAT F, BASTIDA J, et al. Comparison between the radical scavenging activity and antioxidant activity of six distilled and nondistilled Mediterranean herbs and aromatic plants [J]. Journal Agric Food Chem, 2002,50:6882-6890.

[15] GULCIN I, SAT I G, BEYDEMIR S, et al. Comparison of antioxidant activity of clove buds and lavender [J]. Food Chem, 2004,87(3):393-400.

[16] SHEN J, NIIJIMA A, TANIDA M, et al. Olfactory stimulation with scent of lavender oil affects autonomic nerves, lipolysis and appetite in rats [J]. Neurosci Lett, 2005,383(1-2):188-193.

(责任编辑:施晓棠)

Hypnotic and sedative effect of L-linalool and two kinds of blended essential oil

LI Yinghong, LI Zhonghai, FU Xiangjin, ZHANG Hui, YANG Haiqing

(College of Food Science and Engineering, Central South University of Forestry and Technology, Changsha, Hunan 410004, China)

Abstract:This paper studied the hypnotic and sedative effect of three kinds of aromatic essential oil, L-linalool and two kinds of blended oil which contained L-linalool (No.1 essential oil, L-linalool∶lavender essential oil∶Yilang Yilang oil∶cedar oil=1∶2∶4∶3; No.2 essential oil, L-linalool∶lavender essential oil∶Yilang Yilang oil∶cedar oil=5∶3∶1∶1). Spontaneous locomotor activity, sleep latency and time were monitored with sleeping induced by pentobarbital sodium. Spontaneous locomotor activity results showed that all the five treated groups walked significantly shorter distance than that of CK group (P<0.01). All the five groups varied from the CK group in the frequency of standing, resting duration, active time and central region distance (P<0.05). No. 2 blended oil in the concentration of 10(-3) led to the largest number of sleepy mice compared with other groups including CK group (P<0.01). Mice treated with No. 2 blended oil in the concentration of 10(-3) had the shortest sleep latency and longest sleep duration (P<0.01). In conclusion, L-linalool and two kinds of blended oil containing L-linalool performed notable hypnotic and sedative function, with No.2 blended oil presenting the best efficacy.

Key words:L-linalool; essential oil; hypnosis; sedation

DOI:10.13323/j.cnki.j.fafu(nat.sci.).2016.01.011

中图分类号:R965.1

文献标识码:A

文章编号:1671-5470(2016)01-0065-05

作者简介:李应洪(1968-)，男，副教授，博士研究生.研究方向：林产品深加工.Email:yhlee_daniel@163.com.通讯作者付湘晋(1980-)，男，副教授，博士.研究方向：食品科学.Email：drxjfu@163.com.

基金项目:林业公益性行业科研专项经费项目(201104044).

收稿日期：2015-01-05修回日期：2015-07-10