慢加急性肝衰竭患者IL-6、IL-10、TNF-α水平变化与肝性脑病的关系

炉 军，何金秋

(南昌市第九医院重症监护室，南昌 330002)

慢加急性肝衰竭患者IL-6、IL-10、TNF-α水平变化与肝性脑病的关系

炉 军，何金秋

(南昌市第九医院重症监护室，南昌 330002)

目的 探讨慢加急性肝衰竭(ACLF)患者血清IL-6、IL-10、TNF-α水平与肝性脑病(HE)的相关性。方法 选择2014年2月以后收治的ACLF患者35例(ACLF组)，选择同期收治的ACLF并HE患者40例(ACLF+HE组)，均填写临床病例观察表，留取外周血标本。采用酶联免疫吸附法检测2组患者血清IL-6、IL-10、TNF-α及临床生化指标。结果 ACLF+HE组IL-6、TNF-α、血氨水平均高于ACLF组(P<0.05),而2组IL-10水平差异无统计学意义(P>0.05)。ACLF+HE组IL-6、TNF-α均与血氨呈正相关(r=0.635，P<0.01；r=0.462，P<0.05)，IL-10水平与血氨无相关性(r=-0.357，P>0.05)；ACLF组IL-6、IL-10、TNF-α水平与血氨均无相关性(r=0.281，P=0.102；r=-0.154，P=0.342；r=-0.16，P=0.35)。2组终末期肝病模型(MELD)评分差异无统计学意义(P>0.05)，2组IL-6、IL-10、TNF-α水平与MELD评分均呈正相关(ACLF组：r=0.322，P<0.01；r=0.300，P<0.01；r=0.45，P<0.01；ACLF+HE组：r=0.373，P<0.05；r=0.412，P<0.01；r=0.437，P<0.01)。结论IL-6、TNF-α水平可作为慢加急性肝衰竭患者肝性脑病发生的预警因子，IL-6、IL-10、TNF-α水平对慢加急性肝衰竭预后评估有重要意义。

肝功能衰竭； 肝性脑病； 白介素-6； 白介素-10； 肿瘤坏死因子-α； 相关性

慢加急性肝衰竭(ACLF)的发生由多种因素引起，主要表现为严重肝脏损害，包括肝脏病理解剖结构破坏、肝功能衰竭，以致肝脏的合成、解毒、排泄及生物转化等功能发生严重障碍，临床上表现为凝血机制障碍和黄疸、肝性脑病(HE)、腹水等一组临床征侯群[1-2]。我国是ACLF的高发区，主要由乙型肝炎病毒感染引起，其病情重、并发症多、预后差、病死率高[3-4]。其发病机制较复杂，有多种因素共同参与，免疫应答失调、细胞因子表达紊在肝脏损害中起着重要作用。HE是ACLF的常见死亡原因之一，是由严重肝脏功能障碍或失调为基础，以代谢紊乱、精神、神经症状为主要特征的临床综合征[5]。HE的发病机制主要有氨中毒假说、氨基酸比例失衡假说、假神经递质假说等，其中以氨中毒假说研究最为广泛。IL-6、IL-10、TNF-α在肝衰竭发病机制中发挥重要作用，然而这些细胞因子在HE的发生、发展中所起作用尚未明确[6-7]。本文通过研究ACLF患者IL-6、IL-10、TNF-α水平的变化以及其与血氨的关系，探讨这些指标与ACLF患者HE的相关性。

1 对象与方法

1.1 对象

选择南昌市第九医院2014年2月至2016年6月收治的ACLF患者35例(ACLF组，男24例，女11例，年龄25～48岁)，另择同期收治的ACLF并HE患者40例(ACLF+HE组，男26例，女14例，年龄23～47岁)，均于入院时填写临床病例观察表，留取外周血标本。临床资料表包括一般体检项目检查、血型、尿、便常规检查，心、肾功能检查，生化指标及影像学检查等。2组患者在性别、年龄及基础疾病等比较差异均无统计学意义(P>0.05)。

1.2 诊断依据

慢加急性肝衰竭诊断参照2012年版肝衰竭诊治指南；肝性脑病诊断根据中华肝脏病杂志2004年《肝性脑病的定义、命名和诊断》标准，符合症状性HE。终末期肝病模型(MELD)公式(分)：R=3.8 ln(血清总胆红素，TBIL)(mg·dL-1)+11.2 ln(国际标准化比值，INR)+9.6 ln(血清肌酐，CRE)(mg·dL-1)+6.4(病因：胆汁性或酒精性肝硬化0分，其他1分)。

1.3 入组及剔除标准

入组标准：符合上述诊断标准，年龄18～65岁，性别不限。

剔除标准：既往有酗酒史，酒精性、自身免疫性、先天性因素引起肝损害，继发细菌、真菌感染者，合并精神疾病、智力障碍，肝脏以外其他各器官系统严重的器质性和功能性病变的患者；妊娠妇女。

1.4 检测方法、仪器、试剂盒

研究对象均于清晨空腹采肘静脉血5 mL，使用不含热原和内毒素的试管，予EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后及时分离上清，放置于-80 ℃低温冰箱内冷冻保存。采用酶联免疫吸附法集中检测IL-6、IL-10、TNF-α。仪器：全自动多功能酶标仪、半自动洗板机、37 ℃恒温箱等。 试剂盒由公司提供深圳晶美生物工程有限公司。

1.5 临床指标检测

谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、TBIL、白蛋白(ALB)、胆碱酯酶(CHE)、CRE、INR、凝血酶原活动度(PTA)、降钙素原(PCT)，C-反应蛋白、血常规、腹水常规检测在本院检验科进行。

1.6 统计学方法

采用SPSS 20.0软件进行分析，计量资料以均数±标准差表示，相关性检验采用Pearson相关分析。P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 2组患者血清IL-6、IL-10、TNF-α与血氨水平的关系

ACLF+HE组IL-6、TNF-α、血氨水平均高于ACLF组(P<0.05) ,2组IL-10水平差异无统计学意义(P>0.05)，见表1。ACLF+HE组IL-6、TNF-α均与血氨呈正相关(r=0.635，P<0.01；r=0.462，P<0.05)，IL-10水平与血氨无相关性(r=-0.357，P>0.05)；ACLF组IL-6、IL-10、TNF-α水平与血氨均无相关性(r=0.281，P=0.102；r=-0.154，P=0.342；r=-0.16，P=0.35)。

组别nIL-6ρ/(pg·mL-1)IL-10ρ/(pg·mL-1)TNF-αρ/(ng·L-1)血氨c/(mmol·L-1)ACLF组3515.57±2.618.76±2.2310.31±3.4133.30±13.23ACLF+HE组4024.37±6.308.14±2.1112.56±3.4076.82±33.27t6.110.980.269.27P<0.05>0.05<0.05<0.05

2.2 2组血清IL-6、IL-10、TNF-α水平与MELD评分的关系

2组MELD评分差异无统计学意义(P>0.05)，见表2。相关性分析：2组IL-6、IL-10、TNF-α水平与MELD评分均呈正相关(ACLF组：r=0.322，P<0.01；r=0.300，P<0.01；r=0.45，P<0.01；ACLF+HE组：r=0.373，P<0.05；r=0.412，P<0.01；r=0.437，P<0.01)。

组别nIL-6ρ/(pg·mL-1)IL-10ρ/(pg·mL-1)TNF-αρ/(ng·L-1)MELD评分/分ACLF组3515.57±2.618.76±2.2310.31±3.4123.63±3.23ACLF+HE组4024.37±6.308.14±2.1112.56±3.4024.08±2.40t6.110.980.26-0.696P<0.05>0.05<0.05>0.05

3 讨论

ACLF发病机制复杂，有多种因素共同参与，目前对其认识非常有限,解释也不够完善[8]。IL-6、IL-10、TNF-α等促炎及抗炎细胞因子向上、向下调节细胞免疫在肝衰竭的免疫损伤中起着重要作用[9-10]。很多学者对HE的发病机制进行了研究，但仍未完全阐明其的发病机制，有许多问题有待进一步研究[11]，且未建立阻止HE出现及恶化的有效方法。有研究[9]发现某些促炎细胞因子(如IL-6、TNF-α)及抗炎因子(如IL-10)在肝硬化患者HE的发生和发展中发挥重要作用。

本研究结果显示ACLF+HE组患者血清IL-6、血氨水平明显高于ACLF组，ACLF组患者IL-6水平与血氨无明显相关性，而ACLF+HE组IL-6与血氨呈明显正相关，证实IL-6与肝性脑病存在密切关系。IL-6主要由活化的单核、巨噬细胞产生，也可以由Th2细胞产生。IL-6具有防御、调节免疫应答、急性期反应等多种活性，其表达失调可引起许多疾病，主要表现为发病时IL-6水平增高。肝损害发生时，IL-6多有升高[12]，导致自身免疫反应，增强自然杀伤细胞的吞噬功能，从而介导肝细胞损伤。有研究显示IL-6与肝细胞的坏死程度密切相关[8]。IL-6水平高加重肝脏损害，使肝脏功能进一步恶化，氨的代谢减少，血氨堆积，导致HK的发生；邰炜彦等[13]研究发现，脑脊液中IL-6的水平升高，会使基质金属蛋白酶-1表达增高，破坏血脑屏障，使其通透性增加，这也可能是IL-6引起HE的另一重要方式。

IL-10主要由TH2细胞产生，活化的B细胞、单核-巨噬细胞、kuffer细胞也可产生，曾被称为细胞因子合成抑制因子，在体内最重要的来源主要是单核巨噬细胞和T辅助细胞。它的产生主要取决于特定的刺激及受损组织类型。IL-10的生物活性主要是参与抑制细胞合成，起负反馈调节作用，能抑制IL-6、TNF-α等的合成表达，对肝细胞损伤的免疫反应起抑制作用。然而，本研究2组患者血清IL-10水平无显著差异，相关性分析与血氨无明显相关性，说明HE与IL-10水平变化无直接关系。

TNF-α来源十分广泛，主要由活化的单核-吞噬细胞产生，活化的T细胞、自然杀伤细胞也可产生。它的生物学特性是介导炎症反应，促进肝细胞合成急性期蛋白，介导肝脏炎症反应，增强免疫损伤，加重肝细胞损伤。本研究结果显示，ACLF+HE组患者血清TNF-α水平明显高于ACLF组，且ACLF组患者TNF-α水平与血氨无相关性，而ACLF+HE组TNF-α水平与血氨呈正相关，表明TNF-α与ACLF患者HE的发生有着某种必然的联系。有研究[14]显示慢性肝衰竭患者血清TNF-α与HE的发生密切相关。TNF-α不仅存在于肝脏，同样存在于中枢神经系统，可能干扰中枢神经细胞血氨代谢，大脑尤其是脑干血氨水平发生变化，引起脑病；此外，TNF-α可能直接损伤血脑屏障，使神经毒素通过血脑屏障产生神经毒性，导致脑功能异常[15]。

本研究中2组MELD评分比较差异无统计学意义，说明HE与ACLF病情程度及预后无明显关系，这似乎与临床不一致。究其原因，MELD评分是基于TBIL、PTA、CRE指标及病因得出的，没有涵盖HE的因素。另外，IL-6、IL-10、TNF-α水平与MELD评分呈正相关，提示IL-6、IL-10、TNF-α水平与ACLF病情程度有密切关系。

综上所述，IL-6、TNF-α水平与ACLF患者HE密切相关。IL-6、TNF-α通过对肝细胞免疫损伤，加重肝功能恶化，导致HE的发生，同样也直接损伤血脑屏障或改变血脑屏障通透性，使神经毒素或假神经递质浓度增加引起脑病；IL-6、TNF-α水平可作为ACLF患者发生HE的预警因子,而IL-10则与ACLF患者HE无明显关系。此外，IL-6、IL-10、TNF-α水平对ACLF的预后评估有重要意义。

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(责任编辑：罗芳)

2016-05-17

R575.3

A

1009-8194(2016)10-0016-03

10.13764/j.cnki.lcsy.2016.10.006