基于WS/T 405-2012行标的血细胞分析参考区间验证

魏红璐，王　萍

(重庆市第五人民医院检验科，重庆 400062)



·论著·

基于WS/T 405-2012行标的血细胞分析参考区间验证

魏红璐，王萍△

(重庆市第五人民医院检验科，重庆 400062)

摘要:目的探讨《WS/T 405-2012 血细胞分析参考区间》(简称WS/T 405-2012)是否适用于该实验室所在区域人群及实验室检测系统。方法根据《WS/T 402-2012临床实验室检验项目参考区间的制定》(简称WS/T 402-2012)与WS/T 405-2012文件要求，选择健康参考个体40例(男、女各20例)，采用性能评价符合要求的Sysmex XN-1000全自动血液分析仪检测血液标本，对WS/T 405-2012中血细胞分析项目的参考区间进行验证。结果参与验证的血细胞分析项目测定结果均符合WS/T 402-2012要求。结论WS/T 405-2012规定的血细胞分析参考区间可用于该实验室。

关键词:血细胞分析；参考区间；验证

本室血细胞分析项目的参考区间一直沿用《全国临床检验操作规程》(第3版)上的参考范围或采用试剂、仪器厂家提供的参考区间，而上述范围均不是建立在本地区人群基础上的参考区间。由于年龄、性别、居住环境、民族、饮食习惯的差异，以及检验方法的不同，同一检测项目使用不同的检测系统或不同来源的试剂都会使检测结果不一致。目前，大多数医院并未对所使用的参考区间进行验证，而进行了参考区间验证的实验室多参照美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)相关文件要求。原卫计委选取东北、华北、西北、华东、华南和西南6地城乡居民，建立我国居民血常规项目的参考区间，并采用《WS/T 402-2012临床实验室检验项目参考区间的制定》(简称WS/T 402-2012)行标[1]对参考区间的验证方法进行标准化。为了确保原卫计委规定的参考区间适用于本实验室，本研究按照行标要求对血细胞分析参考区间进行验证，现报道如下。

1材料与方法

1.1标本来源2013年7月12～15日于本院进行健康体检并取得知情同意者，向其发放健康调查表，根据WS/T 402-2012标准[1]筛选出符合以下条件的人群：(1)年龄、性别等信息全面；(2)近期无就医治疗或住院史，未接受手术，未服药，未输血；(3)无出血史(包括牙龈出血、血尿等)；(4)无以下各种疾病如消化系统疾病(肝硬化、肝炎、消化性溃疡、慢性腹泻、炎性肠炎等)、慢性感染(结核、梅毒等)、肾病、风湿性疾病、代谢和营养相关疾病(糖尿病)、甲状腺疾病、血液系统疾病(白血病、贫血)、肿瘤、高血压等；(5)无特殊饮食；(6)无消瘦、营养不良；(7)定期运动；(8)无吸烟、饮酒嗜好；(9)女性未处于妊娠、月经及哺乳期，并且记录采血情况，要求采血顺利，血液标本采集后在2 h内检测完毕。

1.2仪器与试剂日本Sysmex XN-1000全自动血液分析仪(简称XN-1000)及原装进口配套试剂，质控品由四川新成生物科技有限责任公司提供，乙二胺四乙酸二钾(EDTA-K2)抗凝静脉真空采血管。

1.3方法

1.3.1实验前仪器准备对XN-1000进行校准，性能验证后各项参数均达标，最近一次室间质评结果合格，实验当天室内质控结果良好。

1.3.2参考人群数量和年龄分布根据《WS/T 405-2012 血细胞分析参考区间》(简称WS/T 405-2012)标准[2]给出的参考区间进行验证。男女使用相同参考区间的项目选取男、女受试者各10例，年龄23～74岁；男女使用不同参考区间的项目，选取男、女各20例，男性年龄24～77岁，女性年龄22～74岁。

1.3.3观察项目白细胞(WBC)计数、红细胞(RBC)计数、血红蛋白(Hb)、血细胞比容(Hct)、血小板(PLT)计数、中性粒细胞(N)绝对值与百分比、淋巴细胞(L)绝对值与百分比、嗜酸性粒细胞(E)绝对值与百分比、嗜碱性粒细胞(B)绝对值与百分比、单核细胞(M)绝对值与百分比、平均红细胞体积(MCV)、平均红细胞血红蛋白含量(MCH)、平均红细胞血红蛋白浓度(MCHC)。

1.4统计学处理首先对验证数据进行离群值判断，按照Dixon方法剔除各组离群值；如剔除离群值后样本量不足，需补足，补足后再进行离群值判断，直到满足要求。然后将数据与需验证参考区间进行比较，若落在参考限外的测定值不超过2个，则该参考区间可以使用；若超过2个测定值在参考限外，则重新收集标本进行上述验证过程。方法学统计使用Excel2003软件。

2结果

2.1XN-1000的性能评价该仪器WBC、RBC、Hb、Hct、PLT的不精密度、携带污染率及线性范围均符合仪器厂家标准。见表1。

表1　　XN-1000的性能评价

2.2各血细胞分析项目验证结果各项血细胞分析项目测定值超出参考区间的个数均未超过2，其中WBC计数、N绝对值、E绝对值、N百分比、L百分比、E百分比、B百分比、M百分比、PLT计数、MCV、MCH、MCHC、女性RBC计数、男女Hb及女性Hct均无超出参考区间的测定值，L绝对值、B绝对值、M绝对值、男性RBC计数超出参考区间的测定值个数均为1，男性Hct超出参考区间的测定值个数为2。各血细胞分析项目的新标准参考区间均可用于本实验室。各项指标受试者检测结果，见表2～4(见《国际检验医学杂志》网站主页“论文附件”)；各血细胞分析项目参考区间验证结果，见表5。

表5　　各血细胞分析项目参考区间验证结果

续表5　　各血细胞分析项目参考区间验证结果

3讨论

本次参考区间验证选取的参考人群年龄范围为20～80岁，每10岁选取两个健康体检者纳入验证人群，结果显示原卫计委发布的血细胞分析项目参考区间能够用于本实验室。但是，由于RBC计数和Hb的参考区间与之前的标准已不同，因此在临床应用上如输血指标、贫血程度判断指标等是否需要修改还需要进一步的探讨。此外，特殊人群如孕妇、各年龄段儿童的参考区间也需要进一步制订。

在本次参考区间验证过程中，笔者开始发现本实验室男性MCHC参考区间无法通过验证，但是RBC计数、Hb、Hct、MCV、MCH等RBC相关项目的参考区间都能通过验证。因此，笔者将男性MCHC的均值与原卫计委给定参考区间的中位数进行比较，发现男性MCHC的均值远高于参考区间中位数，由于选取参考人群样本量较小(20例)，于是笔者回顾了实验室近一个月参与体检的男性MCHC测定值，发现超过20%的男性MCHC值在参考区间的上限。而本次参考区间验证前已对用于参考区间验证的仪器进行了校准及性能评价，且在性能评价符合要求后进行参考区间验证试验，因此笔者认为仪器性能符合要求，考虑是仪器校准问题。由于MCHC是计算值，Hb与RBC共同影响下可导致MCHC测定值较大的偏差，于是对仪器进行重新调试，纠正了仪器出厂后一般不需要修改的参数值，经调试校准后再重新进行参考区间验证，结果MCHC参考区间通过验证。通过本次参考区间的验证，发现并解决了本实验室在平时标本检测中发现MCHC结果偏高的问题，在仪器处于正常状态和标本采集方法正确的情况下，本地区人群的PLT参考区间也能顺利通过验证，说明判断本地区PLT普遍偏低的现象是有误的。本次验证试验表明，在做参考区间验证试验的过程中若发现参考区间不合适，并不要盲目地认为此参考区间不适用于本实验室或者不采取措施马上重新收集参考人群标本进行重新验证，应该检查仪器的校准记录与性能评价结果，查看是否是因为准确度的偏移或者仪器本身原因导致参考区间验证无法通过，再重新收集标本进行验证。

生物参考区间是医生判断患者正常和出现异常的参考标准，建立合适的参考区间对临床判断机体健康与否具有重要意义。但是，按照国际临床化学协会提出的建立实验室生物参考区间的方法建立各实验室的参考区间又存在客观难度[3]，每个实验室的每个检测项目及不同检测系统分别建立参考区间并不现实，根据NCCLS C28-A2文件[4]及WS/T 402/2012文件[1]的要求进行实验室参考区间验证，更加方便实验室项目的开展。虽然原卫计委针对我国人群建立了各检测项目相应的参考区间，形成WS/T 405/2012标准[2]，但是由于各地气候、海拔、民族、饮食存在差异，加上各实验室使用仪器厂家不同，在此种情况下，实验室也有必要对标准中的参考区间进行验证，以判断该参考区间是否能够用于本地区人群。

参考文献

[1]中华人民共和国卫生部．WS/T 402-2012临床实验室检验项目参考区间的制定[M]．北京：中国标准出版社，2012．

[2]中华人民共和国卫生部．WS/T 405-2012 血细胞分析参考区间[M]．北京：中国标准出版社，2012．

[3]Solberg HE，Stamm D．IFCC recommendation:the theory of reference values.Part 4.Control of analytical variation in the production,transfer and application of reference values[J]．J Automat Chem，1991，13(5)：231-234．

[4]National Committee for Clinical Laboratory standards．C28-A2 How to define and determine reference intervals in the clinical laboratory[S]．Wayne，PA，USA：NCCLS，2000．

Validation for reference intervals of blood cell analysis based on WS/T 405-2012

WeiHonglu，WangPing△

(DeparementofClinicalLaboratory,theFifthPeople′sHospitalofChongqingCity,Chongqing400062,China)

Abstract:ObjectiveTo explore whether or not the WS/T 405-2012 reference intervals for blood cell analysis(WS/T 405-2012) was suitable for population in this area and testing systems in this laboratory.MethodsAccording to the requirements of documents WS/T 402-2012 define and determine the reference intervals in clinical laboratory(WS/T 402-2012 ) and WS/T 405-2012,40 cases of healthy individuals,including 20 male cases and 20 female cases,were selected.The blood samples were detected by using the Sysmex XN-1000 automatic blood cell analyzer which had met the requirements of performance assessment,then reference intervals of blood cell analysis from WS/T 405-2012 were verified.ResultsThe detection results of all items of blood cell analysis involved in this validation met requirements of WS/T 402-2012.ConclusionThe reference intervals of blood cell analysis from WS/T 405-2012 could be applied for this laboratory.

Key words:blood cell analysis；reference interval；validation

(收稿日期：2015-12-11)

DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.05.017

文献标识码：A

文章编号：1673-4130(2016)05-0621-03

作者简介：魏红璐，女，检验技师，主要从事质量控制与标准化规范研究。△通讯作者，E-mail：437408052@qq.com。