灵芝不同部位分离菌种的栽培性状比较*

谢春芹，曹 正，凡军民

（江苏农林职业技术学院，江苏 句容 212400）

灵芝不同部位分离菌种的栽培性状比较*

谢春芹，曹 正**，凡军民

（江苏农林职业技术学院，江苏 句容 212400）

为了探索灵芝最优菌种的分离部位，对生产中的灵芝（Ganoderma lucidum）原基、子实体幼嫩边缘组织、菌管、栽培基质4个部位进行分离、纯化，并对所获得菌株进行栽培性状比较。结果表明，从栽培基质中分离纯化的菌种，其菌丝生活力强，子实体产量高，生物转化率分别比子实体幼嫩边缘组织分离菌种高1．08%、菌管分离菌种高0．41%、原基分离菌种高0．2%，是具有推广潜力的优良菌株。

灵芝；分离；菌种；生产性能

灵芝（Ganoderma lucidum Karst） 外形呈伞状，菌盖肾形、半圆形或近圆形，为多孔菌科（Polyporaceae）真菌，具有补气安神、止咳平喘的功效，用于治疗眩晕不眠、心悸气短、虚劳咳喘[1]。

食用菌菌种分离的方法有组织分离法、菇木（基质）分离法和孢子分离法3种。其中，组织分离法是生产中最常采用的，操作简便，且能保持原有菌种的优良品性[1-2]。本文通过灵芝组织分离法，对不同部位分离所得菌种的生产性能进行比较，旨在为广大灵芝生产者提供简便、有效的菌种保存、复壮的方法。

1 材料与方法

1.1 材料及来源

供试灵芝栽培菌袋由江苏食用菌研究所提供，品种为赤芝1号。

1.2 方法

1．2．1 分离菌袋的选择

从常规袋栽的灵芝中选取典型性状、无病虫害、菌丝纯白、无杂色、长势好的菌袋作为分离材料[3]，4个部位的菌种均从同一菌袋中分离获得。

1．2．2 菌种分离方法及培养条件

本次试验从灵芝4个部位分离菌种，其方法如表1。培养条件均为（20±1）℃；黑暗；空气相对湿度（RH）为60%～70%。

1.2.3 栽培出菇的方法

表1 灵芝菌种不同部位的分离方法Tab.1 Method of strains separate from different parts of Ganoderma lucidum

按常规菌种生产程序和方法[4-5]，制作再生母种、原种，并进行栽培出菇试验，通过出菇验证该方法分离的菌种即为赤芝1号。在相同条件下将4种方法分离培养的赤芝1号菌种进行栽培与出菇性状比较，其步骤如下：

（1）栽培配方

棉籽壳53%、木屑25%、玉米芯30%、石膏粉1%、石灰1%，料水比为1∶1.2[6]。

（2）拌料

按常规方法采用机器拌料，培养料含水量调到65%左右为宜。

（3）调节pH值

赤芝1号菌丝生长较适合的pH值为6.8～7.4，在装袋时，应将混合培养料的pH值调节至较适合菌株生长范围内。

（4）装袋

采用装袋机装袋，每袋湿料重0.85 kg左右，每种分离方法的菌种装60袋，记录每袋湿料的准确重量，并贴好标签。

（5）灭菌

料装好后，用高压蒸汽灭菌，压力1.4 kg·cm-2～1.5 kg·cm-2（温度为126℃左右），维持1.5 h。

（6）接种

将灭菌后的料袋放在超净工作台内，当温度降至30℃以下时进行接种，用接种镊子将栽培培养料中央的洞穴扩大，取2勺原种迅速放入栽培培养料料面和穴内。

（7）菌丝培养

将接种好的栽培袋移至培养室内，培养室的温度为20℃～22℃，空气相对温度为60%～70%，保持黑暗，第1周通风2次/日，8 min·次-1～10 min·次-1；2周后通风3次·d-1，10 min·次-1～15 min·次-1；经25 d～30 d培养菌丝即可长满栽培袋。

（8）出菇管理

将长满菌丝的栽培袋，拔掉塞子，用消毒过的镊子去掉料面的老菌皮，移至出菇室内，出菇室温度为28℃～32℃，空气相对温度为85～95%，给予一定的散射光，通风3次·d-1～4次·d-1，20 min·次-1～30 min·次-1。

2 结果与分析

2.1 相同PDA培养基上4种分离部位的菌丝生长情况

将菌管、基质、子实体边缘幼嫩组织、子实体原基分离纯化菌种的菌丝，接种到PDA平板培养基上，在相同条件下，比较4种分离部位的菌丝生长情况。通过定期测量、观察和统计，获得菌种菌丝萌发的时间、日生长速度、菌丝长势和菌丝生长中的污染情况，见表2。

表2 4种分离部位菌丝在PDA培养基上的生长情况Tab.2 Hyphae growth condition of four separate parts of Ganoderma lucidum in PDA medium

由表2可见，从基质中分离菌种的菌丝生长快且健壮，抗性强；而从原基分离所获得的菌丝生长则最慢，但抗性较强。

2.2 固体培养料内4种分离部位菌丝的生长情况

将4种分离部位菌种接种于相同的固体培养料中，在同等条件下培养，定期测量菌丝的生长速度。其菌丝生长情况见表3。

表3 4种分离部位菌种在固体培养料上菌丝生长情况Tab.3 Hyphae growth condition of four separate parts of Ganoderma lucidum on solid substrates

由表3可见，从基质中分离菌种的菌丝生长快且健壮，抗性强；从其他3个部位分离的菌丝在固体培养基中生长较慢，其中，从子实体幼嫩边缘分离的菌丝抗性较弱，易感染杂菌。

2.3 相同栽培条件下4种分离部位菌种的子实体生长情况

在相同的培养条件下，比较不同分离部位菌种的生长情况，结果见表4。

表4 相同栽培条件下4种分离部位菌种子实体生长情况Tab.4 Fruit body growth condition of four separate parts of Ganoderma lucidum under the same cultivation condition

由表4可见，栽培基质中分离的菌种，在菌丝生长、出菇性状上均优于其它3种分离部位所获的菌种。从栽培基质中分离到的菌种与子实体幼嫩边缘分离的菌种相比，除了前者的菌丝生长速度比后者更快以外，二者的生物转化率也存在差异，前者的生物转化率比后者高1.08%。

3 结论

3.1 从基质中分离菌种的菌丝生长较快

同一菌袋不同分离部位的菌种，在相同培养条件下，由基质中分离获得菌种的菌丝无论在PDA培养基上，还是栽培在固体培养基中，其生长速度均快于其他分离部位的菌种。

3.2 从基质中分离的菌种生活力强、产量高

通过栽培出菇试验可见，基质中分离的菌种无论是抗污染性，还是子实体产量均明显优于常用的其他3个分离部位的菌种。基质菌种栽培的子实体菌盖最大，但菌盖比较薄，在栽培过程中，适当降低室温（25℃～28℃），即可使菌盖加厚。

栽培出菇实验证实，基质中分离得到菌种的生物转化率最高，说明在相同培养条件下，基质中分离的菌种菌丝分解与利用培养基中营养的能力较强。

[1]耿向永，鲍隆友，陈芝兰，等.西藏野生灵芝菌种组织分离技术研究[J].中国食用菌，2009，28（4）：25-27.

[2]廉婷.食用菌菌种分离与保藏方法[J].现代农业科技，2012（7）：154-155.

[3]刘国民，李娟玲，周经阳.野生喜热灵芝菌种分离技术研究[J].热带生物学报，2011，2（3）：119-122.

[4]王庆武，兰玉菲，罗霞，等.泰山赤芝代料栽培配方筛选试验[J].山东农业科学，2013，45（11）：60-62.

[5]黄卓忠，韦仕岩，王灿琴，等.灵芝仿生态优质高效栽培技术[J].食用菌，2013（1）：44-45.

[6]陈友，胡佳娟，陈忠荫，等.海南野生灵芝培养基配方优化[J].琼州学院学报，2013，20（2）：33-35.

Comparison on the Yield of Isolated Strains from Different Parts of Ganoderma lucidum

XIE Chun-qin,CHAO Zheng,FAN Jun-ming
(Jiangsu Polytechnic College of Agriculture and Forestry,Jurong 212400,China)

To investigate the isolated parts with the best strains of Ganoderma lucidum,four parts of G.lucidum in production including the primordium,the young edge tissue of the fruiting body,the mushroom tube and the culture medium were isolated and purified in laboratory respectively,and the cultivation properties of the strains were compared．According to the results,the mycelium of the strain isolated and purified from the culture medium was with strong viability,high yield of the fruiting body, and its biotransformation rate was higher with 1．08%,0．41%,0．2%than purified strain of the young edge tissue of the fruiting body,mushroom tubeand primordium respectively．

Ganoderma lucidum;isolation;strain;yield

S646.9

A

1003-8310（2016）01-0028-03

10．13629/j．cnki．53-1054．2016．01．007

江苏省农业三新工程项目（SXGC[2014]75）。

谢春芹（1976-），女，硕士，副教授，主要从事食（药）用菌教学与研究。E-mail:xiechunqin＠163．com

**通信作者：曹正（1967-），男，硕士，副教授，主要从事畜禽饲料的加工开发教学与研究。E-mail:963243057＠qq．com

2015-09-19