鸡毒支原体感染的诊断及防制

田碧霞，徐雄真，邓华成

(1.贵州省思南县畜牧发展中心，贵州思南565100;2.贵州省思南县动物疫病预防控制中心，贵州思南565100)

鸡毒支原体感染的诊断及防制

田碧霞1，徐雄真2，邓华成2

(1.贵州省思南县畜牧发展中心，贵州思南565100;2.贵州省思南县动物疫病预防控制中心，贵州思南565100)

鸡毒支原体(Mycoplasma gallisepticum，MG)又称禽霉形体，主要引起鸡呼吸道症状为主的慢性呼吸道疾病(Chronic respiratory dis－ease，CRD)，近年来已成为严重危害养鸡业的重要传染病，给养鸡业带来严重的经济损失。现将鸡毒支原体感染的诊断方法和防制措施介绍如下。

1 病原特性

支原体是介于细菌和病毒之间的一种病原微生物，其特点是多形性，无细胞壁，为自我复制的最小原核生物，呈细小球杆状，长2.5～0.5 μm，革兰氏染色阴性，好氧或兼性厌氧。在液体培养基中培养5～7 d，可以分解葡萄糖产酸，使培养液变黄;在固体培养基上生长缓慢，培养3～5 d可形成微小的光滑而透明的露珠状菌落;在马鲜血琼脂培养基上能引起完全溶血，能凝集鸡和火鸡红细胞。在电子显微镜下形态不一，有些为圆形，有些呈丝状。危害鸡的支原体主要有鸡毒支原体(MG)和滑液囊支原体(MS)，而鸡毒支原体对鸡的危害最严重［1］。MG的细胞浆膜含有200多种多肽，其中与血凝特性有关的黏附素在感染发病和免疫应答中起关键作用，是重要的毒力因子和抗原［2］。

将MG接种于7日龄鸡胚卵黄囊中能生长繁殖，但只有部分鸡胚在接种后5～7 d死亡，鸡胚的病理变化为胚体发育不全，全身水肿，关节肿大，尿囊膜、卵黄囊出血。病原对环境抵抗力较差，对热比较敏感，但在低温条件下可长期存活。

2 流行情况及发病特点

2.1 流行情况鸡和火鸡对本病有易感性，4～8周龄的鸡和火鸡最易感，纯种鸡比杂种鸡更易感。病鸡和隐性感染鸡是本病的主要传染源。传播方式有水平传播和垂直传播，病原体可以通过病鸡咳嗽、喷嚏的飞沫和尘埃经呼吸道传染，被污染的饮水、饲料、用具也能传播本病，上呼吸道和眼结膜是气溶胶或小雾滴中的MG入侵的主要门户。垂直传播可构成代代相传，但种蛋传播率可变性较大，急性期最高可达50%，无临诊症状期仅为0.5%～5%;在感染的公鸡精液中也发现有病原体存在，因此配种时也能发生传染［3］。

2.2 发病特点本病在鸡群中传播较为缓慢，但在新发病的鸡群中传播较快，根据环境因素不同，病情严重程度差异很大，如饲养密度大、卫生条件差、气候变化、鸡舍通风不良、饲料中缺乏维生素以及不同日龄的鸡混养等均可加剧该病的严重性和传染性，并促进高死亡率。有多重病原微生物继发感染时，能使本病更加严重，其中主要有传染性喉气管炎、支气管炎、新城疫、嗜血杆菌以及大肠杆菌等。

3 临床症状

本病常呈慢性经过，不少病例几乎不表现为临床症状而不被发现。但幼龄鸡发病时临床症状较为典型，表现为浆液或浆液黏液性鼻液，使鼻孔堵塞妨碍呼吸，频频摇头、喷嚏、咳嗽，还见窦炎、结膜炎和气囊炎等症状。当炎症蔓延至下呼吸道时，喘气和咳嗽更为显著，并伴有呼吸道啰音，病鸡食欲不振、生长缓慢。后期由于鼻腔和眶下窦中蓄积渗出物而引起眼睑肿胀，有时可见蓄积物突出眼球外似“金鱼眼”，导致失眠。临床症状消失后，发育受到不同程度的抑制。产蛋鸡感染后导致产蛋率下降。

4 病理变化

主要表现在呼吸道，即呼吸道黏膜水肿、充血、肥厚;鼻道、气管、支气管和气囊内含有浑浊的粘稠渗出物;随着病程的发展，气囊壁变厚和浑浊，严重者有干酪样渗出物，眶下窦出现炎症;出现关节症状时，关节周围组织肿胀或水肿，关节液增多，开始时清亮而后混浊，最后呈奶油状稠度。

5 诊断

5.1 病料采集对本县辖区内鸡慢性呼吸道疾病进行流行病学调查，并无菌操作采集疑为鸡毒支原体感染发病或病死鸡的气囊、支气管、肺组织等样品，置于鸡毒支原体培养液中保存，送动物疫控中心实验室做鸡毒支原体的分离培养及鉴定。

5.2 培养与纯化将所采集病料用鸡毒支原体培养液清洗后，剪碎组织，按1∶10的比例加入支原体液体培养基，37℃恒温振荡培养直到培养基变成黄色。再将变黄的培养物在相同的培养基中连续传代3～5代后，取培养物0.2 mL接种于支原体固体培养基中，放进铺有湿纱布的密封烛缸中37℃恒温培养7～15 d后，显微镜下观察菌落形态。挑取典型单菌落于2 mL液体培养基中，进行传代培养和鉴定。

5.3 MG的鉴定

5.3.1 检验L型细菌:将上述分离纯化的菌株接种到不含青霉素和醋酸铊的FM－4液体培养基中连续传代5次，然后将培养物接种到固体培养上，观察菌落形态。肉眼观察可见针尖大小、无色透明、圆润、边缘光滑的菌落

5.3.2 菌落形态观察:将分离纯化后的待检培养液0.2 mL接种于固体培养基中，置于密封烛缸中37℃培养7～10 d后，低倍镜下观察菌落形态，可见菌落为无色透明，多数呈典型的“荷包蛋”状。

5.3.3 姬姆萨染色镜检:取分离纯化后的鸡毒支原体培养液5 mL，以3 000 r/min离心8 min，取沉淀物涂片，甲醇固定，用PBS液(pH=6.98)做10倍稀释的姬姆萨染色液染色40 min。镜检，可见菌体呈蓝紫色球状，也有少量呈细短杆状或弧形等形态。根据流行病学调查、临床症状和病理变化观察以及实验室检测，可诊断为鸡毒支原体感染。

6 防治措施

6.1 建立无支原体病的种鸡群鸡毒支原体感染虽然极为普遍，但是利用支原体对不利环境、药物和温度的脆弱性，可以培育无支原体感染的各代次健康种鸡群，杜绝MG经蛋传播给下一代。

6.2 加强饲养管理和环境控制商品鸡群的饲养密度要适宜，防止密度过大造成感染几率增加，寒冷季节或小日龄阶段要在确保温度符合要求的前提下，加强通风换气，降低舍内灰尘含量，避免呼吸道损伤。同时选择适宜消毒剂，做好带鸡消毒及环境和用具消毒工作。

6.3 药物治疗一些抗生素药物对本病有一定的治疗效果，但停药后往往会复发，因此考虑几种药物轮替使用效果较为明显。目前很多实践和实验证明，支原净、泰乐菌素、壮观霉素和红霉素对本病有较好的治疗和预防效果。

红霉素按100 mg/kg饮水，连续饮用3～5 d，拌料可用20～50 mg/kg;泰乐菌素按500～800 mg/kg饮水，拌料按照20～50 mg/kg，连用5 d;同时用壮观霉素30 mg/kg剂量进行肌注;支原净按每升水加入250 mg剂量进行饮水，连用5～7 d;中药治疗:柴胡、荆芥、半夏、茯苓、贝母、桔梗、杏仁、玄参、赤勺、厚朴、陈皮各30 g，细辛60 g，按每鸡每天每次1～1.5 g，拌料或煎汁饮水，连用5 d［4］

7 小结

加强饲养管理是防治鸡毒支原体病发生的关键性措施，尤其要解决好保温和通风的矛盾，在保持鸡舍适宜温度的同时，良好的通风是极为重要的。通过良好的通风措施来排出舍内水气、氨气、尘埃等，为鸡群提供充足的新鲜空气，促进鸡的新陈代谢，保持鸡体健康，提高饲料转化率。如果在管理上不能做到合理的通风和保暖的协调，支原体病的发生机率就会大大提高。一般情况支原体病单独发生不会引起死亡，但治疗不及时就会继发大肠杆菌等混合感染，当发生2种或2种以上疾病混合感染时，对鸡群就构成了很大的威胁，给生产带来严重损失。

［1］王建霞，李红.PCR技术在支原体检测中的应用［J］.中国比较医学杂志，2005，15(3):186－189.

［2］陈溥炎.家畜传染病学:第5版［M］.北京:中国农业出版社，2007.

［3］Calnek B K(著).高福，苏敬良(译).禽病学:第10版［M］.北京:中国农业出版社，1999.

［4］朱红英，郭卫红，潘国庆.中药治疗鸡支原体肺炎继发大肠杆菌病［J］.中兽医医药杂志，2010(2):58.

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