少精、无精症患者的染色体与性激素水平分析

赵亚梅 刘建刚

少精、无精症患者的染色体与性激素水平分析

赵亚梅 刘建刚

目的分析少精、无精症患者的染色体与性激素水平。方法59例少精症患者和22例无精症患者作为临床研究对象,并选取20例精子数量正常人作为对照组。分别对其染色体核型、Y染色体微缺失情况以及血清性激素情况进行测定。结果无精组与少精组患者的促卵泡素(FSH)与促黄体素(LH)均显著高于对照组,而无精组的FSH和LH又显著高于少精组,差异有统计学意义(P＜0.05)；无精组与少精组睾酮(T)水平显著低于对照组(P＜0.05)；无精组催乳素(PRL)显著高于少精组和对照组,而少精组和对照组PRL水平比较,差异无统计学意义(P＞0.05)；染色体检查 81例少精和无精症患者中,有22例出现染色体畸变,畸变率为27.2%。81例无精、少精症患者中,检测到6例(7.4%)Y染色体微缺失；而对照组被试中,未出现Y染色体微缺失。结论临床上应该对男性不育患者进行染色体核型分析、Y染色体微缺失和血清性激素测定,为后续的生殖治疗提供合理的治疗方案。

无精症；少精症；染色体；性激素

根据WHO数据显示,现时全球约有15%的夫妻受到不孕不育的困扰,其中男性因素所导致的约占50%。而其中有30%的男性不育是由于男性的遗传因素所导致。此外,研究还发现下丘脑-垂体-性腺轴系统对于那行性腺的生精和激素分泌都有重要的调节作用,而血清性激素的检测能显示该系统的功能。本研究对少精、无精症患者进行细胞遗传学检查以及内分泌检查,以探究染色体、Y染色体缺失和性激素水平与少精、无精症的关系。现报告如下。

1 资料与方法

1.1一般资料 选取2015年1～12月临床上确诊为少精症(精子数＜20×106/ml)患者59例和无精症患者22例作为临床研究对象,并选取20例精子数量正常人作为对照组。

1.2仪器和试剂 ①DNA提取和扩增试剂盒(上海康朗生物科技有限公司)； ②采用9700型PCR扩增仪(美国ABI公司)、的稳压稳流电泳仪(兴化分析仪器厂)和CI1000全自动化学发光免疫分析仪(北京利德曼公司)；性激素检测试剂盒(拜尔公司)。

1.3方法

1.3.1性激素测定 清晨空腹采集研究对象的静脉血,将血清进行分离,储存在零下20℃冰箱,测定其T、PRL、LH和FSH［1］。

1.3.2染色体检查 采集研究对象外周血进行淋巴细胞培养,G显带核型分析,镜检分析3～5个核型,若发现异常核型则加倍分析［2］。

1.3.3Y染色体微缺失 按照DNA提取试剂盒的要求提取研究对象DNA,按照说明书对DNA进行扩增,并对扩增的产物进行电泳检测,根据电泳检测的结果和正常男性的标准带进行比较,确定患者Y染色体是否出现缺失。

1.4统计学方法 采用SPSS19.0统计学软件处理数据。计量资料以均数±标准差(±s)表示,采用t检验；计数资料以率(%)表示,采用χ2检验。P＜0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1性激素测定 无精组与少精组患者的FSH与LH均显著高于对照组,而无精组的FSH和LH又显著高于少精组,差异有统计学意义(P＜0.05)；无精组与少精组T水平显著低于对照组(P＜0.05)；无精组PRL显著高于少精组和对照组(P＜0.05),而少精组和对照组PRL水平比较差异无统计学意义(P＞0.05)。见表1。

2.2染色体检查 81例少精和无精症患者中,有22例出现染色体畸变,畸变率为27.2%。20例对照组被试的染色体检查全部正常。见表2。

表1 三组血清T、PRL、LH和FSH比较(±s)

表1 三组血清T、PRL、LH和FSH比较(±s)

注：与对照组比较,aP＜0.05；与少精组比较,bP＜0.05

组别 例数 T(ng/L) PRL(mg/ml) LH(mlU/L) FSH(mlU/L)无精组 22 3.9±2.9ab13.7±6.2ab12.9±3.2ab15.3±9.9ab少精组 59 5.5±2.0a8.3±3.4 6.7±3.3a8.5±6.2a对照组 20 9.0±2.8 7.7±3.2 3.5±2.9 4.9±3.2

表2 81例研究对象核型异常情况(n)

2.3Y染色体微缺失 81例无精、少精症患者中,检测到6例(7.4%)Y染色体微缺失；而对照组被试中,未出现Y染色体微缺失。

3 讨论

导致男性无精症和少精症的各种因素中,遗传因素和内分泌因素起着十分重要的作用。本研究发现,81例少精和无精症患者中,有22例出现染色体畸变,畸变率为27.2%。且检测到6例(7.4%)Y染色体微缺失,而对照组正常。此外,T、PRL、LH和FSH等性激素和对照组相比,也出现异常。原因考虑如下：

男性生殖系统与中枢神经系统以及下丘脑-垂体-睾丸性腺轴系统密切相关,而有腺垂体促性腺激素细胞所分泌的FSH、LH、PRL和睾酮与此也密切相关。研究结果表明,少精症和无精症患者中,血清FSH和LH的水平均显著高于对照组(P＜0.05),提示睾丸功能出现损伤,精子的发生和成熟受影响,令精子的活动度下降,从而导致不育［3］。

T为男性中十分重要的雄性激素,机体通过睾丸间质细胞分泌获取。如果由于先天因素或者后天疾病导致睾丸受损,使生精能力降低、T含量下降。继而影响精子的发育,导致少精或无精。研究结果也表明,无精症组和少精症组的T含量均低于对照组(P＜0.05),且无精症组也显著低于少精症组(P＜0.05),表明T在无精、少精症中的影响。

PRL是应激性激素,正常水平下能对LH有增强作用,从而促进T的分泌与合成,促进精子发生,同时对性腺的发育与功能维持都能产生十分重要的作用,研究结果表明,无精症患者的PRL水平高于少精症组和对照组(P＜0.05),导致性功能低下、不利于精子发育。由此可见,血清性激素的分泌对精子发育具有重要的调节作用［4］。

本研究发现,无精症和少精症患者中,有27.2%出现染色体编译,其中以47,XXY和46,XY,Yqh+为主。47,XXY即患者比正常男性多出1条X染色体,令睾丸的发育产生影响,睾丸功能下降,出现睾丸发育差、第二性征不明显和无精等。临床上,发现Klinefelter综合征患者出现的无精、少精的情况,普遍认为就是由于多出1条X染色体相关［5］。因此在进行ICSI辅助孕前检查前,所进行的染色体核型分析不但能避免将父亲遗传缺陷传给子代,还能帮助患者降低将来金钱和精神上的负担。

染色体平衡易位的过程中,不会出现基因片段的丢失,因此男性的表现性是正常的。但有报道认为,染色体平衡易位也有可能出现无精症或者少精症,原因可能是同源染色体在减数分裂的前期无法联合,导致染色体大量遗传物质出现重复或者缺失,基因组发生不平衡,使配子凋亡。

1976年,Tiepolo等发现Y染色体上存在与精子发生相关的基因,被成为无精子因子,后来学者将该因子分为无精子因子a～d四个功能区,不同功能区的微缺失就会有不同的表现型［3］。由于Y染色体在精子发生时,无法好像其他常染色体一般进行DNA修复,因此只要有一个基因出现微缺陷就会发生效应。本次临床研究中,检测到6例(7.4%)Y染色体微缺失,表明Y染色体微缺失是导致男性不育的重要因素。

综上所述,提示临床上应该对男性不育患者进行染色体核型分析、Y染色体微缺失和血清性激素测定,为后续的生殖治疗提供合理的治疗方案。

［1］赵华萌.少精及无精不育患者血清性激素水平分析.蚌埠医学院学报,2014,39(4):492-493.

［2］滕贤麟,施金俏,郭辉,等.无精症及严重少精症患者染色体核型和 Y 染色体微缺失分析.检验医学,2014,29(12):1212-1214.

［3］李锋.少精、无精症患者染色体及性激素水平分析.国际检验医学杂志,2012,33(4):506-507.

［4］陈斌鸿,陈社安.69 例少精、无精症患者血清性激素水平分析.国外医学临床生物化学与检验学分册,2005,26(7):406-408.

［5］杨欢利,毛英姿,诸溢扬,等.无精症及严重少精症患者 Y 染色体微缺失及细胞遗传学研究.医学研究杂志,2012,41(12): 106-109.

10.14164/j.cnki.cn11-5581/r.2016.16.052

2016-07-01］

835000 新疆维吾尔自治区伊犁哈萨克自治州妇幼保健院检验科