CYP2C19基因多态性与急性冠脉综合征危险分层的相关研究

刘丽霞，薛剑，张孝忠，陈建魁，张军军

· 论著 ·

CYP2C19基因多态性与急性冠脉综合征危险分层的相关研究

刘丽霞1，薛剑1，张孝忠1，陈建魁2，张军军3

目的探讨CYP2C19基因多态性与急性冠脉综合征（ACS）危险分层的关系。方法选取2015年1月～2015年9月于军事医学科学院附属医院收治的ACS患者158例，男性66例，女性92例。入院后测定CYP2C19基因型，依据结果分组，快代谢组77例，中间代谢组61例，慢代谢组20例。采用GRACE评分对患者进行危险分层，并依据结果分为低危组（0～108分，n=89）、中危组（109～140分，n=40）、高危组（＞140分，n=29）。分析CYP2C19基因型与ACS高危的关系。结果高危组的脑钠肽水平显著高于低危组与中危组，差异有统计学意义（P均＜0.05）。高危组慢代谢型比例较低危组和中危组显著升高，差异有统计学意义（P均＜0.05）。GRACE评分快代谢组为（104±32）分，中间代谢组（112 ±31）分，慢代谢组（138±56）分。慢代谢组GRACE评分明显高于中间代谢组和快代谢组，差异有统计学意义（P均＜0.05）。多因素Logistic回归分析结果显示，CYP2C19慢代谢型改变（OR=13.336，95%CI：3.195～55.661，P＜0.001）是ACS患者高危的危险因素，同时脑钠肽升高（OR=2.147，95%CI：1.457～5.539，P=0.026）也是ACS患者高危的危险因素。结论CYP2C19慢代谢型为急性冠脉综合症患者GRACE评分高危的危险因素，明确基因型对于评估患者风险有重要意义。

冠脉综合征；脑钠肽；心肌梗死

急性冠脉综合征（ACS）的发病率逐年升高，已成为威胁人类生命健康的严重问题，其治疗的关键在于早期危险分层[1]。但是，目前并没有一种血清标志物能够独立对ACS进行有效分层。近年来，导致疾病的遗传因素成为研究的热点，许多代谢路径中的关键酶在其中发挥重要作用，细胞色素P450（CYP450）中的CYP2C19是其中之一。

CYP2C19基因是细胞色素P450家族中最重要的药物代谢酶编码基因之一。研究表明CYP2C19*2和CYP2C19*3的单核苷酸多态性会增加心血管事件的发生率[2]。因此，本研究分析了CYP2C19基因多态性与ACS患者之间的关联，以GRACE为分组标准，测定不同危险分层的ACS患者CYP2C19基因多态性。

1 资料与方法

1.1 研究对象选取2015年1月～9月于军事医学科学院附属医院收治的ACS患者158例，其中男性66例，女性92例。纳入标准：明确诊断为不稳定型心绞痛、急性ST段抬高型心肌梗死、急性非ST段抬高型心肌梗死。排除对阿司匹林或氯吡格雷过敏或不耐受、半年内有卒中或内脏出血性疾病病史、严重肝脏疾病、凝血功能异常、瓣膜病、心肌病、先天性心脏病、感染性心内膜炎、晚期肾功能不全、肿瘤及慢性心力衰竭患者。

1.2 基因型检测脱氧核糖核酸（DNA）提取试剂盒提取各组外周静脉血中DNA，并用实时荧光PCR法检测基因型。取500μl EDTA抗凝静脉血，提取基因组DNA。基因组DNA浓度在20～200 ng/μl，DNA的OD260/OD280在1.7～2.0之间。按照试剂盒说明书的反应条件配置反应体系，在PCR仪上进行扩增，聚合酶链反应条件：95℃预变性5 min，95℃变性30 s，58℃退火30 s，72℃延伸45 s，共38个循环，最后72℃延伸8 min。取PCR产物，3%琼脂糖凝胶电泳，凝胶成像仪成像，检测并明确基因类型。

CYP2C19基因型分析：检测CYP2C19*1、*2、*3等位基因，*1/*1基因型为快代谢型，*1/*2或*1/*3基因型为中间代谢型，*2/*2、*3/*3或*2/*3基因型为慢代谢型。

1.3 ACS的危险分层危险分层采用The GRACE 2.0 ACS Risk Calculator评分系统[3]。入院即刻依据临床资料进行风险评估，包括：年龄、心率、收缩压、心功能分级（Killip分级）、肾功能、ST段的改变、肌钙蛋白的升高、心脏骤停。根据GRACE评分，分为3组：低危组（0～108分，n=89）、中危组（109～140分，n=40）、高危组（＞140分，n=29）。

1.4 统计学处理应用SPSS 20.0统计软件进行分析，计量资料采用均数±标准差（s）表示，两组间均数的比较采用t检验，计数资料采用例数（构成比）表示，组间比较采用χ2检验。采用多因素Logistic回归分析ACS高危的影响因素。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 不同危险分层的ACS患者临床资料比较三组患者的年龄、男性比例、合并ACS危险因素比例、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、左室射血分数比较，差异无统计学意义（P均＞0.05）。高危组的脑钠肽（BNP）水平显著高于低危组与中危组，差异有统计学意义（P均＜0.05）。高危组慢代谢型比例较低危组和中危组显著升高，差异有统计学意义（P均＜0.05）（表1）。

2.2 不同CYP2C19基因型患者GRACE评分比较依据基因型鉴定结果分组，快代谢组77例，中间代谢组61例，慢代谢组20例。GRACE评分快代谢组为（104±32）分，中间代谢组（112±31）分，慢代谢组（138±56）分。慢代谢组GRACE评分明显高于中间代谢组和快代谢组，差异有统计学意义（P均＜0.05）（图1）。

2.3 ACS高危的影响因素分析多因素Logistic回归分析结果显示，CYP2C19慢代谢型改变（OR=13.336，95%CI：3.195～55.661，P＜0.001）是ACS患者高危的危险因素，同时BNP升高（OR=2.147，95%CI：1.457～5.539，P=0.026）也是ACS患者高危的危险因素。年龄、性别、糖尿病、高血脂、高血压等均与ACS患者高危分层无关（表2）。

3 讨论

A C S包括急性S T段抬高型心肌梗死（STEMI）、急性非ST段抬高型心肌梗死（NSTEMI）和不稳定型心绞痛（UA）[1,2]。ACS发病急，起病重，早期危险分层对于判断ACS预后及指导临床医师治疗有重要的价值。无论是STEMI还是NSTEMI患者，危险程度的评估贯穿于整个ACS诊治过程[4]。

表1 不同危险分层的ACS患者临床基线资料比较

表2 多因素Logistic回归分析ACS高危的影响因素

细胞色素P4502C19是重要的药物代谢酶。CYP 2C19酶的活性不仅有种族差异，个体差异也很明显。CYP2C19基因位于染色体10q24，包括9个外显子，编码490个氨基酸。现已发现CYP2C19*1～CYP2C19*25等25个类型，其中有23个等位基因编码蛋白质。编码正常酶的基因是CYP2C19*1，常见的突变类型包括CYP2C19*2、CYP2C19*3和CYP2C19*17。中国人群中CYP2C19突变类型几乎均为CYP2C19*2和CYP2C19*3[5]。CYP2C19*2是由于第5个外显子第681位碱基G突变为A，CYP2C19*3是第4个外显子第636位碱基由G突变为A，终产物是无活性的蛋白质，从而使CYP2C19酶丧失催化活性，因此，这两个基因型均是低功能代谢型。

本研究结果表明，CYP2C19基因多态性与ACS患者危险分层有关，CYP2C19慢代谢型的患者GRACE评分高危的风险是快代谢型患者的13.3倍。既往研究表明CYP2C19*2和CYP2C19*3是冠心病患者发生不良心血管事件的独立危险因素[6]。Trenk D等[7]观察了797例接受PCI治疗的患者，随访至少12个月，CYP2C19慢代谢型的患者出现不良心血管事件的危险性显著升高。另外一项关于ACS研究表明[8]，冠状动脉介入术后30天内支架血栓的发生率CYP2C19*2突变基因携带者是CYP2C19*1的3倍。

CYP2C19基因多态性不仅是ACS发病的重要危险因素，同时也与ACS发病后危险分层有关。Akasaka等[8]的研究结果表明CYP2C19*1和CYP2C19*2基因型体外ADP诱导的血小板聚集反应有很大不同，CYP2C19*2突变型更易导致血小板聚集。而血小板活化聚集在ACS发病中起重要作用。

综上所述，本研究初步证实了CYP2C19慢代谢型为ACS患者GRACE评分高危的危险因素，其可以有效反映ACS患者的高危风险。尽早明确CYP2C19基因型对于ACS患者病情监测、疗效评估、预后评估有重要价值。

[1] Wang JY,Goodman SG,Saltzman I,et al. Cardiovascular risk factors and in-hospital mortality in acute coronary syndromes: Insights from the canadian global registry of acute coronary events[J]. Can J Cardiol, 2015,31(12):1455-61.

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[6] Nozari Y,Vosooghi S Fau,Boroumand M,et al. The impact of cytochrome p450 2c19 polymorphism on the occurrence of one-year in-stent restenosis in patients who underwent percutaneous coronary intervention: A case-match study[J]. Anatol Cardiol,2015,15(5):348-53.

[7] Trenk D,Hochholzer W,Fromm MF,et al. Cytochrome P450 2C19 681G＞A polymorphism and high on-clopidogrel platelet reactivity associated with adverse 1-year clinical outcome of elective percutaneous coronary intervention with drug-eluting or bare-metal stents[J]. Am Coll Cardiol,51(20):1925-34.

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本文编辑：姚雪莉

Correlation between CYP2C19 polymorphism and risk stratification of acute coronary syndrome

LIU Lixia*, XUE Jian, ZHANG Xiao-zhong, CHEN Jian-kui, ZHANG Jun-jun.*Department of Cardiology, Affiliated Hospital of Academy of Military Medical Sciences, Beijing 100071, China.

ZHANG Xiao-zhong, E-mail: zxz947136@126.com; CHEN Jian-kui, E-mail: Chenjk307@163.com

ObjectiveTo discuss the relationship between CYP2C19 polymorphism and risk stratification of acute coronary syndrome (ACS).MethodsACS patients (n=158, male 66 and female 92) were chosen from the Affiliated Hospital of Academy of Military Medical Sciences from Jan. 2015 to Sept. 2015. All patients were divided into fast-metabolism group (n=77), medium-metabolism group (n=61) and slow-metabolism group (n=20) according to the detective results of CYP2C19 genotypes. The patients were given risk stratification by using GRACE scoring and divided into low-risk group (0-108, n=89), mid-risk group (109-140, n=40) and high-risk group (＞140, n=29). The relationship between CYP2C19 genotypes and high-risk factors of ACS was analyzed.ResultsThe level of brain natriuretic peptide (BNP) was significantly higher in high-risk group than that in low-risk group and mid-risk group (all P＜0.05). The percentage of slow-metabolism cases increased significantly in high-risk group compared with low-risk group and mid-risk group (all P＜0.05). GRACE scores were (104±32) in fast-metabolism group, (112±31) in medium-metabolism group and (138±56) in slow-metabolism group, which were significantly higher in slow-metabolism group then those in medium-metabolism group and fast-metabolism group (all P＜0.05). The results of multiple Logistic regression analysis showed that the change of CYP2C19 slow-metabolism genotype (OR=13.336, 95%CI: 3.195～55.661, P＜0.001) and higher BNP level (OR=2.147, 95%CI: 1.457-5.539, P=0.026) were high-risk factors in ACS patients.ConclusionCYP2C19 slow-metabolism genotype is a high-risk factor in ACS patients, and it is very important for reviewing ACS risk to definite genotypes.

Acute coronary syndrome; Brain natriuretic peptide; Myocardial infarction

R541.4

A

1674-4055(2016)12-1474-03

1100071 北京,军事医学科学院附属医院心内科;2100071 北京,军事医学科学院附属医院检验科;3100043 北京,北京市石景山区中医医院心内科

张孝忠,E-mail:zxz947136@126.com；

共同通讯作者：陈建魁,E-mail:Chenjk307@163.com

10.3969/j.issn.1674-4055.2016.12.17