结肠腺癌组织Aurora-B和靶向Xklp2靶蛋白表达及意义

杨瑞琦 王钟焰

(齐齐哈尔医学院附属第三医院肛肠外科，黑龙江 齐齐哈尔 161000)

结肠腺癌组织Aurora-B和靶向Xklp2靶蛋白表达及意义

杨瑞琦 王钟焰

(齐齐哈尔医学院附属第三医院肛肠外科，黑龙江 齐齐哈尔 161000)

目的 检测结肠腺癌中丝氨酸/苏氨酸激酶家族成员Aurora-B和靶向Xklp2靶蛋白(TPX-2)的表达，分析其临床意义。方法 85例结肠腺癌患者术后的蜡块组织作为观察组，30例结肠黏膜上皮内瘤变组织作为对照组，非肿瘤性的结肠黏膜组织30例作为正常对照组。应用免疫组化方法检测三组中Aurora-B和TPX-2的表达。结果 三组中Aurora-B和TPX-2阳性率差异显著。观察组中Aurora-B和TPX-2的阳性率与肿瘤的分化程度密切相关，Aurora-B的阳性率与肿瘤的淋巴结转移密切相关，TPX-2的阳性率与肿瘤的Ki67增殖指数密切相关。结论 Aurora-B和TPX-2在结肠腺癌中高表达是促进肿瘤形成的重要因素，二者异常表达可以促进肿瘤的进展。

结肠腺癌；Aurora-B；靶向Xklp2靶蛋白(TPX-2)

结肠腺癌为黏膜腺体异型增生(上皮内瘤变)后的继发性病变，病变以侵袭肌层为特征，在此过程中，相关基因和蛋白的表达失调，对促进肿瘤形成有重要影响〔1,2〕。丝氨酸/苏氨酸激酶家族被认为与肿瘤性病变有关，其共包括3个成员，Aurora-B是家族中的经典成员，参与多种生物学过程，在调节细胞有丝分裂的中心体调节、纺锤体形成、染色体分离等过程中发挥重要作用〔3,4〕。靶向Xklp2靶蛋白(TPX-2)是一个受细胞周期严格调控的细胞核增殖蛋白，参与细胞有丝分裂的纺锤体微管功能，近年研究认为Aurora-B和TPX-2可能在肿瘤形成和进展中有重要促进作用〔5,6〕。本实验检测结肠腺癌组织Aurora-B和TPX-2的表达，分析其临床意义。

1 资料与方法

1.1 一般资料 2015年1～12月我院结肠腺癌住院患者85例为观察组，均行根治手术，术后经病理医师确诊及明确分型，同时符合WHO中的诊断标准，其中男44例，女41例；年龄36～83岁，平均(57.2±9.0)岁。30例结肠黏膜上皮内瘤变组织作为对照组，其中男15例，女15例；年龄34～75岁，平均(53.6±8.6)岁。非肿瘤性的结肠黏膜组织30例作为正常对照组，其中男15例，女15例；年龄38～78岁，平均(56.4±8.5)岁。三组常规资料无明显差异。

1.2 Aurora-B和TPX-2的检测方法 术后组织均常规取材，并应用甲醛溶液固定，石蜡包埋后切取4 μm切片，烤片20 min后，行Aurora-B和TPX-2蛋白的检测。Aurora-B和TPX-2的检测均采用免疫组化二步法，应用二氨基联苯胺(DAB)显色。

1.3 Aurora-B和TPX-2结果的判读 Aurora-B和TPX-2均以细胞核中出现浅黄色到深棕色颗粒为阳性反应细胞，选择上皮细胞染色集中的区域进行观察，选择400倍的视野共3个分别计数，计算阳性率，取平均值。以阳性率<5%为阴性，以阳性率≥5%为阳性。

1.4 统计学方法 采用SPSS17.0统计软件进行χ2检验或线性相关性分析。

2 结 果

2.1 3组Aurora-B和TPX-2阳性率的比较 3组Aurora-B和TPX-2阳性率差别显著(P<0.001)。见表1。

表1 各组Aurora-B和TPX-2阳性表达比较〔n(%)〕

组别nAurora⁃BTPX⁃2观察组8536(42 4)46(54 1)对照组306(20 0)8(26 7)正常对照组302(6 7)3(10 0)χ2/P值11 25/<0 00110 24/<0 001

2.2 观察组Aurora-B和TPX-2 在不同临床病理特征中比较 观察组Aurora-B和TPX-2阳性率与肿瘤分化程度密切相关，观察组Aurora-B阳性率与肿瘤淋巴结转移密切相关，TPX-2阳性率与肿瘤Ki67增殖指数密切相关。见表2。

表2 不同临床病理特征的观察组Aurora-B和TPX-2表达〔n(%)〕

临床特征nAurora⁃BTPX⁃2分化程度 高399(23 1)13(33 3) 中3419(55 9)23(67 6) 低128(66 7)10(83 3) χ2值 P值8 2680 0048 9870 002淋巴结转移 无6020(33 3)30(50 0) 有2516(64 0)16(64 0) χ2值 P值6 7970 0091 3930 340Ki67增殖指数 <25%2412(50 0)8(33 3) ≥25%6124(39 3)38(62 3) χ2值 P值0 8010 4665 8180 028

3 讨 论

结肠腺癌是高增殖性肿瘤，病变形成时腺管异型，在肌层出现明显的浸润性生长，肿瘤是高增殖性病变，在增殖过程中，有丝分裂过程中的偏差也可以导致基因组的不稳定，从而引发肿瘤性的失控性增生〔7,8〕。本实验提示Aurora-B和TPX-2异常表达可以促进结肠黏膜腺上皮的异型增生、癌变。二者参与肿瘤由幼稚到成熟的形成过程，二者高表达时提示肿瘤处于幼稚状态，此时幼稚的细胞异型性大，细胞核染色深，细胞出现明显的分化失成熟的现象。Aurora-B高表达可能提示或预示着淋巴道播散，此时肿瘤细胞播散的潜能升高，手术不易切除干净，临床预后可能较差。TPX-2高表达可以促进肿瘤细胞的分裂和繁殖过程，促进肿瘤细胞的增生，肿瘤体积增大。Aurora-B是有丝分裂中组蛋白H3的10位丝氨酸化所必需的激酶，对染色体的浓缩非常重要。Aurora-B有调节动力的功能，是纠正染色体排列和分离、调整纺锤体检查点功能和胞质分裂所必需的〔9,10〕。Aurora-B被认为是染色体的过客蛋白，其主要定位于有丝分裂早期的染色体着丝粒的相关分布区域，在细胞分裂的后期则从着丝粒移至纺锤体赤道板的微管的位置，随着纺锤体的有效延伸，细胞开始出现分裂〔11,12〕。有研究认为Aurora-B可以聚集于纺锤体中央裂沟的部位，并可以向内移动，最终在中间体处形成聚集〔13〕。有研究认为Aurora-B可以与3个染色体过客蛋白-INCENP、survivin和Borealin进行结合发挥作用〔14〕，因此Aurora-B可能发挥相关蛋白的协同作用，共同促进肿瘤性病变的形成。TPX-2基因是一个分子量为100 kD的核增殖相关蛋白，位于染色体20q11.2，其表达状态受细胞周期的严格调控，有研究认为TPX-2只在G1-S期交界期被检测到，在细胞分裂完成后则消失〔15〕。而在S期和G2期，TPX-2分布在细胞核，在分裂期细胞可以与有丝分裂的纺锤体密切结合，动力蛋白XkIp2靶向附着于纺锤体的微管，从而保证正常的纺锤体极性〔16〕。TPX-2在人体组织，特别是肿瘤中的过度表达可以引起中心体扩增，异倍体形成，促进腺上皮组织的癌变和恶性肿瘤的进展〔17〕。刘红春等〔18〕观察TPX-2在食管鳞癌中的表达，发现TPX-2在正常黏膜、癌旁不典型增生和癌组织中的表达率依次增加，认为TPX-2蛋白异常表达可能是食管鳞癌淋巴结转移的危险因素，TPX-2的检测可望成为食管鳞癌早期诊断指标。因此Aurora-B和TPX-2高表达对肿瘤的形成和进展可能有一定的提示作用〔17，19，20〕。

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〔2015-04-18修回〕

(编辑 苑云杰)

齐齐哈尔市科技局社会发展计划重点项目(No.SFGG-201313)

杨瑞琦(1983-)，男，主治医师，硕士，主要从事肛肠疾病研究。

R735

A

1005-9202(2016)24-6169-03；

10.3969/j.issn.1005-9202.2016.24.059