生地、丹参对2型糖尿病大鼠腹主动脉内皮细胞超微结构的影响

唐年亚

(南阳医学高等专科学校科研处，河南 南阳 473000)

生地、丹参对2型糖尿病大鼠腹主动脉内皮细胞超微结构的影响

唐年亚

(南阳医学高等专科学校科研处，河南 南阳 473000)

目的观察生地、丹参对2型糖尿病(T2DM)大鼠腹主动脉内皮细胞超微结构的影响。方法 采用链脲佐菌素(STZ)加高糖高脂饮食制作T2DM动物模型。用日立H-600透射电镜观察T2DM大鼠腹主动脉内皮细胞超微结构。结果 生地、丹参组T2DM大鼠腹主动脉内皮细胞及其线粒体肿胀、破坏程度比模型组明显减轻。结论 生地、丹参均对T2DM大鼠腹主动脉内皮超微结构有不同程度的保护作用。

生地；丹参；2型糖尿病；内皮细胞；超微结构

血管内皮细胞具有复杂的酶系统，能合成与分泌多种生物活性物质〔1〕，如组织纤维酶原活性物和前列环素、内皮素以及具有舒张血管作用的内皮细胞舒张因子。内皮细胞表面有血管紧张素转换酶，能使血浆中的血管紧张素Ⅰ变为血管紧张素Ⅱ，使血管收缩。内皮细胞还能降解5-羟色胺、组织胺和去甲肾上腺素等。2型糖尿病(T2DM)血糖增高容易致使血管内皮细胞功能紊乱,其活性物质分泌出现失衡，严重可引起血管内皮细胞排列紊乱甚至脱落,使内皮下层直接暴露于血液之中,引起血管反复血栓、管腔狭窄、炎性病变等,造成局部组织并发症的产生〔2〕。本实验观察T2DM大鼠腹主动脉内皮细胞超微结构治疗前后的变化。

1 材料与方法

1.1 实验动物及药物 清洁级Wistar大鼠90只，60～70 g，适应性喂养3 d开始实验。中药生地、丹参回流提取成中药水液制剂用于灌胃治疗。西药格列齐特作对照。

1.2 实验试剂及仪器 2.5%戊二醛、1%四氧化锇；LKB-V型超薄切片机；日立H-600透射电镜。

1.3 实验方法

1.3.1 造模方法 随机选取10只大鼠为正常组，以基础饲料喂养，其余80只以高糖高脂饲料喂养30 d，后腹腔注射STZ(30～45 mg/kg)，继续高糖高脂饮食，7 d后取餐后2 h血糖值≥11.1 mmol/L的大鼠进行分组治疗。若造模不成功，可腹腔补注一次STZ，治疗周期为45 d。

1.3.2 分组治疗 造模成功的80只大鼠被随机分成8组：模型组、西药组(格列齐特组)，丹参高、中、低剂量组，生地高、中、低剂量组。按人鼠等效剂量折算，对各组进行灌胃治疗，1次/d；其中正常组、模型组生理盐水灌胃，余下各组中药制剂灌胃治疗。

1.3.3 标本采集与制备 治疗结束后，在正常组、模型组、丹参中剂量组、生地中剂量组中各随机选取1只大鼠断头处死，立即取出腹主动脉(1 cm长度)，2.5%戊二醛瓶装固定，继入1%四氧化锇中固定2 h，脱水、包埋、切片，经醋酸铀和柠檬酸铅等重金属电子双重染色后，置于H-600透射电镜下观察摄像。

2 结 果

图1所示，正常组：内皮细胞形态正常，连续性好，无中断，内皮细胞长轴与血液流动方向一致；细胞核居中，核所在部位略隆起，细胞基底面附着于基板上；内皮细胞核仁大而明显。线粒体数一般、嵴清晰、整齐。模型组：内皮细胞显著肿胀，连续性中断，有明显的内皮脱落；胞质电子密度低，细胞器少见；线粒体明显肿胀，嵴肿胀紊乱或溶解，见脂滴、糖原颗粒；基底膜厚薄不均，可见明显透亮区(电子密度低)，提示有水肿，连续性中断。丹参中剂量组：内皮细胞形态结构稍差，连续性好，无明显中断；胞核形态不规则，胞核内异染色质增多，边集于核膜下，线粒体数目无明显增多，肿胀，嵴模糊、紊乱。生地中剂量组：内皮细胞肿胀，连续性差中断，有脱落现象；胞核形态不规则，核异染色质增多；线粒体数目多，体积增大，嵴模糊。

图1 各组大鼠腹主动脉内皮细胞超微结构观察

3 讨 论

与正常组相比，模型组内皮细胞明显脱落，内皮下基层紊乱并暴露于血液之中，提示有明显的血管并发症，这与该组大鼠体毛稀疏凌乱、色暗偏黄，形瘦多疮，活动迟缓的外在表现相吻合。与模型组比较，生地、丹参均能稳定内皮下基层的完整形态，保护血管内皮超微结构，并与两组大鼠的外在表现相吻合，未见明显形瘦、生疮、迟钝，毛色微黄无泽。同时也与临床生地、丹参均能改善糖尿病病人症状是一脉相承。但是，生地、丹参也有各自作用特点，即在维持血管内皮细胞正常形态，改善内皮细胞肿胀方面，丹参的作用明显比生地要强，都强于模型组；在维持线粒体形态与数量方面，生地的作用强于丹参，表明生地更能从内皮细胞的能量方面维持其形态的稳定性。但两者在保护血管内皮细胞方面为何有此差异有待于进一步深入地研究。

1 Schulz R，Rassaf T，Massion PB，etal.Recent advances in the understanding of the role of nitric oxide in cardiovascular homeostasis〔J〕.Pharmacol Ther，2005；108(3):225-56.

2 陈穗桦，夏 元，姜 涛.糖尿病新生血管性青光眼视神经血管内皮细胞在透射电镜下的改变〔J〕.眼科研究，2006；24(2):204-5.

〔2015-06-11修回〕

(编辑 苑云杰/曹梦园)

河南省教育厅科技研究重点项目(No.12B360019)

唐年亚(1979-)，男，硕士，主要从事糖尿病临床与基础研究。

R285.5

A

1005-9202(2016)24-6090-04；

10.3969/j.issn.1005-9202.2016.24.020