乳腺浸润性导管癌术后组织中转化生长因子β激活酶1和核因子-κB的表达

刘广寅 刘 琳 张志勇 崔永兴 王 平

(唐山工人医院乳腺外科，河北 唐山 063000)

乳腺浸润性导管癌术后组织中转化生长因子β激活酶1和核因子-κB的表达

刘广寅 刘 琳1张志勇2崔永兴2王 平

(唐山工人医院乳腺外科，河北 唐山 063000)

目的 检测乳腺浸润性导管癌中转化生长因子β激活酶(TAK)1和核因子(NF)-κB的表达，分析其临床意义。方法 乳腺浸润性导管癌并行乳腺癌改良根治手术的57例患者作为观察组，留取术后蜡块组织，37例距肿瘤边缘>3 cm的正常乳腺组织作为对照组，应用免疫组化方法检测两组中TAK1和NF-κB的表达。结果 观察组中TAK1和NF-κB表达的阳性率明显高于对照组，观察组中TAK1和NF-κB表达的阳性率与肿瘤的组织学分级、肿瘤的最大径相关，TAK1表达的阳性率与肿瘤的淋巴结转移相关，TAK1和NF-κB均与患者的年龄、分子分型无明显相关性；相关分析显示TAK1和NF-κB呈正相关性。结论 TAK1和NF-κB高表达对促进肿瘤性病变的形成和进展有一定意义，二者具有正向协同作用。

乳腺浸润性导管癌；转化生长因子β激活酶(TAK)1；核因子(NF)-κB；免疫组化

乳腺癌占女性恶性肿瘤的22%，是来源于乳腺导管上皮的恶性肿瘤，可以向周围邻近组织浸润，同时具有明显的远处转移趋向〔1〕。转化生长因子β激活酶(TAK)1是丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶，属于丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)成员〔2,3〕。TAK1介导的信号转导通路是应激反应、炎症反应及肿瘤发生等过程中信号连锁反应的关键调控因子，同时可以使核因子(NF)-κB激活，对肿瘤的进展有重要促进作用〔4〕。本实验关注乳腺浸润性导管癌中TAK1和NF-κB的表达特征，分析其临床意义。

1 资料与方法

1.1 临床资料 我院确诊为乳腺浸润性导管癌并行乳腺癌改良根治手术的57例患者作为观察组，均为女性，年龄35～78岁，平均55.8岁，留取术后蜡块组织。均经病理医师确诊，并符合WHO中的诊断标准。37例距肿瘤边缘>3 cm的正常乳腺组织作为对照组，年龄37～73岁，平均53.4岁。两组一般资料无明显差别。

1.2 免疫组化方法检测TAK1和NF-κB的表达 术后的标本均经甲醛溶液固定，常规取材，石蜡包埋，并切成4 μm的切片进行蛋白的检测。TAK1和NF-κB的检测应用免疫组化SP法，二氨基联苯胺(DAB)显色，其步骤严格按说明书操作，做好质控工作，减少人为误差。

1.3 免疫组化检测TAK1和NF-κB的表达 TAK1和NF-κB表达的阳性部位均为细胞质，以染成淡黄-深棕色为阳性，选择上皮细胞集中的区域进行观察，选择5个400倍的视野进行阳性率的计数，取平均值作为最终的评定标准。以阳性率<5%定为阴性，以≥5%定为阳性。

1.4 统计学方法 采用SPSS13.0软件行χ2检验、线性相关分析。

2 结 果

2.1 两组中TAK1和NF-κB阳性率的比较 两组TAK1和NF-κB的阳性率差异有统计学意义。见表1。

2.2 观察组不同临床特征中TAK1和NF-κB阳性率的比较 观察组中TAK1和NF-κB表达的阳性率与肿瘤的组织学分级、肿瘤的最大径相关，TAK1与肿瘤的淋巴结转移相关，二者均与患者的年龄、分子分型无明显相关性。见表2。

表1 两组中TAK1和NF-κB阳性率的比较〔n(%)〕

组别nTAK1NF⁃κB观察组5725(43 86)30(52 63)对照组372(5 41)4(10 81)χ2/P值16 2052/<0 000116 9965/<0 0001

表2 观察组不同临床特征中TAK1和NF-κB阳性率的比较〔n(%)〕

临床特征nTAK1NF⁃κB组织学分级 Ⅰ级60(0．00)1(16 67) Ⅱ级4018(45 00)20(50 00) Ⅲ级117(63 64)9(81 82) χ2/P值6 4559/0 03966 9827/0 0305肿瘤最大径 <4cm267(26 92)8(30 77) ≥4cm3118(58 06)22(70 97) χ2/P值5 5693/0 01839 1653/0 0025淋巴结转移 无3712(32 43)19(51 35) 有2013(65 00)11(55 00) χ2/P值5 5923/0 01800 0693/0 7923年龄 <55岁3816(42 11)19(50 00) ≥55岁199(47 37)11(57 89) χ2/P值0 1425/0 70580 3167/0 5736分子分型 管腔A型258(32 00)10(40 00) 管腔B型1910(52 63)13(68 42) Her⁃2亚型84(50 00)5(62 50) 基底细胞亚型53(60 00)2(40 00) χ2/P值2 6733/0 44484 1325/0 2475

2.3 观察组中TAK1和NF-κB表达的相关性 TAK1和NF-κB有正相关性(r=0.48,P=0.034 1)。

3 讨 论

在乳腺癌发生与发病的分子生物学机制中，较多基因和通路参与其中〔5〕，MAPK和NF-κB信号通路是最重要的二条〔6〕。MAPK信号转导通路是一条广泛存在于各种细胞内的信号转导途径，由一组丝/苏氨酸蛋白激酶组成，以MAPKKK-MAPKK-MAPK级联反应的方式相继磷酸化激活，将细胞外信号转导至细胞内及细胞核中，调控细胞周期和基因的表达〔7,8〕。研究显示TAK1蛋白主要通过MAPK级联反应模式调控MAPKs活性来影响细胞的生物学行为，生理状态下，活化的MAPKs可以调控细胞生长、分化、凋亡，促进胚胎发育和维持组织内环境的稳定，在病理状态下可以参与肿瘤尤其是炎症相关性肿瘤的发生和发展〔9,10〕。TAK1不是一个单纯的促癌或抑癌蛋白，在不同的条件下，可以扮演多种角色〔11〕。NF-κB可能与TAK1有较多的协同作用。有研究认为NF-κB可以被各种各样的被认为对宿主有潜在危害的刺激因子所激活，进而引起炎症、免疫反应及肿瘤形成〔12,13〕。也有观点认为NF-κB可以通过诱导细胞因子来调节免疫反应及黏附分子，进而导致白细胞被招募到炎症的部位〔14〕。NF-κB信号通路也被证实在细胞进程中具有重要作用，如细胞增殖和细胞耐药等〔15,16〕。

本实验提示TAK1和NF-κB表达增加可以促进肿瘤的生长过程，此时肿瘤的异型增生明显，失控性增生也加强，肿瘤细胞生长活跃，细胞繁殖旺盛，肿瘤体积增大〔17〕。本结果提示TAK1和NF-κB表达增多时可以使肿瘤的分级更高，细胞的分化更差。由于乳腺癌的分级是通过腺管形成、核多形性和核分裂计数的评估进行评定的，因此二者高表达与较少的腺管形成、较明显的核的多形性及较多数的核分裂象相关。TAK1表达增多可以促进肿瘤的淋巴道播散，肿瘤的迁移能力增强，在周围组织和其他器官的定植能力提高，进而形成转移灶〔18,19〕。分子分型是与治疗和预后直接相关的因素，尤其是高HER-2表达的患者和三阴乳腺癌患者，而本实验并未发现二者与分子分型的关系，二者与肿瘤治疗和预后的关系有待证实。TAK1激活是肿瘤坏死因子和白细胞介素诱导的NF-κB信号激活的一个重要步骤，并且肿瘤坏死因子受体相关因子(TRAF)6介导的TAK1的K34残基上的K63-连接的多聚泛素化与转化生长因子通路中的TAK1的活化有关〔20,21〕，因此，二者协同性的相互作用涉及的基因和蛋白因素可能更多。

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〔2015-03-20修回〕

(编辑 苑云杰)

刘广寅(1975-)，男，硕士，副主任医师，主要从事乳腺癌研究。

R734

A

1005-9202(2016)24-6159-02；

10.3969/j.issn.1005-9202.2016.24.054

1 唐山工人医院营养治疗科 2 唐山工人医院病理科