不同剂型银杏叶制剂的溶出度研究

齐惠珍　周霞瑾　王明霞　田培虹

不同剂型银杏叶制剂的溶出度研究

齐惠珍周霞瑾王明霞田培虹

【摘要】目的比较三个厂家不同剂型银杏叶制剂总黄酮醇苷的溶出度。方法本课题采用HPLC法测定3种剂型银杏叶制剂总黄酮醇苷的溶出度。色谱柱为NOVAPAK C18柱(3.9mm×150mm，5 μm)。流动相为甲醇－0.4%磷酸溶液(50∶50)，流速1.0ml/min，检测波长360 nm，柱温35℃，进样量10 μl。溶出度的测定采用转篮法，实验数据按威布尔分布模型计算。结果不同剂型银杏叶制剂的溶出度有明显差异。银杏叶分散片的溶出度优于薄膜衣片剂和软胶囊，分别为99.73%、98.35%、95.02%，其中，T50最大的是最小的11.1倍。结论银杏叶分散片剂、薄膜衣片剂、软胶囊剂的体外溶出度存在较大差异，这也是临床反映的不同厂家不同剂型的银杏叶制剂疗效不稳定的因素之一。

【关键词】银杏叶薄膜衣片;银杏叶分散片;银杏叶软胶囊;总黄酮醇苷

【中图分类号】R 917.4

【文献标识码】A

【文章编号】1002－7386(2015)16－2519－03

doi:10.3969/j.issn.1002－7386.2015.16.041

收稿日期:(2015－02－15)

项目来源:河北省医学科学研究重点课题(编号:20100419)

作者单位: 050011石家庄市，河北医科大学第四医院药品科

银杏叶制剂是一种天然植物提取物制剂，主要活性成分为黄酮类化合物和银杏总内酯，作用于心脑和外周末梢血管系统，改善末梢血液循环和促进血液运行，具有活血化瘀、通络舒脉功效，临床用于治疗血瘀型脑动脉硬化引起的眩晕、冠心病、心绞痛等。银杏叶制剂在防治心脑血管疾病中成药中占有较大市场份额，市售品种多样。患者反映不同厂家银杏叶制剂效果不一。本课题采用HPLC法研究市场比较普遍剂型，分散片、薄膜衣片、软胶囊，3个厂家银杏叶制剂中总黄酮醇苷的溶出度，以期为评定药品质量提供依

据［1］。

1　仪器与试剂

1.1仪器ZRS-8G智能溶出测试仪(天津大学仪器厂); WATERS高效液相色谱仪(美国WATERS公司);电子分析天平(瑞士METTLER TOLEDO梅特勒-托利多)。

1.2试剂供试药品为市售药品随机取样。A:银杏叶分散片(吉林某药业有限公司，国药准字Z20060440，批号140304); B:银杏叶薄膜衣片(江苏某药业集团有限公司，国药准字Z20027949，批号14111523); C:银杏叶软胶囊(石家庄某药业有限责任公司，国药准字Z20060457，批号501140601)。标示量每片均含总黄酮醇苷19.2mg，萜类内酯4.8mg。

对照品:槲皮素(中国药品生物制品检定所，批号100081-200907)、山奈素(中国药品生物制品检定所，批号110861-200808)、异鼠李素(中国药品生物制品检定所0-201109)(中国食品药品检定研究院)。试剂:甲醇(色谱纯);超纯水。其他试剂为分析纯。

2　方法与结果

2.1色谱条件WATERS 515泵高效液相色谱仪。色谱柱为NOVAPAK C18柱(3.9mm×150mm，5 μm)。流动相为甲醇－0.4%磷酸溶液(50∶50)，流速1.0ml/min，检测波长360 nm，柱温35℃，进样量10 μl。

2.2对照品溶液的制备分别精密称取对照品槲皮素、山奈素、异鼠李素适量，加甲醇配制成槲皮素浓度为0.065mg/ml，山奈素浓度为0.045mg/ml，异鼠李素0.031mg/ml的混合标准溶液。另取依据处方工艺配制的相应空白辅料适量，同上方法配制成空白溶液。2.3供试品溶液的制备供试品溶液取银杏叶分散片10片，研细后并精密称定，置入带塞锥形瓶，精密加入甲醇20ml后称定重量，并超声处理20min。置室温后，再称定重量，用甲醇补足失减的重量，摇匀并滤过。精密量取续滤液10ml置入100ml量瓶中，加甲醇10ml、25%盐酸溶液5ml入内，摇匀后，置于水浴中加热回流30min，迅速冷却到室温，然后转至50ml量瓶，用甲醇溶液稀释到刻度并摇匀，用0.45 μm微孔滤膜滤过得供试液A。

取银杏叶薄膜衣片10片，其他制备过程同试液A，即得试液B。

取软胶囊10粒，用针扎囊壁，挤出内容物，放入烧杯中称重，去皮，取相当于一粒软胶囊重量，精密称定，其他制备过程同试液A，即得试液C。

取三种供试品和混合对照品试液按2.1项下色谱条件进样，测得各自色谱图见图1。

2.4标准曲线的制备［2］分别精密量取对照品溶液

各1、2、4、6、8、10ml加入10ml量瓶内，用甲醇定容，0.45 μm微孔滤膜滤过后，按2.1项下色谱条件进样10 ul。以浓度C(mg/ml)为横坐标，峰面积(A)为纵坐标，得线性方程。槲皮素线性方程为: A = 70 086C －59.418相关系数r = 0.9995(线性范围: 0.0065～0.065mg/ml);山柰素线性方程为: A = 80 059C－50.13相关系数r = 0.9993(线性范围: 0.0045～0.045mg/ml);异鼠李素线性方程为: A = 69 717C－29.99相关系数r = 0.9994(线性范围: 0.0031～0.031mg/ml)。混合标准液色谱图见图1。槲皮素、山奈素和异鼠李素的出峰时间分别为12.2min、21.6min和24.0min。

2.5溶出度测定方法采用转篮法，随机取银杏叶样品制剂6片(粒)，按《中华人民共和国药典》2010版二部附录XC溶出度测试法的第一法进行［3］。用0.1mol/l盐酸作为释放介质，控制温度为(37±0.5℃)，设定仪器转速100 r/min。分别在5、10、20、30、45、60、90min各时间点，以注射器取样5ml，同时立即补充上述同温度释放介质5ml，分别以0.45 μm的微孔滤膜过滤，精密量取续滤液1.5ml于100ml量瓶中，按2.3项方法制备供试品溶液，取样测定槲皮素、山奈素、异鼠李素的峰面积，参照标准曲线计算得出总黄酮醇苷的溶出量，同时取2.2项下配制的对照品试液，按上述色谱条件测定，计算出样品各时间点总黄酮醇苷的溶出度，并绘制不同制剂的累积溶出度曲线，见表1、图2。

图1　HPLC色谱图(1槲皮素2山奈素3异鼠李素)A分散片样品B薄膜衣片样品C软胶囊样品D混合标准品

表1　银杏叶制剂的平均累积溶出百分率　n =6，%

2.6精密度试验取“2.5溶出度测定方法”的供试品溶液作为样品溶液，按“2.1”项下的色谱条件连续进样测定5次，记录各峰面积，相对标准偏差RSD为0.1%。

2.7稳定性实验按“2.5溶出度测定方法”配制供试品溶液，置室温条件下放置，分别于0 h、2 h、4 h、6 h、8 h、12 h取样，按“2.1”项下的色谱条件分别进样三次，记录各点时的峰面积，RSD为0.2%(n =5)，结果表明，供试品溶液在室温下放置12 h内稳定。

2.8数据处理将各剂型在各时间点累积溶出度输入计算机，按威布尔分布模型计算溶出参数T50、Td、m、AUC，并做方差分析［4］，见表2。实验结果表明3种供试品中，溶出度参数各剂型间均有差异，银杏叶分散片的溶出度优于薄膜衣片剂和软胶囊，其中，T50最大的是最小的11.1倍。

表2　各剂型样品的溶出度参数　n =5，±s

表2　各剂型样品的溶出度参数　n =5，±s

剂型　T50(min)　 Td(min)　m　 AUC(0-90min)A分散片1.56±0.32　 3.15±0.24　 0.72±0.06　 100.11±9.65 B薄膜衣片　9.73±0.75　 14.34±1.92　 0.96±0.12　 67.34±6.15 C软胶囊　17.31±1.23　 23.04±1.93　 1.21±0.37　 84.17±10.31

3　讨论

3.1我们考察了不同转速水平对溶出的影响，结果表明，在相同的时间点，转速100 r/min高于75 r/min及50 r/min时药物累积溶出百分率，因此，确定仪器转速为100 r/min。

3.2溶出介质以水、磷酸盐缓冲液(pH = 6.8)和0.1mol/L盐酸溶液为溶出介质，分别测定。结果表明，在所考察的溶出介质中，以0.1mol/L盐酸溶液中总黄酮醇苷的溶出度最大，且更接近于人体胃部环境，因此采用0.1mol/L盐酸溶液为溶出介质。

3.3目前，有文献表明，中药片剂的崩解速度不能完全反映溶出速度，银杏叶制剂也有此类问题［5］。

3.4由于溶出度实验可部分反映固体制剂中主要的理化性质、处方组成、辅料品种及性质、生产工艺等方面的差异，目前对西药固体制剂体外溶出实验已广泛地用于制剂的质控手段，而中药固体制剂中体外溶出实验报道还相对较少。

3.5实验结果表明目前市售不同剂型银杏叶制剂的体外溶出性能存在较大差异，这也是导致临床反映的不同厂家不同剂型的银杏叶制剂疗效不稳定的因素之一，临床用药需要引起注意。

图2　各种银杏叶制剂累积溶出曲线图

参考文献

1万波，林万青.银杏叶片溶出度研究.中国药师，2008，11:385-387.

2周自桂，苏晋，金春，等.HPLC-ELSD法测定不同厂家银杏叶提取物分散片剂中萜类内酯溶出度.中成药，2010，32:2003-2006.

3国家药典委员会主编.中华人民共和国药典.一部.北京:化学工业出版社，2010.1079.

4胡祥珍，董荩.Excel在测定药物制剂溶出度参数数据处理中的应用.解放军药学学报，2003，19: 74-76.

5陶红，张韬，单义.RP-HPLC测定不同厂家银杏叶片剂中总黄酮醇苷溶出度.中成药，2009，31:1226-1229.