青海高原藏族妇女生殖道感染HPV型别与宫颈病变关系*

郭桂兰，沙仁高娃，徐启英

(青海大学附属医院)

郭桂兰(1972～)，女，土族，青海籍，主任医师

青海高原藏族妇女生殖道感染HPV型别与宫颈病变关系*

郭桂兰，沙仁高娃，徐启英

(青海大学附属医院)

摘要目的研究青海高原藏族妇女生殖道感染HPV型别与宫颈病变关系。方法采集青海高原藏族妇女(1569例，机会筛查方法)子宫颈脱落细胞，采用核酸分子快速杂交基因分型技术进行HPV分型检测和液基薄层细胞学检查(TCT)，并选取其中HPV阳性318 例(其中194例细胞学异常)+HPV阴性但细胞学检查异常23例+HPV阴性且细胞学检查无异常但临床症状重者(如接触性出血)5例共346例，进行阴道镜下异常转化区定位活检、病理检查。以病理检查结果为最终诊断标准。结果1569例中HPV阳性318例，HPV阳性率为20.27 %，单一型病毒感染较为常见。出现频次在前的HPV型别依次为HPV16、HPV58、HPV52、HPV39、HPV53、多重感染、HPV33型，致病风险排名前5位的依次是HPV16、HPV33、HPV18、HPV39、HPV31型，其中HPV16型致病风险显著高于其他分型。随着年龄增长，HPV阳性率有升高趋势，但各年龄段的HPV阳性率比较，差异无统计学意义(χ2=0．948，P>0．05)。多重感染不增加子宫颈病变致病风险(r=0.132，P>0.05)。不同程度子宫颈组织病变中，随着病变程度的加重，HPV16型阳性率呈增加趋势，差异有显著性(χ2=6.041，P=0.014)。结论青海高原藏族妇女HPV感染率为20.27 %，最常见型别是HPV16、HPV58、HPV52、HPV39、HPV53及多重感染型。以单一感染为主，多重感染以HPV16合并其他型别为主。多重感染不增加子宫颈病变致病风险；HPV感染在各年龄段分布无差异。宫颈病变严重程度与感染HPV型别的致病能力密切相关。随着病变程度的加重，HPV16型别阳性率呈增加趋势。

关键词青海藏族妇女HPV型别宫颈上皮内瘤变

项目基金*：青海省科技厅科研(2014-ZJ-740)

中图分类号R37

文献标识码识码A

DOI：10.13452/j.cnki.jqmc.2015.02.007

AbstractObjectiveTo Investigate the relationship between human papolluma virus(HPV)subtypes and cervical lesion in Tibetan women living at plateau area.Methods 1569 Tibetan women from plateau area were selected to perform HPV genotyping test and thin liquid-based cytology test(TCT)．Meanwhile，346 cases were performed transformation abnormal area located biopsy under colposcopy and pathological examination．The final diagnosis was determined by the result of pathological examination.Results HPV positive rate was 20.27%(318/1569)in this study．The single type of HPV infection was more common．The leading frequency of HPV types in the order were HPV16，HPV58，HPV52，HPV39，HPV53，multiple infection.HPV33 was easy to cause infections.The pathopoiesis risk at top five was HPV16，HPV33，HPV18，HPV39，HPV31.Among them，The HPV16 showed highest risk than the other types．The positive rate of HPV increased following the age growth.But there was no significant difference between age and HPV positive rate(χ2=0．948，P>0．05)．Multiple infection did not increase the risk of cervical lesions (r=0．132，P>0．05)．Following the degree of pathological changes became much sever，the HPV 16 positive rate was increased.(χ2=6.041，P=0.014).Conclusions The HPV infection rate in Tibetan women at Qinghai plateau was 20.27%；The leading frequency of HPV types in the order are HPV16，HPV58，HPV52，HPV39，HPV53，multiple infection，The single type of HPV infection is more common tiple infection generally caused by HPV16 complicated with other types.Multiple infections don't increase the risk.The severity of cervical lesion is closely related to the pathogenic ability of HPV types；As the degree of pathological changes HPV 16 positive rate may increase.

KeywordsQinghaiTibetan womenHPV typeCervicallesions

收稿日期2015-01-03

THE RELATIONSHIP BETWEEN HUMAN PAPOLLUMA VIRUS

SUBTYPES INFECTION AND CERVICAL LESIONS IN

TIBETAN WOMEN LIVING AT PLATEAU AREA

Guo Guilan，Sharen Gaowa，Xu Qiying

(Department of Gynecology，the affiliated Hospital of Qinghai University，Xining，Qinghai 810001)

目前，研究发现不同HPV亚型的致病力不同，高危型HPV持续感染是子宫颈癌及其癌前病变发生、发展的必要条件[1]。尽管HPV感染通常在3年内消退，但有证据表明，在初次感染后的长期潜伏中，感染人群中的少部分人具有发展成为浸润性子宫颈癌的风险。因此，HPV DNA检测在子宫颈癌的筛查中有重要意义，为了解青海高原藏族妇女的HPV感染现患率及相应的HPV分型的数据，掌握感染HPV后宫颈病变发展状况，本研究应用核酸分子快速杂交基因分型技术对不同级别子宫颈病变患者行HPV基因分型检测，并与宫颈病变进行比较，现将结果报告如下。

1资料与方法

1.1　资料

采集青海高原藏族妇女(1569例，机会筛查方法)子宫颈脱落细胞。采集对象年龄18～71岁，平均年龄37岁；所有患者进行液基薄层细胞学检查(TCT)及HPV分型检测。选取HPV阳性和TCT结果诊断为LSIL、HSIL、ASC-H、ASCUS、NILM(临床症状明显如接触性出血)的患者共346例，进行阴道镜下异常转化区定位活检或病理检查。按5岁为1个年龄段，观察各年龄段妇女HPV感染情况。

1.2　方法

1.2.1取样：先用棉拭子将阴道或子宫颈口过多的分泌物擦拭干净，再用宫颈刷紧贴子宫颈口稍用力顺时针旋转5圈，然后放入有专用细胞保存液的试管中。以上标本于4 ℃保存，1周内测定。样本采集选择在非月经期，采样前3天禁用阴道内药物，前2天禁止性生活。

1.2.2TCT诊断：TCT诊断标准采用2001年Bethesda(the Bethesda system，TBS)标准。根据TCT结果分为NILM组、ASCUS组、ASC-H组、LSIL组和HSIL组。

1.2.3HPV分型检测：使用凯普HPV 21分型检测仪对1569例妇女进行HPV分型检测，一次性检测HPV6、HPV11、HPV42、HPV43、HPV44、HPV16、HPV18、HPV31、HPV33、HPV35、HPV39、HPV45、HPV51、HPV52、HPV53、HPV56、HPV58、HPV59、HPV66、HPV68、HPV81共21种型别(本研究去除低危HPV)。判断单一或多重感染。用一次性子宫颈细胞收集器采集子宫颈脱落细胞标本并于4 ℃保存。HPV分型检测的实验操作及结果判读参考试剂盒说明书。

1.2.4子宫颈组织病理学诊断：对TCT结果为ASCUS、LSIL、HSIL、ASC-H，NILM但临床诊断为有接触性出血者共346例妇女进行阴道镜下宫颈多点活检、组织病理诊断。病理诊断结果根据病变程度分为正常或炎症组、CIN I组、C1N II组、CINⅢ组及子宫颈癌组。

1.2.5统计学处理：应用SPSS 12．0软件进行数据的统计学处理。不同组别及不同型别HPV阳性率比较采用χ2检验，检验水准α=0.05。

2结果

2.1　HPV感染情况及型别分布(表1)

表1 HPV感染情况(检出率%)

表1显示，1569例检测者中阳性318例(20.27%)，HPV型别出现频次依次为HPV16(33.01%)、HPV58(16.04%)、HPV52(11.95%)、多重感染(10.38%)、HPV39(5.35%)、HPV53(5.35%)、HPV33(5.03%)、HPV31(4.09%)、HPV18(3.46%)。其余分型均少于2%。多重感染中HPV16型合并其他型别者20例，占60.61%。

2.2　不同年龄段妇女的HPV感染率(表2)

表2　不同年龄段妇女的HPV感染率

表2显示，HPV感染阳性率在50～54岁最高(24.16%)，60岁以上女性HPV阳性率降低至15.38%，但各年龄段阳性率差异无统计学意义(χ2=0.903，P=0.342)。HPV16在45岁～50岁感染率最高(7.92%)，在60岁以上组最低(4.49%)，各年龄段的阳性率比较差异无显著性(χ2=0.474，P=0.491)。

2.3　不同类型HPV感染与子宫颈病变程度的相关性

2.3.1318例HPV阳性者均进行阴道镜活检及病理学诊断，不同类型HPV感染者宫颈病变患病率(包括CIN，CA)比较，依次为HPV16(47.62%)、HPV39(41.18%)、HPV31(38.46%)、HPV33(37.50)、HPV52(36.84%)、HPV18(36.36%)。其他(HPV59、HPV51、HPV68、HPV66、HPV35、HPV56、HPV45)患病率为35.30%。患病率比较，HPV16、HPV 39、HPV 31、HPV 33、HPV 52、HPV 18型较其他型别差异显著(χ2=16.302，P<0.05)。

2.3.2HPV阳性病例中病理组织为炎症或正常者占61.32%(195/318)，病理组织异常者占38.68%(123/318)。其中CINⅠ23.90%(76/318)、CINⅡ11.01%(35/318)、CINⅢ2.83%(9/318)、CA0.94%(3/318)。

2.3.3为了比较不同型别的危险度，将子宫颈病变按病理结果分为低级别病变(≤CIN I)、高级别病变(≥CIN Ⅱ)进行比较。致病风险(指CINⅡ及以上级别)依次为HPV16(20.0%)、HPV33(18.75%)、HPV18(18.18%)、HPV39(17.65%)、HPV31(15.38%)、多重感染型(12.12%)、HPV58(10.52%)、HPV52(9.8%)，其他HPV总致病风险为5.88%。致病风险比较，HPV16、HPV33、HPV18、HPV39、HPV31较其他型别差异有显著性(χ2=157.786，P<0.05)。

2.3.4不同程度子宫颈组织病变中，随着病变程度的加重，HPV16型阳性率呈增加趋势[CINⅠ(29/76，38.2%)，CINⅡ(14/35，40.0%)，CINⅢ(5/9，55.6%)，CA(2/3，66.7%)]，差异有显著性(χ2=6.041，P=0.014)。见表3。

表3　318例HPV感染类型与病理诊断结果比较

*：其他包括HPV59、HPV51、HPV68、HPV66、HPV35、HPV56、HPV45，每种型别例数均少于5例，未单独分析.

2.4　TCT、HPV定性检测与病理检查结果的比较(表4)

表4　346例TCT检查结果、HPV定性检测与病理诊断结果的比较(患病率%)

续表：

对HPV阳性318例(其中181例同时细胞学检查异常)+HPV阴性但TCT异常23例+HPV阴性并细胞学检查无异常但有接触性出血5例总共346例患者的组织病理诊断、TCT结果以及HPV检测结果进行对比，以组织病理学诊断结果为最终确诊结果。

实际病理检查：宫颈病变140例(CINⅠ87例+CINⅡ40例+CINⅢ10例+宫颈癌3例、HPV及TCT2例均阴性 )，HPV阳性组检出宫颈病变123例 (CINⅠ76例+CINⅡ35例+CINⅢ9例+宫颈癌3例)，检出率87.86%，TCT阳性组宫颈病变检出率84.29%。两者结合检出率(4例均阴性)97.14%。

3讨论

3.1　HPV感染分布特点及检测意义

不同国家、不同地区HPV型别分布具有一定的差异性。据IARC统计[2]，HPV16、HPV18是在世界范围内常见的HPV感染型别，其阳性率分别为57.4%、16．6%，之后为HPV45(6．8%)、HPV31(4.3%)、HPV33(3．7%)、HPV52(2．5%)、HPV58(2．3%)等。在中国的子宫颈癌患者中，HPV16、HPV18、HPV52、HPV58阳性率高于其他型别，尤其是HPV52、HPV58在中国南方地区较为常见[3]。本研究结果显示，青海藏族妇女感染HPV阳性率前5位的型别分别为HPV16、HPV58、HPV33、HPV18、HPV52，与才仁卓玛研究结果相似[4]。对于年龄与HPV感染的相关性，有报道称在年轻和年长妇女中会出现两个峰值[5]，但本研究结果中，HPV感染阳性率在50～54岁为最高(24.16%)，60岁以上女性HPV阳性率降低至15.38%，但各年龄段阳性率差异无统计学意义(χ2=0.903，P=0.342)。与研究[3]不一致，可能与本研究组随机抽取样本有关。HPV16型在各年龄段的分布比较差异无统计学意义。本研究中，单一感染患者所占比例为89.62%(285/318)，而多重感染患者比例占10.38%(33/318)，在多重感染者中，以二重感染最为常见，且主要为HPV16型合并其他类型感染。关于多重感染是否与病变程度具有相关性，仍然存在一定的争议。本研究结果示多重感染未增加子宫颈癌的发生概率，与陶萍萍[6]研究结果一致。

3.2　HPV感染与宫颈病变的相关分析

目前研究结果显示，HPV16和HPV18型的致癌能力较强，60%以上的子宫颈癌与其相关，HPV16主要引发子宫颈鳞癌，而HPV18主要导致子宫颈腺癌[7]。本研究结果显示致病风险依次为HPV16(20.00%)、HPV33(18.75%)、HPV18(18.18%)、HPV39(17.65%)、HPV31(15.38%)。较他型别差异有显著性(χ2=157.786，P<0.05)。其中HPV16致病风险最高。本组宫颈癌2例均为HPV16型阳性，提示HPV16型可能具有较强的致癌性。

本研究显示，在不同程度宫颈组织病变中，随着病变程度的加重，HPV16型别阳性率呈增加趋势[CINⅠ(29/76，38.2%)，CINⅡ(14/35，40.0%)，CINⅢ(5/9，55.6%)，CA(2/3，66.7%)]，差异有显著性(χ2=6.041，P=0.014)。与国内部分研究一致，该研究[8]认为随着病变程度加重，HPV16阳性率呈现上升趋势。

本研究显示，HPV阳性病例中病理组织异常者占38.68%(123/318)。其中CINⅠ23.90%(76/318)、CINⅡ11.01%(35/318)、CINⅢ2.83%(9/318)、CA0.94%(3/318)。

ASCUS组病理结果≥CINⅡHPV阳性6例(6.4%)，而HPV阴性为0。ASC-H组病理结果≥CINⅡHPV阳性9例(69.2%)，而HPV阴性1例(50.0%)。LSIL组病理结果≥CINⅡHPV阳性6例(11.8%)，而HPV阴性为0，在HSIL组结果相近。因此，HPV检测可以对细胞学低度病变者进行有效分层，提高对高级别病变的检测率。HPV检测联合细胞学检查，利于提高子宫颈病变的诊断率。

参考文献

[1]Parkin DM，Bray F，Ferlay J，et a1．Global cancer statistics[J].CA Cancer J Clin，2005，55：74-108.

[2]Mufioz N，Bosch FX，Castellsagu6 X，et a1．Against which humanpapiHomavims types shall we vaccinate and screen Theinternational perspective[J]．Int J Cancer，2004，111：278-285．

[3]乌兰娜，吴瑞芳，周艳秋，等.乳头瘤病毒基因型与宫颈病变的关系[J]．中国妇产科临床杂志，2005，6：346-350．

[4]才仁卓玛，张建青，魏春梅，等.高原地区藏族妇女宫颈人乳头瘤病毒及其亚型分布状况的调查[J]．中国计划生育学杂志，2014，6：399-402.

[5]Castle PE，Schiffman M，Hen′ero R，et a1．A prospective study of age trends in cervical human papillomavirus acquisition andpersistence in Guanacaste，Costa Rica[J]，J Infect Dis，2005，191：1808-1816．

[6]陶萍萍，卞美璐，李敏，等．HPV多重感染与宫颈病变关系探讨[J]．中国妇产科临床杂志，2006，7：94-96．

[7]杨英捷，赵健，李雪倩，等．人乳头状瘤病毒不同亚型感染与宫颈病变的相关性[J]．中国妇产科临床杂志，2006，7：253-256．

[8]刘国忠，于黎明，宋海燕，等.HPV分型检测在子宫颈病变诊断中的应用[J]，中华妇产科杂志，2014，49：446-451.

[9]武明辉，张淞文，张为远，等．北京地区已婚妇女生殖道高危型人乳头状瘤病毒感染与宫颈病变相关性研究[J]，中华流行病学杂志，2010，31：133-138.