原发性膜性肾病患者血清BAFF水平变化及其临床意义

原发性膜性肾病患者血清BAFF水平变化及其临床意义

马东红，刘云，许清玉，张璐，崔艳，郭明好

(新乡医学院一附院，河南新乡453100)

摘要：目的观察原发性膜性肾病(PMN)患者血清B淋巴细胞活化因子(BAFF)水平变化，并探讨其临床意义。方法 选择PMN患者30例(观察组)、查体健康者10例(对照组)，采用ELISA法检测血清BAFF水平，对BAFF水平与尿蛋白定量、血浆白蛋白、CD20计数进行Spearman相关性分析。结果观察组与对照组血清BAFF水平分别为(1 663.73±548.72)、(894.60±206.83)pg/mL，两组比较，P<0.05。BAFF水平与24 h尿蛋白定量、CD20计数呈正相关(r分别为0.781、0.678，P均<0.05)，与血浆白蛋白水平呈负相关(r=-0.755，P<0.05)。结论 PMN患者血清BAFF水平明显升高，BAFF在PMN发病中可能起重要作用。

关键词：原发性膜性肾病；B淋巴细胞活化因子；肾病综合征

doi：10.3969/j.issn.1002-266X.2015.45.029

中图分类号：R692文献标志码：B

收稿日期：(2015-06-16)

有研究证实，PMN患者体内的B淋巴细胞在Th2细胞所分泌的IL-4和IL-10等细胞因子的作用下，分泌IgG4亚型的功能明显增强[1]；B淋巴细胞的激活参与PMN发病[2～4]。B淋巴细胞活化因子(BAFF)参与调节B淋巴细胞发育、分化及抗体的产生，而且还参与T淋巴细胞的活化和应答过程，在体液免疫和细胞免疫中有重要作用[5]；IgA肾病患者外周血BAFF明显升高，其水平与肾脏病理改变呈明显正相关[6,7]。但PMN患者体内血清BAFF水平与其临床特征的关系国内外鲜有报道。2013年6月～2014年12月，我们观察了PMN患者外周血BAFF水平变化，并探讨其临床意义。

1资料与方法

1.1临床资料选择本院肾内科住院的PMN患者30例(观察组)，男18例、女12例，年龄(42.5±15.12)岁。入选标准：①年龄≥18岁；②经肾活检诊断为膜性肾病；③近3个月内未使用过糖皮质激素及环磷酰胺、他克莫司、霉酚酸酯、环孢素等免疫抑制剂；④血肌酐<133 μmol/L。排除标准：自身免疫性疾病；乙型肝炎、丙型肝炎、艾滋病、结核、肺炎等急慢性感染性疾病；恶性肿瘤；糖尿病、高血压及妊娠期。选取同期查体健康者10例(对照组)，男6例、女4例，年龄(39.8±11.7)岁。两组性别、年龄比较差异无统计学意义。

1.2血清BAFF、尿蛋白定量、肝肾功能、血糖及CD20检测两组研究对象晨起空腹采集静脉血4 mL，室温放置2 h，1 000 r/min离心20 min，取上清液，-80 ℃保存，采用ELISA法(试剂盒购自CUSABIO公司)检测血清BAFF。研究对象入院时即留取尿、血标本送检，采用邻苯三酚红比色法检测24 h尿蛋白定量，酶法检测血肌酐(Cr)、尿酸(UA)、空腹血糖(GLU)、胆固醇(CHO)、甘油三酯(TG)，溴甲酚绿法检测血浆白蛋白(ALB)，速率法检测血尿素氮(BUN),流式细胞术检测外周血CD20。

2结果

2.1两组血清BAFF、尿蛋白定量、肝肾功能、血糖及CD20水平比较结果见表1。

2.2PMN患者血清BAFF水平与24 h尿蛋白定量、血浆ALB水平及CD20计数的关系Spearman相关性分析显示，血清BAFF水平与尿蛋白定量呈正相关(r=0.781，P=0.000)，与血浆白蛋白水平呈负相关(r=-0.755，P=0.000)，与CD20计数呈正相关(r=0.678，P=0.000)。

3讨论

尽管PMN具体发病机制尚不明确，但既往国内外多项研究均发现PMN患者体内存在明显淋巴细胞异常，主要表现为调节性T细胞水平降低，B淋巴细胞水平上调，且病情缓解后上述异常得以纠正[2,8]。另有学者应用抗B细胞的单克隆抗体治疗PMN，病情迅速缓解。因此，目前多数学者认为B淋巴细胞功能异常在PMN的发病中起重要作用。B淋巴细胞被异常活化后，可介导机体体液免疫，识别呈递抗原，足细胞靶抗原成分与相应抗体形成原位免疫复合物，激活补体导致局部组织损伤，从而发生PMN。我们前期研究发现，PMN患者外周血CD19+细胞计数占总淋巴细胞的比例显著升高，表现出明显的B淋巴细胞异常激活，且CD19+细胞计数与蛋白尿定量有关[9]，与国内外多数学者的研究结果一致。

表1　两组血清BAFF、24 h尿蛋白定量、肝肾功能、血糖及CD20水平比较

组别nUA(μmol/L)CHO(mmol/L) TG(mmol/L) GLU(mmol/L) CD20(%) 观察组30316.50±88.578.12±2.21*2.57±1.68*5.99±3.3021.10±6.79*对照组10331.13±114.834.16±1.031.41±1.405.25±2.2215.10±5.13

注：与对照组比较，*P<0.05。

BAFF是肿瘤坏死因子配体超家族的一个重要成员，1999年最先由Mukhopadhyay等克隆成功。BAFF主要表达于髓样单核细胞系，有很强的B细胞趋向性，作为一种淋巴细胞的共刺激因子，BAFF对活化B细胞有强烈的促进增殖和分化的刺激作用，还参与了T细胞的活化与应答[5]。BAFF主要通过与其受体BAFF-R结合发挥上述作用[10]。近年来，越来越多研究证实，BAFF参与多种自身免疫性疾病的发生[11]。本研究发现，PMN患者体内BAFF水平明显升高，与对照组比较有统计学差异；且BAFF水平与CD20计数呈正相关，说明BAFF可激活B淋巴细胞的活性；BAFF水平与24 h尿蛋白定量呈正相关，与血浆ALB水平呈负相关，说明B淋巴细胞活性越强，PMN患者的肾脏损害越明显，临床表现越重。

长期以来，糖皮质激素和烷化剂是治疗PMN的首选药物。尽管当前针对PMN的治疗方案能有效减少或控制蛋白尿，甚至有部分患者可自行缓解，但仍有多数患者对上述药物不敏感[12]。其他针对B细胞如BAFF融合蛋白片段、B淋巴细胞激活因子抑制剂如BAFFR-Ig和TACI-Ig、抗CD22单抗等用于治疗SLE、ANCA相关性血管炎的临床试验正在进行中[13]，上述新药是否对PMN患者有效，需大量基础研究支持。

综上所述，PMN患者血清BAFF水平明显升高，血清BAFF水平与24 h尿蛋白定量、CD20计数呈正相关关系，与血浆白蛋白水平呈负相关关系。推测BAFF在PMN发病中起重要作用；BAFF抑制剂或单克隆抗体有望为PMN患者提供新的治疗方法。

参考文献：

[1] Kuroki A, Iyoda M, Shibata T, et al. Th2 cytokines increase and stimulate B cells to produce IgG4 in idiopathic membranous nephropathy[J]. Kidney Int, 2005,68(1):302-310.

[2] 王波,刘志红,吴燕,等.特发性膜性肾病患者调节性T细胞和B淋巴细胞的变化及其临床意义[J].肾脏病与透析肾移植杂志,2009,18(4):322-328.

[3] Busch M, Rüster C, Schinköthe C, et al. Rituximab for the second- and third-line therapy of idiopathic membranous nephropathy: a prospective single center study using a new treatment strategy[J]. Clin Nephrol, 2013,80(2):105-113.

[4] Cravedi P, Remuzzi G, Ruggenenti P. Rituximab in primary membranous nephropathy: first-line therapy, why not[J]. Nephron Clin Pract, 2014,128(3-4):261-269.

[5] Moisini I, Davidson A. BAFF: a local and systemic target in autoimmune diseases[J]. Clin Exp Immunol, 2009,158(2):155-163.

[6] Shao J, Peng Y, He L, et al. Capsaicin induces high expression of BAFF and aberrantly glycosylated IgA1 of tonsillar mononuclear cells in IgA nephropathy patients[J]. Hum Immunol, 2014,75(10):1034-1039.

[7] Li W, Peng X, Liu Y, et al. TLR9 and BAFF: their expression in patients with IgA nephropathy[J]. Mol Med Rep, 2014,10(3):1469-1474.

[8] Wang B, Zuo K, Wu Y, et al. Correlation between B lymphocyte abnormality and disease activity in patients with idiopathic membranous nephropathy[J]. J Int Med Res, 2011,39(1):86-95.

[9] 马东红,郭明好,许清玉,等.原发性膜性肾病患者外周血淋巴细胞亚群的变化及其与蛋白尿的关系[J].检验医学与临床,2015,12(1):55-57.

[10] Liu Z, Davidson A. BAFF inhibition: a new class of drugs for the treatment of autoimmunity[J]. Exp Cell Res, 2011,317(9):1270-1277.

[11] Davidson A. Targeting BAFF in autoimmunity[J]. Curr Opin Immunol, 2010,22(6):732-739.

[12] Ardalan M. Triggers, bullets and targets, puzzle of membranous nephropathy[J]. Nephrourol Mon, 2012,4(4):599-602.

[13] Lenert A, Lenert P. Current and emerging treatment options for ANCA-associated vasculitis: potential role of belimumab and other BAFF/APRIL targeting agents[J]. Drug Des Devel Ther, 2015,(9):333-347.