黄蘑多糖对多器官衰老小鼠氧自由基水平的影响

黄蘑多糖对多器官衰老小鼠氧自由基水平的影响

陆艳娟李晓梅李晓林

(吉林大学基础医学院生物化学与分子生物学实验中心，吉林长春130021)

摘要〔〕目的研究黄蘑多糖对多器官衰老小鼠脑、心、肝、肾组织中谷胱甘肽(GSH)和谷胱甘肽还原酶(GR)的影响。方法比色分析法测GSH、 GR含量变化。结果黄蘑多糖小鼠脑、心、肝、肾GSH含量明显高于对照组(P<0.01;P<0.05); 黄蘑多糖小鼠脑、心、肝、肾GR含量明显高于对照组(P<0.01;P<0.05)。结论黄蘑多糖能提高衰老小鼠机体GSH、 GR活力，增强机体抗氧化能力。

关键词〔〕黄蘑多糖；多器官衰老;谷胱甘肽；谷胱甘肽还原酶

中图分类号〔〕R28〔文献标识码〕A〔

通讯作者：李晓梅(1959-)，女，研究员，主要从事生物化学与分子生物学教学与实验研究。

第一作者：陆艳娟(1963-)，女，高级工程师，主要从事生物化学与分子生物学教学与实验研究。

人体衰老及与之相关的老年疾病呈上升趋势〔1〕。机体抗氧化酶活性随着年龄的增长不断下降，氧自由基的清除能力不断减弱，从而影响组织正常功能，成为衰老退行性变的重要因素〔2，3〕。本实验观察多器官衰老小鼠谷胱甘肽(GSH)、谷胱甘肽还原酶(GR)受黄蘑多糖的影响，探讨黄蘑多糖组分抗衰老作用机制。

1材料与方法

1.1实验动物健康雄性清洁级小鼠30只，12月龄，体重(50±5)g,本校实验动物中心提供。实验动物随机分为对照组和碱溶液黄蘑多糖(Fb-2b)组、水溶性黄蘑多糖(Fw-2b)组，每组10只。黄蘑多糖组按40 mg·kg-1·d-1剂量灌服黄蘑多糖Fb-2b、黄蘑多糖Fw-2b，对照组灌服生理盐水0.5 ml/只，连续6 w。

1.2实验方法

1.2.1试剂及仪器黄蘑多糖Fb-2b、Fw-2b由本校生物化学教研室提供。GSH、 GR试剂盒购于南京建成生物工程公司。冷冻高速离心机，德国产；722S型分光光度计，上海分析仪器厂。

1.2.2黄蘑多糖Fb-2b和Fw-2b的提取、分离和组成分析吉林省长白山野生黄蘑子实体，70℃通风干燥，100目粉碎。乙醇浸泡去除醇性低分子物质，沸水浴提取水溶性多糖，DEAE纤维素离子交换层析分离碱性多糖，过滤法分离出不同分子量的多糖Fb-2b主峰，气相色谱测定多组分构成糖。用氨基酸分析仪对经盐酸处理的糖蛋白分解产物进行氨基酸组分分析，用硫酸-酚法测定总糖含量，改良Lowry氏法测定总蛋白含量。

1.2.3GSH、 GR测定与取材各组动物6 w实验结束后处死，迅速取所需的脑、心、肝、肾组织，生理盐水漂洗，滤纸吸干残液，制成10%组织匀浆，4℃，10 000 r/min离心15 min，上清液测定GSH、 GR，按试剂盒说明书操作，同时Lowry氏法测定蛋白质含量。主要观察指标：各组小鼠脑、心、肝、肾组织GSH、 GR含量变化。

2结果

黄蘑多糖组小鼠脑、心、肝、肾GSH、GR含量明显高于对照组(P<0.01，P<0.05)。见表1，表2。

表1各组小鼠脑、心、肝、肾GSH含量变化

组别脑心肝肾对照组11.89±1.368.76±0.447.53±0.2320.05±1.54Fb-2b组13.23±1.211)10.01±0.752)8.67±0.352)24.74±1.691)Fw-2b组15.80±0.982)9.98±0.602)7.95±0.212)23.21±1.011)

与对照组比较：1)P<0.05，2)P<0.01，下表同

表2各组小鼠脑、心、肝、肾GR含量变化

组别脑心肝肾对照组3.44±0.472.77±0.494.31±0.313.62±0.58Fb-2b组3.98±0.542)4.17±0.352)4.69±0.111)4.19±0.482)Fw-2b组3.86±0.281)3.18±0.361)4.59±0.211)4.14±0.292)

3讨论

黄蘑又名金顶侧耳、金顶蘑，主要产于长白山及大兴安岭地区秋霜期之前，具有疏风活络、强筋壮骨作用。现今，黄蘑多糖研究日益受到关注，有学者甚至提出21世纪是多糖世纪。研究表明，黄蘑多糖具有生物活性，具有包括免疫调节、降血糖、降血脂、抗肿瘤、抗辐射、抗衰老作用〔4～6〕；又是细胞和细胞器结构的重要部分，是人体细胞或器官维系正常功能不可缺少的重要成分。自由基的含量变化是人体系统衰老的重要指标之一，老年人体内抗氧化物酶均随增龄而有所减少〔7〕。研究认为，在正常情况下，机体自由基的产生和消失处于动态平衡状态，即自由基在不断产生，同时也不断被消除，以维持机体正常代谢〔8〕。黄蘑多糖是含葡萄糖，为主要构成糖的β-D-葡聚糖，具有提高抗氧化酶活性的作用，本实验研究发现多糖Fb-2b 、多糖Fw-2b能够明显提高衰老小鼠重要组织中GSH、GR含量。

多糖Fb-2b 、多糖Fw-2b具有多种生理功能，是黄蘑中重要的生物活性物质，这种多糖表现出明显的抗氧化性，即对氧自由基(·O2-、·O2、H2O2)的清除能力。本实验证明，黄蘑多糖能明显增强老龄小鼠脑、心、肝、肾组织抗氧化能力，提高GSH、 GR活性，具有延缓细胞衰老的作用。

4参考文献

1沈明花，李巍，金梅花.小黄蘑多糖对H22小鼠的抗肿瘤作用研究〔J〕.中草药，2013;44(17):2433-6.

2黄月，李巍，王昱娇，等.小黄蘑多糖的抗氧化作用〔J〕.延边大学医学学报,2012;35(2):91-3.

3唐晓丹，张伟，丛景香，等.黄蘑多糖提取工艺及纯化研究〔J〕.食品科技,2011;36(3)：155-8.

4马岩，张锐，于小风，等. 黄蘑多糖提取物的抗肝癌作用及其机制〔J〕.吉林大学学报(医学版),2005;31(6)：886-9.

5陈强，李玲，姜虹，等. 黄蘑多糖对小鼠骨瘤细胞染色体的辐射防护作用〔J〕.中华放射医学与防护杂志,2005;25(2)：141-2.

6李晓林，孙国光，马岩. 黄蘑多糖不同组分对D-半乳糖致衰老模型小鼠SOD、MDA的影响〔J〕.中国老年学杂志,2006;26(1)：86-8.

7沈明花，崔海丹，王欣彤.榛黄多糖的抗氧化作用研究〔J〕.食品科技，2010；35(5)：77-9.

8马岩，马影喆，张家颖，等.黄蘑多糖Fb对小鼠免疫功能的调节作用〔J〕.吉林大学学报(医学版),2005;31(5)：692-5.

〔2015-06-07修回〕

(编辑曲莉/滕欣航)