冠心病患者血清中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白的表达及其临床意义

贾 方，王彦军，朱 琳，俞天虹，孙建辉

（常州市第一人民医院心内科，江苏常州213003）

冠心病患者血清中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白的表达及其临床意义

贾 方，王彦军，朱 琳，俞天虹，孙建辉

（常州市第一人民医院心内科，江苏常州213003）

目的：探讨冠心病患者血清中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（neutrophi1 ge1atinase-associated 1ipoca1in，NGAL）的表达及临床意义。方法：选取因胸闷、胸痛入住心内科患者110例，根据冠脉造影结果及临床表现分为急性冠脉综合征（ACS）组33例、稳定型心绞痛（SAP）组32例和对照组45例。比较3组间的临床资料、血清NGAL水平，分析NGAL与冠心病相关性，并观察其与冠脉病变支数及Gensini积分的关系。结果：ACS组、SAP组血清NGAL水平均明显高于对照组（P＜0.05），ACS组血清NGAL水平明显高于SAP组（P＜0.05）。随着冠脉病变支数增加，冠心病患者血清NGAL水平增高（F=17.468，P＜0.05），且与Gensini积分呈正相关（r=0.327，P＜0.01）。简单及偏相关分析均显示，血清NGAL水平与冠心病呈正相关性；多因素Logistic回归分析显示，NGAL是冠心病发生的独立危险因素（0R=1.059，P＜0.01）。结论：NGAL不仅能对粥样斑块稳定性具有提示性，且与冠脉病变程度呈正相关，可作为冠心病发生的独立危险因素。

中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白；冠心病；斑块稳定性；Gensini积分

动脉粥样硬化的慢性炎症过程是冠心病的病理基础，而中性粒细胞参与这一炎症反应。中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（neutrophi1 ge1atinaseassociated 1ipoca1in，NGAL）被认为是中性粒细胞活化和肾功能衰竭的标志物，并且与胰岛素抵抗和动脉粥样硬化有关［1］。基础研究表明NGAL能调节炎症反应，影响基质金属蛋白酶活性，调节心肌细胞能量代谢，在冠心病的发生发展中起重要作用［2］。本研究拟通过测定不同类型冠心病患者的血清NGAL水平，探讨NGAL水平与冠心病之间的关系，为其临床应用提供理论依据。

1 对象与方法

1.1 病例及分组

选取本院2014年2月至11月因胸闷、胸痛住院并行冠脉造影患者110例，根据临床表现和冠脉造影结果分为急性冠脉综合征（acute coronary syndrome，ACS）组33例、稳定型心绞痛（stab1e angina pectoris，SAP）组32例和对照组（冠脉造影正常或冠脉狭窄＜50％）45例。同时，将65例冠心病患者根据冠脉造影结果再进一步分为1支病变组（27例）、2支病变组（16例）和3支病变组（22例）。冠心病诊断标准：严格按照2012年美国心脏协会/美国心脏病学会（AHA/ACC）关于冠心病的诊断标准筛选病例，并且冠脉造影证实至少有1支冠状动脉的狭窄≥50％。SAP和ACS诊断标准：均符合美国心脏病学会（ACC）和美国心脏病协会（AHA）的标准。排除标准：感染性疾病、自身免疫性疾病、严重心力衰竭、肿瘤及肝肾疾病患者。

1.2 方法

1.2.1 一般资料的收集 所有入选患者均记录性别、年龄、吸烟史、高血压病史、糖尿病史，测量身高、体质量，计算体质量指数（BMI）。

1.2.2 血样采集 入选患者均禁食8～10 h，次日清晨空腹抽取外周静脉血进行三酰甘油、总胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、纤维蛋白原（Fg）及C-反应蛋白等指标检测；同时收集2 mL静脉血，室温半小时后4 000 r/min离心3 min，吸取血清置于-80℃冰箱保存直至使用。血清NGAL通过ELISA（丹麦BioPorto公司产品）测定，检出限为0.1 ng/mL。

1.2.3 冠脉血管病变程度评定 根据美国心脏病协会规定的冠状动脉血管图像积分分段评价标准，采用Gensini积分系统［3］对冠脉血管病变程度进行定量评定：狭窄≤25％为1分，26％～50％为2分，51％～75％为4分，76％～90％为8分，91％～99％为16分，100％为32分；将病变部位乘以相应系数：左主干病变×5；左前降支近段×2.5，中段得分× 1.5，远段得分×1；第一对角支×1；第二对角支× 0.5；左回旋支近段×2.5，中段得分×1.5，远段和后降支均×1，后侧支×0.5；右冠状动脉近、中、远段和后降支均×1。将各分支积分相加得出每例患者冠脉病变程度的Gensini积分。

1.3 统计方法

应用SPSS 19.0软件进行数据分析。符合正态分布的计量资料以±s表示，非正态分布的计量资料以中位数M（Q1，Q3）表示，计数资料以百分比表示。计量资料采用单因素方差分析，进一步两两比较采用LSD-t检验，方差不齐性采用Kruska1-Wa11is H检验，计数资料采用χ2检验。两变量间关系采用Spearman相关分析。二分类因变量回归分析采用多因素Logistic回归分析。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 一般临床资料比较

各组间一般临床资料比较显示，对照组、SAP组和ACS组年龄、性别、BMI、吸烟、高血压、糖尿病、三酰甘油、总胆固醇、HDL-C和Fg间差异无统计学意义（P＞0.05）；3组间LDL-C、C反应蛋白和Gensini积分差异有统计学意义（P＜0.05），见表1。

2.2 各组血清NGAL浓度的比较

对照组、SAP组和ACS组血清NGAL浓度分别为（26.92±10.67）ng/mL、（34.05±15.10）ng/mL和（41.72±15.44）ng/mL，3组间总体差异有统计学意义（F=11.372，P＜0.05）；ACS组、SAP组血清NGAL浓度均明显高于对照组（t值分别为4.759和2.273，P＜0.05），ACS组血清NGAL浓度明显高于SAP组（t=2.278，P＜0.05）。

2.3 冠脉病变程度与血清NGAL浓度的关系

按冠脉血管病变支数分组分析结果显示，随着血管病变支数增加，血清NGAL浓度增加，1支病变组血清NGAL浓度为（28.01±8.85）ng/mL，2支病变组为（38.74±15.09）ng/mL，3支病变组为（49.55±14.73）ng/mL，3组间总体差异有统计学意义（F=17.468，P＜0.05）；3支病变组、2支病变组血清NGAL浓度均明显高于1支病变组（t值分别为5.904和2.677，P＜0.01），3支病变组血清NGAL浓度明显高于2支病变组（t=2.590，P＜0. 05）。此外，血清NGAL浓度与Gensini积分呈正相关（r=0.327，P＜0.01）。

表1 各组患者临床基本资料的比较

2.4 血清NGAL浓度与冠心病发生的简单及偏相关分析

两者之间的简单相关分析显示，血清NGAL浓度与冠心病发生呈正相关（r=0.361，P＜0.05）；并且在控制性别、年龄、高血压、BMI、糖尿病、吸烟、三酰甘油、总胆固醇、LDL-C、HDL-C、Fg、C反应蛋白等入选因素后，两者之间仍具有正相关性（r=0.293，P＜0.05）。

2.5 多因素Logistic回归分析

以冠心病是否发生（1=是，0=否）为因变量，年龄、性别、BMI、吸烟、高血压、糖尿病、三酰甘油、总胆固醇、HDL-C、LDL-C、Fg、C反应蛋白和NGAL为自变量，进行Logistic回归分析。结果显示NGAL可能是冠心病发生的独立危险因素（0R=1.059，P＜0.01）。见表5。

表5 冠心病多重危险因素Logistic回归分析

3 讨论

炎症参与介导了动脉粥样硬化的发生和发展。急性冠脉综合征的发生与斑块的不稳定性和血栓形成密切相关，而炎症反应在不稳定斑块的形成、演变过程中具有至关重要的作用。研究表明NGAL可能在炎症方面起调节作用［4］。NGAL正常表达于中性粒细胞、肝实质细胞、肾小管上皮细胞、血管内皮细胞、平滑肌细胞等。血清NGAL水平增加与动脉粥样硬化、脑卒中、肾衰竭等系统性炎症反应相关。Hemdah1等［5］通过低氧诱导动脉粥样硬化模型，发现NGAL在动脉粥样硬化斑块尤其是高蛋白水解活性区域表达升高，表明NGAL可能对斑块的发生、发展和斑块的不稳定性具有重要作用。Soy1u等［6］对47例非ST段抬高型急性冠脉综合征（NSTE-ACS）患者入院时的血清NGAL以及冠脉造影结果进行统计分析，发现与造影结果正常的对照组相比，NSTEACS患者血清NGAL水平与Gensini积分以及危险分层评估（Grace评分）呈正相关。在本研究中，我们对比了冠心病不同亚组（ACS组和SAP组）和对照组患者血清中NGAL浓度，结果发现ACS组血清NGAL水平较SAP组和对照组明显升高，表明NGAL对粥样斑块不稳定性有一定的提示性。

NGAL对粥样斑块稳定性的影响主要与其对MMP-9活性的调节有关。粥样斑块结构的突然改变如斑块内出血、低氧状态等可诱导MMP-9表达的上调，现已证实，MMP-9是造成斑块不稳定的主要酶，是影响斑块稳定性的主要因素［7］。NGAL能以二硫键与MMP-9结合，降低金属蛋白酶抑制剂1（TIMP-1）的抑制作用，防止MMP-9被降解，延长其蛋白水解时间，使斑块内胶原分解过多［8］。NGAL、MMP-9的表达和形成复合物的调节影响细胞外基质的降解，继而影响纤维帽的稳定性。持续的血管损伤、炎性刺激以及应激导致NGAL的大量表达［1］，使MMP-9的活性增强，造成斑块不稳定性增加，从而导致不稳定心绞痛或心肌梗死等急性心血管事件的发生。

本研究中，我们还将冠心病患者按冠脉病变受累支数分组，发现随着病变支数增加，血清NGAL浓度也相应增加，并且NGAL与评价冠脉病变程度的指标Gensini积分呈正相关。由此，我们可以认为NGAL不仅能对冠心病患者粥样斑块稳定性具有提示性，且与冠脉病变的严重程度呈正相关。Cheng等［9］对768例因急性冠脉综合征或稳定型心绞痛行冠脉介入诊疗患者的一项随访研究发现，血浆NGAL/MMP-9水平与主要心血管不良事件呈正相关。Danie1s等［10］对1 393名无心血管疾病病史的社区居民进行平均11年的随访，结果表明NGAL水平与高致死率和高风险的心血管事件明显相关，并且独立于其他传统的心血管疾病危险因素以及患者肾功能状态。我们的研究对NGAL与冠心病的简单和偏相关分析，均发现NGAL与冠心病发生密切相关；以冠心病发生为因变量，年龄、性别、吸烟、高血压、糖尿病、BMI、三酰甘油、总胆固醇、HDL-C、LDLC、Fg、C反应蛋白和NGAL为自变量，行多因素Logistic回归分析，结果显示血清NGAL水平是冠心病发生的独立危险因素。NGAL在心血管疾病发生发展过程中起着复杂的调节作用。现有实验研究趋于支持NGAL具有负性调节炎症细胞介导的免疫反应、稳定细胞能量代谢的功能［11-12］；而由于炎症持续存在，NGAL和MMP-9复合物形成，可使胶原分解过多，引起斑块的不稳定［8］。然而现有NGAL在心血管疾病发生发展中作用机制的研究仍较少，NGAL的功能与活性尚有待进一步证实。

综上所述，血清NGAL水平与冠脉粥样斑块稳定性以及冠脉病变程度密切相关，且独立于其他传统的心血管疾病危险因素与冠心病发生呈正相关，可作为临床冠心病以及高危患者病情评估和预测斑块不稳定性的一个重要指标。

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Expression of serum NGAL in coronary heart disease patients and its clinical significance

JIA Fang，WANG Yan-jun，ZHU Lin，YU Tian-hong，SUN Jian-hui
（Department of Cardio1ogy，the First Peop1e′s Hospita1 of Changzhou，Changzhou Jiangsu 213003，China）

Objective：To investigate the expression of serum neutrophi1 ge1atinase-associated 1ipoca1in（NGAL）in patients with coronary heart disease（CHD），and to eva1uate its c1inica1 va1ue.Methods：A tota1 of 110 enro11ed patients were divided into acute coronary syndrome（ACS）group（33 cases），stab1e angina pectoris（SAP）group（32 cases）and contro1 group（45 cases）according to the c1inica1 manifestation and angiographic resu1ts.Serum NGAL 1eve1s measured by enzyme 1inked immunosorbent assay（ELISA）were compared among the groups.The corre1ation between serum NGAL 1eve1 and CHD was ana-1yzed.The association of NGAL with the number of diseased vesse1s and Gensini score were studied.Results：The serum NGAL 1eve1s in ACS group and SAP group were higher than that in contro1 group（P＜0.05）.And serum NGAL 1eve1 was significant1y higher in ACS group compared to SAP group（P＜0.05）. Statistica11y significant corre1ations were observed between NGAL 1eve1 and the number of diseased vesse1s（F=17.468，P＜0.05）and Gensini score（r=0.327，P＜0.01）. Simp1e and partia1 corre1ation ana1ysis showed that serum NGAL 1eve1 was positive1y corre1ated with CHD.In addition，mu1tivariate 1ogistic regression ana1ysis revea1ed that NGAL was an independent risk factor of CHD（0R=1.059，P＜0.01）. Conclusion：Serum NGAL 1eve1 was positive1y corre1ated with atherosc1erotic p1aque stabi1ity and coronary 1esions severity in patients with CHD.NGAL may serve as an independent risk factor of CHD.

neutrophi1 ge1atinase-associated 1ipoca1in；coronary heart disease；p1aque stabi1ity；Gensini score

R541.4

A

1671-7783（2015）06-0508-04

10.13312/j.issn.1671-7783.y150181

2015-08-14 ［编辑］ 何承志

贾方（1984—），女，河南平顶山人，主治医师，博士，主要从事动脉粥样硬化性疾病病理生理学机制及干预治疗研究。