礞石滚痰片质量标准研究

袁春筱

（重庆医科大学附属第二医院，重庆400010）

礞石滚痰片质量标准研究

袁春筱

（重庆医科大学附属第二医院，重庆400010）

目的建立礞石滚痰片的定性鉴别和含量测定方法。方法用薄层色谱（TLC）法定性鉴别礞石滚痰片中大黄素，用高效液相色谱（HPLC）法测定黄芩中黄芩苷含量。色谱柱为迪马C18柱（250 mm×4.6 mm，5 μm），流动相为甲醇-0.2%磷酸溶液（45∶55），流速为1.0 mL/min；检测波长为280 nm。结果TLC斑点清晰，分离度好，阴性对照无干扰；黄芩苷进样量在0.193 6～1.936 0 μg范围内与峰面积呈良好线性关系（r=0.999 9）；平均回收率为98.70%，RSD为0.56%（n=6）。结论该方法可用于礞石滚痰片的质量控制。

礞石滚痰片；质量标准；大黄素；黄芩苷

礞石滚痰片是由金礞石、沉香、大黄等的提取物制成的中药制剂，具有降火逐痰的功效，用于湿热顽痰、癫狂惊悸或咳嗽喘痰稠、大便秘结，临床疗效显著。其质量标准仅收载显微鉴别项目，未建立专属控制指标。李卿等［1］等采用高效液相色谱（HPLC）法测定礞石滚痰片中黄芩苷的含量［1］。为有效监测该制剂的产品质量，本研究中用薄层色谱（TLC）法对制剂中的大黄素进行定性鉴别，采用HPLC法测定黄芩中黄芩苷含量，为完善产品的质量控制体系提供了理论依据。

1 仪器与试药

Waters 2695型高效液相色谱仪（美国Waters公司）；薄层成像色谱仪（瑞士卡玛公司）；AE-240S型电子天平（梅特勒-托利多仪器＜上海＞有限公司）；KQ-400DB型数控超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）。黄芩苷对照品（批号为110715-200514，供含量测定用，中国药品生物制品检定所）；硅胶G预制薄层板（青岛海洋化工有限公司）；礞石滚痰片样品（市售）；缺大黄阴性样品（本院提供）；甲醇为色谱纯，水为超纯水，其余试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 大黄薄层色谱鉴别

取本品10片，研细，称取0.5 g，加甲醇20 mL，超声处理30 min，滤过，滤液蒸干，残渣加10%盐酸溶液15 mL使溶解，加热回流1 h，冷却，用乙醚提取2次，每次20 mL，合并乙醚液，挥干，残渣加甲醇2 mL使溶解，作为供试品溶液；另取大黄素对照品，加甲醇制成每1 mL含0.5 mg的溶液，作为对照品溶液；再称取缺大黄的阴性样品0.5 g，同法制成缺大黄的阴性对照品溶液。照薄层色谱法［（2010年版中国药典（一部）附录ⅥB］试验，吸取上述3种溶液各5μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚（30～60℃）-甲酸乙酯-甲酸（15∶5∶1）的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置氨蒸气中熏15 min后，日光下检视。供试品溶液色谱中，在与对照品溶液色谱相应位置上显相同颜色的红色斑点，阴性无干扰（见图1）。

图1 大黄薄层色谱鉴别图

2.2 黄芩苷含量测定

2.2.1 色谱条件与系统适用性试验

色谱柱：迪马C18柱（250mm×4.6mm，5 μm）；流动相：甲醇-0.2%磷酸溶液（45∶55）；流速：1.0 mL/min；检测波长：280 nm。理论板数以黄芩苷计算不低于3 000。精密吸取对照品溶液、供试品溶液和阴性对照品溶液各10 μL，进样测定。供试品溶液色谱中，在与对照品溶液色谱相应保留时间处有相应色谱峰，目标峰与相邻色谱峰分离度均大于1.5，见图2。

图2 高效液相色谱图

2.2.2 溶液制备

取本品10片，研细，取约0.1 g，精密称定，置100 mL容量瓶中，加70%乙醇适量，超声处理（功率100 W，频率40 kHz）30 min，放冷至室温，加70%乙醇至刻度，摇匀，用0.45 μm滤膜滤过，取续滤液，即得供试品溶液。称取黄芩苷对照品2.42mg，精密称定，置25 mL容量瓶中，加70%乙醇使溶解，并用70%乙醇定容至刻度，摇匀，即得对照品溶液。取不含黄芩的阴性样品适量，照供试品溶液制备方法，制备缺黄芩的阴性对照品溶液。

2.2.3 方法学考察

线性关系考察：精密吸取对照品溶液2，4，8，12，16，20 μL，注入液相色谱仪，以峰面积积分值（A）为纵坐标、进样量（C，μg）为横坐标进行线性回归，得回归方程A=3 049 533 C-156 477，r=0.999 9（n=6）。结果黄芩苷进样量在0.193 6～1.936 0 μg范围内与峰面积线性关系良好。

精密度试验：精密吸取同一对照品溶液，重复进样5次，进样量10 μL，测定峰面积。结果，黄芩苷峰面积的RSD为0.63%（n=5），表明仪器精密度良好。

稳定性试验：取同一供试品溶液，分别于0，1，3，6，12 h时注入高效液相色谱仪，测定黄芩苷峰面积。结果的RSD为0.71%（n=5），表明供试品溶液在12 h内稳定。

重复性试验：取同一批样品，按拟订方法平行制备供试品溶液5份，进样测定黄芩苷含量。结果的RSD为1.08%（n=5），表明该方法重复性良好。

加样回收试验：取本品内容物适量，研细，精密称定6份，分别加入黄芩苷对照品溶液适量，按供试品溶液制备方法制备待测溶液，依法进样，测定黄芩苷含量，计算回收率。结果见表1。

表1 黄芩苷加样回收试验结果（n=6）

2.2.4 样品含量测定

取不同批号样品，依法制备供试品溶液，进样测定，计算黄芩苷的含量。结果批号为140405，140501，140604的样品中分别含黄芩苷每片23.12，23.07，22.80 mg。

3 讨论

本试验中选用甲醇-水系统作流动相，参照2010年版《中国药典（一部）》［2］黄芩药材项下黄芩苷含量测定项下色谱条件，用甲醇-0.2%磷酸水溶液（45∶55）为流动相，能使样品中黄芩苷与相邻色谱峰达到基线分离，峰形对称，阴性对照无干扰。

黄芩苷在甲醇、乙醇中溶解性较好［3-9］，经多种溶剂试验筛选，选用70%乙醇作提取溶剂，样品超声处理30 min，放冷至室温，定容至100 mL，制得供试品溶液。按此方法制备的供试品溶液进行试验，操作简单，重复性好，回收率达到要求。

本试验中建立的鉴别大黄的薄层色谱法，能鉴别出大黄素对照品的特征性斑点；建立的测定黄芩苷含量的HPLC法精密度、稳定性、重复性均符合要求。

［1］李卿，陈志新，秦剑，等.高效液相色谱法测定礞石滚痰片中黄芩苷含量［J］.中国药业，2010，19（8）：38.

［2］国家药典委员会.中华人民共和国药典（一部）［M］.北京：中国医药科科出版社，2010：282-283.

［3］宋凤兰，何洋，何琳.葛根芩连滴丸的质量标准研究［J］.广东药学院学报，2014，30（4）：439-443.

［4］敖立实，孙宇光，赵俊华.高效液相色谱法同时测定黄连解毒丸中黄芩和大黄的含量［J］.中国医药指南，2014，12（15）：71-72.

［5］王跃茹，王利，陈卫东.HPLC法测定清肺饮中黄芩苷的含量［J］.现代中药研究与实践，2009，23（4）：61-62.

［6］佟若菲，张囡，林宏.HPLC法测定病毒合剂中黄芩苷、绿原酸和连翘酯苷A［J］.现代药物与临床，2014，29（3）：259-261.

［7］范全民.HPLC测定小儿退热口服液中绿原酸与黄芩苷含量［J］.现代中药研究与实践，2011，25（2）：72-74.

［8］刘金欣，孟繁蕴，张胜海.UPLC同时测定黄芩中黄芩苷、黄芩素、汉黄芩苷、汉黄芩素、千层纸素A［J］.中草药，2014，45（10）：1 477-1 480.

［9］王璐.HPLC法进行芩霍双清饮中黄芩苷的含量测定［J］.中国现代药物应用，2014，8（18）：235-236.

Quality Standard of Mengshi Guntan Pills

Yuan Chunxiao
（The Second Affiliated Hospital of Chongqing Medical University，Chongqing，China400010）

ObjectiveTo establish the methods of qualitative identification and content determination in Mengshi Guntan Pills.Methods The TLC method was used to qualitatively identify emodin，and the content of baicalin was determined by HPLC.The chromatographic column was Dikma C18column（250 mm×4.6 mm，5 μm），with methanol-0.2%phosphoric acid（45∶55）as the mobile phase and the detection wavelength was at 280 nm.ResultsThe TLC spots developed were fairy clear，and the blank test showed no interference.The linear ranges were 0.193 6-1.936 0 μg（r=0.999 9）.The average recavery rate was 98.70%,RSD was 0.56%（n=6）.Conclusion The established qualitative and quantitative analysis method is applicable for the quality control of Mengshi Guntan Pills.

Mengshi Guntan Pills；quality standard；emodin；baicalin

284.1；R286.0

A

1006-4931（2015）20-0083-03

2014-10-27；

2015-04-21）