45， X/46， XY 染色体嵌合型伴AZFb c区域缺失无精子症1例*

刘 鹏 李 静 孙建明 练 锋

1. 上海市第七人民医院男性病科（上海 200137）；

2. 上海市第七人民医院检验科； 3. 上海市第七人民医院超声诊断科

·临床经验·

45， X/46， XY 染色体嵌合型伴AZFb c区域缺失无精子症1例*

刘 鹏1李 静2孙建明1练 锋3

1. 上海市第七人民医院男性病科（上海 200137）；

2. 上海市第七人民医院检验科； 3. 上海市第七人民医院超声诊断科

染色体核型异常和相关基因的缺失、突变是引起男性不育的重要原因，患者多表现为无精子症、少精子症、性分化异常等。近些年来有关Y染色体微缺失检测的分子生物学分析越来越深入［1］。本文报道一例子代新生突变引起的Y染色体嵌合体核型合并Y染色体AZFbc区缺失无精子症，报道如下。

资料与方法

患者，男，28岁，2015年5月因婚后两年不育来本院门诊就诊，婚后未采取避孕措施且性生活正常，无吸烟史，不酗酒，第二性征正常，身高167cm，体质量56kg，生殖系统无器质性病变、无外伤，精液细菌培养阴性，支原体、衣原体检查阴性，血清抗精子总抗体阴性，体检未发现有明显睾丸、附睾及输精管异常，前列腺、精索静脉超声检查均未见异常。采用奥林巴斯CX31型显微镜及清华同方彩色精子自动分析系统，按参考文献［2］分析精液3次均未见精子（择日复查2次），精液离心后沉渣涂片Diff-Quik染色镜检未见精子、生精细胞及白细胞。血清性激素检测结果均正常，精浆果糖、酸性磷酸酶、α-葡糖苷酶和锌定量检测均正常。其配偶年龄27岁，身高160cm，体重50kg，血清性激素、支原体衣原体检测均正常，血清抗精子总抗体阴性、封闭抗体正常，染色体检查符合46， XX核型，经妇科检查未发现输卵管异常，卵泡监测等均正常。其父母非近亲结婚，其父经染色体核型分析结果为46， XY， Y染色体微缺失检测正常。患者有一长兄，已婚已育，染色体核型分析及Y染色体微缺失检测均正常。

结 果

一、精液分析

患者3次精液分析结果均未见精子，精液离心后沉渣涂片Diff-Quik染色镜检亦均未见精子、生精细胞及白细胞，确诊为无精子症。行精浆生化指标检测，结果显示：果糖（FRU）23.12mmol/L，酸性磷酸酶（ACP）1672U/mL，α-葡糖苷酶（α-GLUC）410.5 mmol/L，锌（Zn）2.67 mmol/L，各项指标均正常（正常参考值：FRU 11.01～43.07mmol/L，ACP 258～2092U/mL，α-GLUC 109.6～570.8 mmol/L，Zn 1.09～4.86 mmol/L）。

二、血清性激素检测

患者血清睾酮（T） 8.62nmol/L，催乳素（PRL）136.14mIU/L，促黄体生成激素（LH）5.54 mIU/mL，雌二醇（E2）53.00pmol/L，促卵泡成熟激素（FSH）10.34 mIU/mL，孕酮（P）0.60 nmol/L，血清性激素各项均正常（正常参考值：T 4.94～32.01nmol/L，PRL 72.66～407.40mIU/L，LH 0.57～12.07 mIU/mL，E2 40.37～161.48pmol/L，FSH 0.95～11.95 mIU/mL，P 0.32～0.64 nmol/L）。

三、染色体核型分析

患者染色体核型显示为性染色体嵌合型，45，X/46， XY， Yqh-，比例为5:25。共计数30个细胞，见5个细胞核型为45， X，缺失一条性染色体；25个细胞核型为46， XY， Yqh-，Y染色体长臂异染色质区减少。见图1。

四、Y染色体微缺失分析

患者6个STS位点多重PCR检测显示：AZFa区域sY84和sY86位点存在，但AZFb和AZFc区域位点sYl27、sYl34、sY254、sY255均缺失。SRY基因存在，见图2。

讨 论

无精子症和少精子症患者在男性不育门诊较常见，经常规检查不明原因的无精子症患者也很常见，相关文献报道，由遗传缺陷所引起的精子发生障碍约占男性不育因素30%［3，4］。染色体核型异常可由亲代遗传或子代新生突变而发生。具有两种或两种以上细胞系的个体称为嵌合体［5］。Y染色体上有3个与生精功能相关的区域，分别为AZFa、AZFb、AZFc，任何一个区域或多个区域的位点缺失都会导致精子发生障碍。本文患者染色体核型显示为性染色体嵌合型，45， X/46， XY， Yqh-，且合并AZFb和AZFc区域位点sYl27、sYl34、sY254、sY255缺失。患者存在部分Y染色体缺失和部分小Y染色体，小于21号染色体。虽然患者第二性征没有明显改变，但Y染色体异常已经直接影响到患者睾丸生精功能。而患者这些STS位点的缺失是导致无精子症的最直接原因。此类染色体异常核型在临床中不如克氏综合征、Turner综合征等常见，但在无精子症患者中，我们仍需要高度重视。鉴于患者长兄已婚已育，染色体核型及Y染色体微缺失检查均正常，本文患者出现染色体核型异常属子代新生突变引起。相关文献报道［6-8］，经ICSI治疗后，父亲有可能将AZF缺失遗传给男性后代，尤其是AZFc区域位点的缺失，且该区域位点缺失比较常见，约占60%。另外，有文献报道，AZFb区域位点缺失的患者约占Y染色体微缺失的3%～5%，表现为精子成熟障碍，不能行经皮睾丸精子抽吸术或显微切割睾丸取精技术［9，10］。因此为避免将遗传缺陷传给下一代，建议此类患者配偶接受供精人工受精，减少或停止不必要的药物治疗。

图1 患者染色体核型分析结果

图2 多重PCR扩增产物电泳图注： 1：正常男性A组位点（ZFX/ZFY、SRY、sY134、sY84、sY255）；2：患者A组位点（ZFX/ZFY、SRY、sY134、sY84、sY255）；M：Marker（分子量从上到下依次为2 000bp， 1 000bp，750bp， 500bp， 250bp， 100bp）；3：正常男性B组位点（ZFX/ZFY、SRY、sY254、sY127、sY86）；4：患者B组位点（ZFX/ZFY、SRY、sY254、sY127、sY86）；图中1、2泳道条带顺序从上到下依次为ZFX/ZFY、SRY、sY134、sY84、sY255； 其中3、4泳道条带顺序从上到下依次为ZFX/ZFY、SRY、sY254、sY127、sY86

无精子症； 染色体， 人， Y； 核型畸变

1 孙宝刚， 粱鲁南， 曹井贺， 等. 严重少精子症和无精子症患者染色体核型与Y染色体微缺失检测的应用. 中国男科学杂志 2013； 27（5）: 41-44

2 世界卫生组织. 人类精液检查与处理实验室手册. 第5版. 北京: 人民卫生出版社， 2011: 10-20

3 Martin RH. Cytogenetic determinants of male fertility. Hum Reprod Update 2008； 14（4）: 379-390

4 蔡志明. Y染色体及其微缺失与男性不育: 过去、现在与将来. 中国男科学杂志 2010； 16（5）: 387-394

5 戴汝琳， 王瑞雪， 张志红， 等. 两例Y 染色体嵌合体核型合并Y 染色体微缺失病例分析. 中国实验诊断学 2010；14（9）: 1393-1396

6 Kamischke A， Gromoll J， Simoni M， et al. Transmission of Y chromosome deletion involving the deleted in azoospermia（DAZ） and chromadomain protein 1 （CDYI）genes from father to son through ICSI. Hum Reprod 1999； 14（9）: 2320-2322.

7 Lee SH， Ahn SY， Lee KW， et al. Intracytoplasmic sperm injection may lead to vertical transimission，expansion，anddenovo occurrence of Y-chromosome microdeletions in male fetuses. Fertil Steril 2006； 85（5）: 1512-1515

8 Kleiman SE， Almog R， Yogev L， et a1. Screening for partial AZFa microdeletions in the Y chromosome of infertile men: is it of clinical relevance. Fertil Steril 2012；98（1）: 43-47

9 Soares AR， Costa P， Silva J， et a1. AZFb microdeletions and oligozoospermia-which mechanisms. Fertil Steril 2012； 97（4）: 858-863

10 韩瑞玲， 李艳， 童永清， 等. 无精症及严重少精症Y染色体微缺失和生殖激素水平研究. 现代检验医学杂志2014； 29（1）: 42-43，47

（2015-06-30收稿）

资助： 上海市浦东新区传统型临床示范学科项目（PDZYXK-3-2013001）；上海市第七人民医院人才培养计划项目（XX2014-08）

10.3969/j.issn.1008-0848.2015.11.012

R 698.2