玫参颗粒对去卵巢大鼠血脂代谢的影响*

张高林庞大勇程卫东张文君邢文婷

（1.兰州大学基础医学院，甘肃兰州730000；2.甘肃省中医学校，甘肃兰州730050；3.甘肃省武威职业学院，甘肃武威733000；4.南方医科大学中医药学院，广东广州510515；5.兰州大学第一附属医院，甘肃兰州730000）

·研究报告·

玫参颗粒对去卵巢大鼠血脂代谢的影响*

张高林1，2庞大勇1，3程卫东1，4△张文君1邢文婷5

（1.兰州大学基础医学院，甘肃兰州730000；2.甘肃省中医学校，甘肃兰州730050；3.甘肃省武威职业学院，甘肃武威733000；4.南方医科大学中医药学院，广东广州510515；5.兰州大学第一附属医院，甘肃兰州730000）

目的观察玫参颗粒对去卵巢大鼠血脂代谢的影响。方法将70只Wistar大鼠中60只行切除双侧卵巢手术后随机分为假手术组、模型组、戊酸雌二醇片组（雌激素组）、坤宝丸阳性对照组，玫参颗粒高、中、低剂量组。除了假手术组外，其他各组手术后5 d进行阴道涂片，连续5 d，观察到无规律的动情周期则为成模大鼠，每组给予相应的药物灌胃，假手术组和模型组给予蒸馏水。每日1次，连续4周，给药同时每周称量体质量1次。末次灌胃后，麻醉后进行腹主动脉采血测定高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、总胆固醇（TC）。结果与假手术组相比，其余各组大鼠体质量均有增加（P＜0.05或P＜0.01）；玫参颗粒低、中、高剂量组和雌激素组都可以降低因去卵巢而升高的血清TC（P＜0.05或P＜0.01）；模型组大鼠HDL-C含量与假手术组比较均显著降低（P＜0.01），玫参颗粒中、高剂量组，雌激素组能明显升高降低的HDL-C含量（P＜0.05或P＜0.01）。模型组大鼠LDL-C含量与假手术组比较均显著升高（P＜0.01），玫参颗粒低、中、高剂量组，雌激素组能明显降低升高的LDL-C含量（P＜0.05或P＜0.01）。结论玫参颗粒可以纠正因去除卵巢导致的血脂代谢异常，为临床上应用于治疗围绝经后雌激素缺乏相关疾病尤其是脂代谢相关疾病和新药的开发应用提供了实验依据。

玫参颗粒去卵巢大鼠胆固醇高密度脂蛋白低密度脂蛋白

妇女进入更年期后，因卵巢功能衰退，雌激素减少，会表现为潮热、盗汗、心悸、抑郁等的一系列的内分泌失调现象，出现脂肪代谢紊乱及骨钙丢失现象，容易患高血压、冠心病、心血管疾病和骨质疏松等疾病［1］。据资料显示心血管疾病（CVD）的发病率是妇女绝经前的4倍［2］，约占绝经后女性死亡原因的30%［3］，同时研究发现脂代谢是导致心血管疾病的主要原因。本课题实验在玫参颗粒对去卵巢大鼠更年期综合征的基础上，对去卵巢大鼠灌胃给予玫参颗粒30 d，重点观察并探讨对去卵巢大鼠血脂代谢的影响变化，以期能更全面地研究治疗更年期综合征的机理。现报告如下。

1　材料与方法

1.1实验动物选取SPF级6周龄雌性wistar大鼠70只，清洁级，体质量165～185 g［北京维通利华实验动物技术有限公司，SCXK（京）2012-0001］。实验前置动物于室温20℃室内1周，大鼠每笼5～6只，自由进食与饮水，置于塑料盒中。

1.2实验药物选取玫参颗粒（所选药物经兰州大学基础医学院中西医结合研究所程卫东教授鉴定为正品），药物组成包括红芪、女贞子、酸枣仁、白芍、枸杞子、熟地黄、牡蛎、远志组成，由兰州大学药学院制备成颗粒剂。按处方量，水煮药材，得到浸膏，提取稠膏，温度低于70℃进行真空干燥，对干膏粉进行优选，选择标准以提取的总黄酮、总皂苷和芍药苷含量为准。按配方比例取红芪、酸枣仁等八味药材，对其进行提取，制备干膏和颗粒，确定得出玫参颗粒每47.63 g相当于成人每日用的原药材61 g（即1 g玫参颗粒相当于1.28 g的原药材）；坤宝丸0.1g丸（北京同仁堂股份有限公司生产，批号Z11020185）；戊酸雌二醇片1 mg片（DELPHARM lilleS.A.S生产，H20120368）

1.3试剂与仪器Sc-3616低速离心机low speed centrifuge，安徽中科中佳科学仪器有限公司。日立7600全自动生化仪。倒置相差显微镜（OLYMPUS，日本）。

1.4实验方法1）造模。将70只大鼠进行腹腔注射麻醉，采用10%的水合氯醛以0.4 mL/100 g。待麻醉完全，将大鼠腹位固定，于最末肋骨下、腋中线与脊柱外侧2 cm交叉处剃毛。常规消毒后，用尖头剪刀依次剪开皮肤层、筋膜层、肌肉层，做约1 cm的切口，分离组织，将脂肪团拉出腹腔，分离脂肪组织找到卵巢，手术线结扎后将卵巢切除，将组织送回入腹腔，缝合伤口。将对侧卵巢切除，采取同上方法。在伤口滴加阿莫西林预防感染。共60只完全摘除卵巢，假手术组10只开腹，不切除卵巢，只切除卵巢旁边相同大小脂肪组织。术后第5日，观察动情周期，采用阴道涂片法，连续5 d，如未出现规则动情期变化，则造模成功。2）分组与给药。将70只大鼠随机分为模型组、假手术组、戊酸雌二醇组（雌激素组）、玫参颗粒高、中、低剂量组、坤宝丸阳性对照组。玫参颗粒低、中、高剂量组给药，剂量分别为2.5 g/kg、5 g/kg及10 g/kg；戊酸雌二醇组0.1 mg/kg，坤宝丸组1 g/kg，用蒸馏水配成混悬液1 ml/100 g体质量灌胃。假手术组和模型组用等量蒸馏水。以上各组给药体积均为10 mL/kg，每天灌胃1次，连续30 d。

1.5检测指标大鼠血清中血脂检测：总胆固醇（TC）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）和高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）测定采用日立7600全自动生化分析仪检测试剂具体方法按试剂盒说明书要求进行操作。

1.6统计学处理采用SPSS17.0统计软件分析。计量资料以（±s）表示，并对数据采用t检验。P＜0.05为差异有统计学意义。

2　结果

2.1各组大鼠的体质量比较见表1。大鼠每周称量体质量1次，分别选取大鼠造模后1周、给药后2周和给药后4周体质量统计结果可知，造模后1周与假手术对照组相比，其余各组大鼠体质量均有增加（P＜0.05或P＜0.01）。给药后2周和4周时可以发现玫参颗粒中、高剂量组能抑制因去卵巢而导致的体质量增加。提示玫参颗粒可以抑制去卵巢后因机体内分泌失调导致的体质量增加。

表1　各组大鼠体质量比较（g，±s）

表1　各组大鼠体质量比较（g，±s）

与假手术组比较，△P＜0.05，△△P＜0.01；与模型对照组比较，*P＜0.05，**P＜0.01；与坤宝丸阳性对照组比较，★P＜0.05，★★P＜0.01。下同。

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2.2各组大鼠血清TC水平比较结果示模型组大鼠TC含量为（1.84±0.46）mmol/L，高于假手术组的（1.32±0.22）mmol/L（P＜0.01）；玫参颗粒低、中、高剂量组TC含量分别为（1.53±0.26）mmol/L、（1.34±0.34）mmol/L、（1.54±0.30）mmol/L，雌激素组为（1.51±0.26）均能明显降低升高的TC含量（P＜0.05或P＜0.01），说明玫参颗粒低、中、高剂量组和雌激素组都可以降低因去卵巢而升高的血清TC。坤宝丸阳性对照为（1.87± 0.14）mmol/L，血清TC未明显降低（P＞0.05）。

2.3对大鼠HDL-C、LDL-C的影响见表2。结果示模型组大鼠HDL-C含量与假手术组比较均显著降低（P＜0.01），玫参颗粒中、高剂量组，雌激素组能明显升高降低的HDL-C含量（P＜0.05或P＜0.01）。模型组大鼠LDL-C含量与假手术组比较均显著升高（P＜0.01），玫参颗粒低、中、高剂量组，雌激素组能明显降低升高的LDL-C含量（P＜0.05或P＜0.01）。

3　讨论

有研究表明，雌激素可以促进血脂降解，降低TC和LDL-C水平，减少TC在动脉血管沉积，因而在预防心血管疾病中有着重要的作用［4］。也有学者认为雌激素直接通过与受体结合的方式直接作用在血管壁，从而发挥作用［5］。绝经后女性会表现卵巢功能的衰竭，雌性激素分泌不足的症状，更重要的是因雌激素分泌不足所造成的一系列内分泌失调及由此引起的糖脂代谢障碍等远期的一些并发症危害，同时也会增加了患有心血管疾病的风险。流行病学研究也发现血清TC的增加会增加CHD的发病危险［6］。目前，针对更年期脂类代谢异常，最常用的是激素替代治疗（HRT）疗法，且疗效显著［7］。虽然HRT疗法在临床上被广泛应用，但利弊一直存在着较大的争议，妇女健康协会（WHI）发现绝经后使用雌激素长期进行治疗，危害很大，会导致脑卒中、老年性痴呆和轻度认知障碍、乳腺癌等疾病的增加［8］。因此，对HRT的应用利弊评价还需要大量的临床试验来进行论证。

表2　大鼠血清HDL-C、LDL-C统计结果比较（mmol/L，±s）

表2　大鼠血清HDL-C、LDL-C统计结果比较（mmol/L，±s）

组别n假手术组10模型组10玫参颗粒低剂量组10 HDL-CLDL-C 1.33±0.310.236±0.056 0.90±0.17△△0.374±0.103△△0.92±0.200.277±0.073**玫参颗粒中剂量组91.22±0.26*0.241±0.064**玫参颗粒高剂量组101.37±0.27**0.23±0.053**坤宝丸阳性对照组81.30±0.13**0.397±0.073**雌激素组81.29±0.36**0.298±0.056*

研究发现，中医药不仅表现雌激素样作用，还对更年期综合征的性腺轴有独特的调节作用，能使卵巢延缓老化，这是单纯HRT疗法不能比拟的［9］。中药在治疗更年期综合征时也能提高更年期妇女的免疫功能［10］，整体调控妇女即将老化的机体功能状态，从而达到治疗的目的，显示了很好的发展前景。玫参颗粒是由红芪为君药，伍以熟地黄、女贞子、白芍、枸杞子养血滋阴、滋补肝肾；酸枣仁、远志养心安神、补虚敛汗；牡蛎具有镇静潜阳功效，总药达滋养肝肾、交通心肾、养心安神、调和气血之效。红芪为甘肃道地药材，与黄芪同种不同属，均可补中益气、扶正固本。红芪中的红芪多糖能抑制糖尿病患者的TC、TG、LDL-C升高，抑制HDL-C降低［11］；女贞子含有齐墩果酸，可降低动脉粥样硬化的发生率，主要通过降低血清总胆甾醇过氧化脂质动脉壁总胆甾醇含量［12］；朱彩平等研究发现枸杞中主要生物活性成分枸杞多糖可显著降低血脂水平［13］；酸枣仁脂肪油具有调节血脂作用，并可增强SOD、CAT活性，减少脂质过氧化损伤［14］；白芍中的白芍总苷可明显降低脂肪肝大鼠血浆TC、TG、LDL-C水平，提高血浆HDL-C水平［15］。诸药合用，玫参颗粒在治疗更年期的基础上能很好地预防和治疗更年期综合征所导致脂代谢紊乱的并发症，从而可以减少由于脂代谢失常而引发的心脑血管疾病的危害。

实验结果显示，去卵巢大鼠经玫参颗粒治4周后能够显著降低TC和LDL-C，升高HDL-C水平。本实验研究表明玫参颗粒可以很好地改善大鼠因去卵巢致雌性激素缺乏而引起的脂类异常变化。综上所述，玫参颗粒能促进去卵巢雌性激素的分泌，同时改善脂代谢。该研究可以为其应用于临床治疗围绝经期后雌激素缺乏相关疾病尤其是脂代谢相关疾病提供了实验依据。

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The Effect of Meishen Granule on Sex Hormone and Serum Lipid in Ovariectomy Rats

ZHANG Gaolin，PANG Dayong，CHENG Weidong，et al.
School of Basic Medical Sciences，Lanzhou University，Gansu，Lanzhou 730000，China

Objective：To detect and observe the effect of Meishen granule on sex hormone and serum lipid in ovariectomy rats.Methods：70 female wistar rats were randomly divided into 7 groups，which were the sham-operated group，osteoporosis model group，Kunbaowan granule group，Meishen granule with high doses，medium doses and low doses groups.On the fifth day after operation，the other groups，except the sham-operated group，received vaginal smears，lasting for 5 days，till irregular estrous cycle was observed，for which the rats would become model rats.Every group was given intragastric administration with corresponding drugs，and the sham-operated group and the model group received distilled water distilled water.The treatment was given once per day，lasting for 4 weeks and the weight would be measured each time.After the last time to fill the stomach，abdominal aortic blood after anesthesia，the level of HL-C，LDL-C and TC was measured.Results：Meishen granule could significantly increase the level of HDL-C，and decrease the level of TC and LDL-C，which showed extremely significant difference（P＜0.01 or P＜0.05）.Conclusion：Meishen granule can improve abnora sex hormone and serum lipid in ovariectomy rats，an basis for clinical applications of pharmacodynamics and new perimenopause drugs development.

Meishen granule；Perimenopause；Ovariectomized rats；Endocrine-immune

R285.5

A

1004-745X（2015）10-1725-03

10.3969/j.issn.1004-745X.2015.10.011

2015-06-16）

广东省高等学校人才引进项目

（电子邮箱：chengweidong888@sina.com）