内毒素及其增敏系统在烫伤后金葡菌脓毒症中的改变及意义

蒋丽娟

摘要：目的：探讨内毒素增敏系统脂多糖结合蛋白（LBP）、脂多糖受体（CD14）在烫伤后金葡菌脓毒症患者中的变化与临床意义。方法：选取2014年1月～2015年6月在我院住院治疗的烫伤患者43例，根据脓毒症诊断标准及血培养结果，分为非脓毒症对照组（24例）及金葡菌脓毒症组（19例），检测患者伤后1d、3d、7d、14d、28d LBP、CD14水平，另选择20例健康献血者作为正常对照组。结果：烫伤患者LBP、CD14水平在伤后1d～28d均明显高于正常对照组（P<0.05），金葡菌脓毒症组LBP在伤后3d、7d、14d、28d明显高于非脓毒症对照组（P<0.05）。金葡球脓毒症组CD14水平在伤后14d、28d明显高于非脓毒症对照组（P<0.05）。结论：LBP、CD14水平在烫伤后金葡菌脓毒素患者中明显升高，可能是金葡菌脓毒症的发生与进展的影响因素。

关键词：内毒素；烫伤；金黄色葡萄球菌；脓毒症；

脂多糖结合蛋白（LBP）与脂多糖受体（CD14）是内毒素（LPS）的增敏系统，能够提高人体多种细胞对LPS的敏感性，可使LPS的生物活性增强数百至数千倍，促进LPS进一步激活各种炎性细胞因子，导致失控性炎症反应，造成组织和器官严重受损[1]。革兰阳性菌（G+菌）自身并不产生LPS，但在部分G+菌脓毒症患者中，LPS与G+菌致病因子往往协同致病，诱发内毒素血症，对脓毒症的恶化起着重要的促进作用，但其确切作用机制尚不明确。本研究以我院43例烫伤患者为研究对象，探讨LBP、CD14在烫伤后金葡菌脓毒症患者中的变化，现总结如下。

1. 资料与方法

1.1 一般资料

选取2014年1月～2015年6月在我院住院治疗的烫伤患者43例。纳入标准：①烫伤面积≥30%；②自愿参加研究并签署知情同意书。排除标准：金葡菌以外其他细菌感染引起的脓毒症。根据脓毒症诊断标准[2]以及血培养结果，将患者分为2组，非脓毒症对照组24例，男13例，女11例，年龄16～61岁，平均（32.32±13.22）岁，烫伤总面积30%～94%，平均67.34%±16.64%；金葡菌脓毒症组19例，男11例，女8例，年龄17～59岁，平均（34.24±12.94）岁，烫伤总面积30%～93%，平均64.52%±17.22%。另从献血的健康人群中选取20例作为正常对照组，其中男12例，女8例，年龄18～58岁，平均（31.67±12.56）岁。

1.2方法

1.2.1 样品

烫伤患者分别于伤后1d、3d、7d、14d、28d采集静脉血，正常对照组在献血时采血样，2500r/min离心20min，分离血浆。

1.2.2 LBP 及CD14的检测

应用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测LBP、CD14水平。ELISA试剂盒由深圳晶美公司生产，检验严格按试剂盒说明书操作，先作出标准曲线和回归方程，再应用标准曲线及样品吸光度值计算样品含量。

1.3 统计学方法

使用SPSS19.0软件进行统计分析。计量资料采用t检验。P<0.05表示差异有显著性意义。

2. 结果

2.1 LBP水平

正常对照组LBP水平为（9.23±3.84）ug/ml，烫伤患者LBP水平见表1。烫伤患者LBP水平在伤后1d～28d均明显高于正常对照组（P<0.05），金葡菌脓毒症组LBP在伤后3d～28d明显高于非脓毒症对照组（P<0.05）。

2.2 CD14水平

正常对照组CD14水平为（6.21±3.22）ug/ml，烫伤患者CD14水平见表2。烫伤患者CD14水平明显高于正常对照组（P<0.05），金葡球脓毒症组在伤后14d～28d CD14水平明显高于非脓毒症对照组（P<0.05）。

3. 讨论

膿毒症是感染导致的全身性炎症反应，常发生于创伤、烧伤、休克、大手术等重症患者。多种炎症递质过度分泌，导致机体炎症反应失控，是引发脓毒症的一个重要原因[3]。已有研究指出，LPS是脓毒症的主要触发剂[4]。本研究动态检测了烧伤患者伤后28d内LPS增敏系统LBP、CD14水平的变化，结果显示，烫伤患者伤后1～28d LBP、CD14持续升高，而且明显高于正常对照组。同时研究还发现，金葡菌脓毒症组LBP在伤后3d、7d、14d、28d明显高于非脓毒症对照组；金葡球脓毒症组CD14水平在伤后14d、28d明显高于非脓毒症对照组，提示在机体遭受严重创伤打击的情况下，在金葡菌感染引起的脓毒症患者中，LBP、CD14可能参与炎症反应过程，并介导LPS对不同器官的损害，与脓毒症的发生发展存在密切的关系。

LPS的主要化学成分是脂多糖，其靶细胞包括单核细胞、平滑肌细胞、内皮细胞、噬中性白细胞等，在LPS的作用下，这些细胞被激活并分泌TNF-а、IL-l、IL-6等炎症因子，导致细胞内的基因表达发生改变，机体出现炎性反应，导致毛细血管内凝血、器官组织损伤等严重后果。冯华国等研究指出，LPS可导致单核一巨噬细胞内TNF-а、1L-6、HMGBl分泌增多[5]。孙东明等[6]研究者采集50例脓毒症患儿血样，用鲎试剂动态比浊定量测定法测定LPS，结果发现，脓毒素患儿LPS水平为（0.42±0.22）EU/ml，显著高于对照组的（0.047±0.016）Eu/ml；所有脓毒症患儿LPS水平均高于0.1 EU/ml，符合内毒素血症的诊断标准，提示LPS参与了脓毒症炎症反应过程。

LBP、CD14是机体增敏LPS作用的重要途径。LPS除了可直接导致血管内皮细胞与其他组织实质细胞损伤外，更重要的是，LPS可与LBP结合成LPS-LBP复合物，作用于单核巨噬细胞表面的CD14，导致失控性炎症反应。崔浩等研究发现，实验小鼠在受到LPS攻击后，肺、肝、心肌等器官组织中的LBP、CD14浓度明显上升，成为LPS激活炎症反应的关键环节，导致TNF-α、IL-6等炎症因子水平升高[7]。董宁等[8]以严重烧伤患者为研究对象，对比烧伤脓毒症患者与非脓毒症患者LBP、CD14水平，结果发现，脓毒症患者LBP、CD14表达明显上调，远远高于非脓毒症患者，与本研究结论基本一致。关于金葡菌脓毒症LBP、CD14水平上升的确切机制尚不明确，可能与金葡菌的攻击造成的肠源性LPS移位有关，而LBP、CD14水平升高可能直接与LPS的刺激作用相关。

综上所述，烫伤后金葡菌感染引起脓毒症，可导致肠源性LPS移位以及LBP、CD14大量生成。一方面，LPS与金葡菌可能共同促进LBP、CD14水平上升；另一方面，LBP、CD14又可能作为LPS与金葡菌的受体参与炎症过程，从而导致金葡菌感染引起的炎症反应不断循环放大，造成炎症反应失控与多器官功能损伤。因此，我们认为，LPS增敏系统LBP、CD14在金葡菌脓毒症的发生、发展中具有重要意义。

参考文献：

[1]杨丽娜，赵自刚，赵永泉，等.内毒素移位在肠淋巴再灌注加剧SMAO休克大鼠多器官损伤中的作用[J].中国应用生理学杂志，2012，28（1）：74-78.

[2]姚咏明，柴家科，盛志勇.烧伤脓毒症的诊断标准与防治[J].中华烧伤杂志，2003，19（2）：65-66.

[3]康杰，张碧丽.姜黄素对内毒素诱导的脓毒症大鼠器官功能保护及血清IL-18水平的影响[J].临床儿科杂志，2012，30（9）：869-873

[4]李俊，张丹，吴清和，等.安宫牛黄丸对脓毒症大鼠血浆内毒素水平的影响[J].时珍国医国药，2010，21（6）：1320-1321

[5]冯华国，孙航，吴传新，等.内毒素诱导巨噬细胞HMGBl表达的实验研究[J].重庆医科大学学报，2010，35（7）：999-1003

[6]孙东明，董巧丽，杨小巍，等.内毒素、C-反应蛋白、血培养对儿童脓毒症早期诊断的意义[J].实用预防医学，2012，19（4）：594-595

[7]崔浩，孙自贤，崔颖，等.正常淋巴液对内毒素休克小鼠内毒素增敏系统的作用[J].微循环学杂志，2014，24（1）：9-11

[8]董宁，姚咏明，于燕，等.内毒素增敏系统与严重烧伤脓毒症的关系及其临床意义[J].解放军医学杂志，2011，36（1）：21-23