血清MicroRNA—122作为脓毒症诊断特异性标志物的研究

刘初铭 罗刚

【摘要】 目的 观察脓毒症患者的血清中MicroRNA-122的表达量在病程中的动态变化情况， 并且对此变化情况与脓毒症的发病程度之间关系进行探讨。方法 选取88例脓毒症患者作为观察组， 其中一般脓毒症患者40例作为一般脓毒症组、重症脓毒症患者48例作为重症脓毒症组;另选同期88例体检健康人作为对照组， 采用荧光定量聚合酶链反应（PCR）对对照组入组时及观察组入组第1、3、5、7、14天血清中MicroRNA-122的表达量进行检测， 观察所有研究对象MicroRNA-122表达情况， 并比较观察组中不同组别的临床资料差异。结果 重症脓毒症组序贯器官衰竭评定量表（SOFA）评分（9.7±

3.4）分、急性生理学与慢性健康状况评估Ⅱ（APECHEⅡ）评分（18.9±6.5）分明显高于一般脓毒症组的（7.1±2.0）、（13.9±5.2）分， 慢性肾脏疾病发生率37.50%明显高于一般脓毒症组的12.50%， 差异均具有统计学意义（P<0.05）。观察组入组第1、3、5、7、14天血清miRNA-122表达量均明显低于对照组， 差异均具有统计学意义（P<0.05）。同时间， 重症脓毒症组患者血清miRNA-122表达量均明显高于一般脓毒症组， 差异均具有统计学意义（P<0.05）。结论 血清中MicroRNA-122的表达量可以作为脓毒症诊断的特异性标志物， 还能够对脓毒症患者的疾病严重程度做出预警， 具有推广应用的价值。

【关键词】 血清MicroRNA-122;脓毒症;诊断特异性标志物;研究

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2018.12.024

脓毒症是一种由于受到一些微生物感染所导致的临床综合症， 如果不能及时发现， 及时治疗， 就有可能发展成脓毒症休克， 甚至会使患者的多个器官出现功能性障碍[1， 2]。所

以， 作者选择了对脓毒症患者血清中MicroRNA-122的表达量的动态变化情况进行观察， 从而进一步探讨了此变化情况与脓毒症的发病程度之间的关系。具体报告如下。

1 资料与方法

1. 1 一般资料 选取2015年10月～2017年10月在本院进行治疗的88例脓毒症患者作为观察组， 其中一般脓毒症患者40例作为一般脓毒症组、重症脓毒症患者48例作为重症脓毒症组;另选同期88例体检健康人作为对照组。观察组年龄19～85岁， 平均年龄（55.4±18.6）岁。对照组年龄22～81岁，

平均年龄（57.2±17.1）岁。观察组与对照组年龄等一般资料比较差异无统计学意义（P>0.05）， 有可比性。

1. 2 方法

1. 2. 1 实验主要仪器与试剂 仪器：MJ-Mini梯度PCR仪;试剂：mir Vana miRNA提取试剂盒、miRccute miRNA cDNA第一链合成试剂盒、荧光定量检测试剂盒;系统：实时荧光定量检测系统 [3]。

1. 2. 2 数据采集 对观察组患者的姓名、年龄、性别、病史等做好详细的记录。患者入院后的第1天对患者的具体病情进行估计并且做出评分[2]。将对照组的姓名、性别、年龄等基本信息也做好详细记录。

1. 2. 3 PNA提取和逆转录（RT）-PCR 对所有研究对象采静脉外周血， 其中对照组入组时采血， 观察组入组第1、3、5、7、14天采血。将血液中血清分离出来放在-80℃的冰箱内保存， 等待测量。按照mirVana miRNA试剂盒对血清中的总RNA进行提取。对提取出来的总RNA进行反转录， 随后对RT的反应体系进行配制， 将配制好的反应体系摇匀后再反转录（具体操作步骤可以参照试剂盒的使用说明书）。根据PCR试剂盒的说明书对PCR的反应体系进行确定 [4]。

1. 3 观察指标 ①比较观察组中不同组别的临床资料差异， 指标包括SOFA评分、APECHEⅡ评分、慢性肾脏病发生

情况。②比较对照组与观察组不同时间血清MicroRNA-122表达情况的差异。③一般脓毒症组与重症脓毒症组相同时间点血清MicroRNA-122表达情况的差异。

1. 4 统计学方法 采用SPSS19.0統计学软件进行数据分析。正太分布计量资料以均数±标准差（ x-±s）表示， 采用t检验;非正态分布的计量资料采用中位数（四分位数）表示， 采用Mann-Whitney U检验;计数资料以率（%）表示， 采用χ2检验。P<0.05表示差异具有统计学意义。

2 结果

2. 1 一般脓毒症组与重症脓毒症组临床资料比较 重症脓毒症组SOFA评分（9.7±3.4）分、APECHEⅡ评分（18.9±

6.5）分明显高于一般脓毒症组的（7.1±2.0）、（13.9±5.2）分， 慢性肾脏疾病发生率37.50%明显高于一般脓毒症组的12.50%， 差异均具有统计学意义（P<0.05）。见表1。

2. 2 观察组与对照组血清miRNA-122表达量比较 观察组入组第1、3、5、7、14天血清miRNA-122表达量均明显低于对照组， 差异均具有统计学意义（P<0.05）。见表2。

2. 3 一般脓毒症组与重症脓毒症组血清miRNA-122表达量比较 同时间， 重症脓毒症组患者血清miRNA-122表达量均明显高于一般脓毒症组， 差异均具有统计学意义（P<0.05）。见表3。

3 讨论

脓毒症是一种由于感染而引起的极其复杂的炎性反应， 其造成的病死率是非常高的， 所以對脓毒症的早期诊断和预后都极为重要。miRNA是一种极其微小的分子RNA， 其可以对蛋白码的基因表达进行调节[5-9]。苏明环等[10]通过多年的研究证实了miRNA-122可以作为脓毒症患者的血清标志物。在本次研究中， 通过对不同程度脓毒症患者和健康人的血清miRNA-122的表达量进行观察后发现， 一般脓毒症组和重症脓毒症组SOFA评分、APECHEⅡ评分、慢性肾脏疾病发生情况比较差异均具有统计学意义（P<0.05）;观察组入组第1、3、5、7、14天血清miRNA-122表达量均明显低于对照组， 差异均具有统计学意义（P<0.05）。这也进一步说明了血清miRNA-122可以作为早期脓毒症的特异性诊断标志物。另外， 同时间， 重症脓毒症组患者血清miRNA-122表达量均明显高于一般脓毒症组， 差异均具有统计学意义（P<0.05）， 也就间接的说明了血清miRNA-122的表达量在对脓毒症患者疾病的严重程度进行预警方面具有非常重要的意义， 但本文未对其在脓毒症中的功能机制做进一步研究。

综上所述， 血清中MicroRNA-122的表达量可以作为脓毒症诊断的特异性标志物， 还能够对脓毒症患者的疾病严重程度做出预警， 具有推广应用的价值。

参考文献

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[9] 骆海伦. 脓毒症相关血清MicroRNA的筛选及其诊断价值初步研究. 中国人民解放军医学院， 2014.

[10] 苏明环， 寿松涛. 血presepsin对脓毒症诊断及病情判断的临床价值. 临床检验杂志， 2014， 32（2）：106-108， 111.

[收稿日期：2017-11-28]