慢性乙型肝炎白介素18及其结合蛋白与乙型肝炎病毒DNA载量的相关性

方宏罡 董秀鹏 (大庆油田总医院检验科，黑龙江 大庆 163000)

抗病毒是治疗慢性乙肝的最常用方法，但是治疗后仍有部分患者的病情会不断发展。目前，关于乙型肝炎病毒造成肝细胞损伤的机制尚未完全阐明〔1〕，这也不利于靶向药物的研发。近年来，临床学者致力于探寻与乙肝发生密切相关的分子机制，其中白细胞介素(IL)-18是新发现的一类炎症因子，它能够调节炎症反应和免疫功能，可能与乙型肝炎的发生密切相关〔2〕。笔者分析慢性乙型肝炎IL-18及其结合蛋白与乙型肝炎病毒(HBV)DNA载量的相关性。

1 对象与方法

1.1 对象 将2013年7月至2014年9月我院收治的慢性乙型肝炎160例。均符合2010年中华医学会肝病学分会修订的《慢性乙型肝炎防治指南》的慢性乙肝诊断标准〔3〕。根据HBV-DNA载量不同分为高载量组和低载量组各80例。高载量组:HBV-DNA＞105/L;男56例，女24例;年龄61～72〔平均(65.62±7.22)〕岁;病程 1 ～7〔平均(3.14±0.05)〕年;低载量组:HBV-DNA＜104/L;男 53例，女 27例;年龄 61～74〔平均(66.34±7.52)〕岁;病程1 ～5〔平均(3.12±0.05)〕年。两组患者性别、年龄、病程等资料比较差异无统计学意义(P＞0.05)，具有可比性。

1.2 血清学指标 采集两组患者的静脉血，离心后取血清，采用酶联免疫吸附法检测Ⅲ型前胶原(PⅢNP)、Ⅳ型胶原(ⅣC)、IL-18以及IL-18BP含量。检测仪器:帝肯freedom evolyzer酶标仪;采用化学法检测层黏连蛋白(LN)、透明质酸酶(HA)，罗氏COBAS C702生化分析仪。

1.3 免疫功能指标 采集外周血后分离淋巴细胞，采用流式细胞术检测各亚群的量，包括 CD3+、CD4+、CD8+T细胞、CD16+/CD56+NK细胞。检测仪器:BD FACSCalibur流式细胞仪。

1.4 统计学方法 采用SPSS18.0软件进行t检验和单因素回归分析。

2 结果

2.1 两组患者的HBV-DNA载量以及IL-18含量比较 高载量组血清中IL-18含量、HBV-DNA载量高于低载量组，IL-18BP含量低于低载量组(P＜0.05)。见表1。

2.2 两组患者治疗后肝纤维化指标比较 高载量组患者HA、LN、ⅣC、PⅢNP水平均高于低载量组(均P＜0.05)。见表2。

表1 两组患者的HBV-DNA载量以及IL-18含量比较(n=80，±s)

表1 两组患者的HBV-DNA载量以及IL-18含量比较(n=80，±s)

组别 HBV-DNA(×104/L)IL-18(ng/ml) IL-18BP(ng/ml)0.87±0.09351.29±45.6718.89±2.32高载量组 7.82±1.17789.91±93.429.11±1.02 t/P值低载量组26.284/＜0.0513.092/＜0.0511.092/＜0.05

表2 两组患者的肝纤维化指标比较(n=80，±s，ng/ml)

表2 两组患者的肝纤维化指标比较(n=80，±s，ng/ml)

组别 HA(ng/ml) LN(ng/ml) ⅣC(ng/ml)PⅢNP(ng/ml)低载量组 57.43±6.2492.29±10.2772.47±9.239.44±1.18高载量组 92.26±10.31172.51±21.11136.35±17.4516.26±1.92 t/P 值 8.019/＞0.059.383/＞0.058.498/＞0.057.982/＞0.05

2.3 两组细胞免疫功能比较 两组患者的CD3+T细胞含量无差异(P＞0.05)，高载量组患者的CD4+T细胞、CD16/65+NK细胞含量低于低载量组，CD8+T细胞的含量高于低载量组(均P＜0.05)。见表3。

表3 两组患者的细胞免疫功能比较(n=80，%，±s)

表3 两组患者的细胞免疫功能比较(n=80，%，±s)

细胞低载量组 58.12±7.1645.22±5.9522.27±2.2824.56±3.48组别 CD3+T细胞CD4+T细胞CD8+T细胞CD16/65+NK高载量组 58.33±6.8431.67±4.2129.32±3.1516.45±1.92 t/P 值 0.102/＞0.056.182/＞0.055.293/＞0.055.559/＞0.05

2.4 IL-18与HBV-DNA、肝功能、免疫功能的相关性 单因素回归分析表明，IL-18含量与 HA、LN、ⅣC、PⅢNP水平以及CD8+T细胞含量呈正相关，与CD4+T细胞、CD16/65+NK细胞含量呈负相关(P＜0.05)。见表4。

表4 慢性乙型肝炎IL-18与HBV-DNA、肝功能、免疫功能的相关性

3 讨论

抗病毒、免疫调节、保肝、抗纤维化等药物是目前治疗乙型肝炎的主要药物，但是患者肝功能损伤的病情仍无法被完全逆转，这与乙型肝炎病毒损伤机制仍未完全阐明有关〔4〕。近年来，临床学者也致力于探寻慢性乙肝发生的潜在机制。IL-18是新近发现的与炎症反应以及免疫反应密切相关的细胞因子，参与多个生理调节过程〔5〕。IL-18可以增强Th1免疫细胞的功能并促进IFN-γ的产生，还能促进NK细胞表达Fas配体来介导细胞毒性作用;此外，IL-18还具有上调核转录因子NK-κB表达、促进多种炎性因子表达的作用〔6〕。乙型肝炎病毒造成肝细胞损伤的过程中，最重要的特征是炎症反应亢进和免疫功能失调，而IL-18对炎症反应以及免疫反应均具有调节作用〔7〕。IL-18过度表达与乙型肝炎的发生和发展密切相关，具有明确的促炎作用〔8〕;IL-18结合蛋白能够与IL-18结合并拮抗其促炎作用，具有明确的抑炎功能〔9〕。慢性乙型肝炎病情的发展与乙型肝炎病毒的感染密切相关，乙型肝炎病毒载量一直是评价乙肝病情的重要指标〔10〕。本研究结果提示乙肝病毒感染与IL-18、IL-18BP表达异常有关;病毒DNA载量越高，IL-18含量越高、IL-18BP含量越低。乙肝病毒感染后对机体直接的影响在于肝脏功能损害以及免疫功能损害。肝功能损害表现为肝脏纤维化进程加速，血清中纤维化指标含量增加〔11〕;免疫功能损害表现为辅助性T细胞含量降低、抑制性T细胞含量增加〔12〕。由于本文样本选择对象的原因，研究结论可能会有偏倚，有待于今后扩大样本展开更深入的研究。

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