卡式法在输血前不规则抗体筛查中的应用价值分析

唐毓胜 周正东 唐任光

卡式法在输血前不规则抗体筛查中的应用价值分析

唐毓胜 周正东 唐任光

目的 探讨卡式法在输血前不规则抗体筛查中的应用价值。方法 选取需输血的3823例患者采用卡式法进行不规则抗体筛查，再将阳性血清使用谱细胞鉴定其抗体类型。结果 3823例患者中13例患者显阳性，阳性率为0.34%，阳性患者均存在妊娠史或输血史。结论 卡式法在输血前筛查不规则抗体具有重复性强、标本用量较少、标准化程度较高、结果可靠明确、保存时间长的特点。输血前对患者进行不规则抗体筛查，同时鉴定抗体的特异性，再选择输注不含有相应抗原的血液，可避免发生溶血性反应，对保证输血安全具有重要的意义。

卡式法；不规则抗体；筛查；输血安全

不规则抗体是指除抗-A、抗-B外的抗体[1]。不规则抗体可引起迟发性溶血性输血及其交叉配血困难反应，少数还可引起急性溶血性输血放样，导致无尿、少尿、肾衰竭和弥散性血管内凝血，严重时可导致死亡[2]。不规则抗体是引起溶血性输血反应和迟发型免疫反应的主要原因。近年来，国外在输血前普遍使用卡式法筛查不规则抗体。本研究选取需输血的3823例患者，采用卡式法进行不规则抗体筛查，旨在探讨卡式法在输血前不规则抗体筛查中的应用价值。现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2014年1月～2014年7月广西百色市中心血站需输血的3823例患者，其中男2376例，女1447例，年龄2～75岁，平均年龄（42.1±5.2）岁。

1.2 仪器与试剂 微柱凝胶抗人球蛋白检测卡；安迪博特专用标本孵育器和离心机；上海血液生物制品筛选红细胞、谱细胞。

1.3 方法 输血前抽取患者2 mL静脉血，在EDTA抗凝室温下1900 r/min离心10 min，分离血浆。往微柱凝胶抗人球蛋白检测卡的Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ三号孔各加入50 μL 0.8%的筛选细胞，同时向微孔柱内加入25 μL离心好的血浆，置于孵育器中孵育10 min，后在离心机下离心10 min，红细胞未与相应的抗体发生凝集反应，红细胞可通过凝胶至微柱底部，为阴性；红细胞与相应的抗体发生凝集反应，红细胞不可通过凝胶，挡在微柱的上端，为阳性。判定结果后，再将阳性血清使用谱细胞鉴定其抗体类型。

2 结果

3823例患者中13例患者显阳性，阳性率为0.34%，经使用谱细胞鉴定其抗体类型，其中抗-D 1例，抗-E 4例，抗-C 2例，抗-Ce 1例，抗-Ec 3例，抗-Lea 1例，抗-Leb 1例。其中男8例，女5例。经询问了解：8例男性患者均有输血史，2例女性患者只存在妊娠史，3例女性患者既有输血史又有妊娠史。见表1。

表1 不规则抗体筛查鉴定结果（n）

3 讨论

随着输血检验技术的不断发展，较少发生因血型不合而导致的溶血反应，而目前引起溶血反应主要由于血型的不规则抗体[3]。不规则抗体是引起溶血性输血反应和迟发型免疫反应的主要原因。但因不规则抗体的检出率较低，在临床上易被忽视，尤其是多次输血的患者、孕妇、严重消耗性疾病患者、肿瘤患者、自身免疫性疾病患者为不规则抗体的高危携带者[4]，为保证输血的安全和有效，应作为重点筛查对象。不规则抗体的质量、数量与抗原、T细胞、B细胞及其附属细胞等密切相关[5]。当抗原刺激机体后，B细胞增殖分化为浆细胞或记忆细胞，记忆细胞在其细胞膜表达相应的抗原，当再次受到相同抗原的刺激后，可发生免疫反应。输血时，特别是多次输血，红细胞表面的少见抗原可刺激机体产生相应的抗体，当再次输血时，组织相容性复合体MHCI及

MHCII分子调节T细胞的反应，从而调控机体的抗体反应，且在细胞因子、B细胞免疫耐受、神经内分泌作用等作用下，多次输血的患者、骨髓瘤、类风湿性关节炎、孕妇、系统性红斑狼疮、肝硬化、严重消耗性疾病患者、肿瘤患者、肺结核、自身免疫性疾病等患者血液中IgM、IgG抗体会增加[6]。

传统不规则抗体筛查的方法为使用间接抗人球蛋白试验筛查，可解决部分抗体的剂量效应，但该方法耗时较长，不利于常规检测[7]。基于传统的间接抗人球蛋白试验，卡式法可避免试管液体介质Coombs试验需多次清洗费时、繁琐的缺点。卡式法是利用微柱凝胶免疫抗体抗原的特异性反应和微孔过滤作用，微柱孔隙只允许通过1个红细胞，红细胞若未遇见相应的抗体或被致敏，则离心后可被离心至凝胶底部，说明被筛查的血清中不存在相应的抗体和致敏红细胞[8]。若被筛查的血清存在特异性抗体，如IgM抗体，可与红细胞结合直接形成可见的复合物，若是IgG抗体，该复合物可与抗球蛋白结合形成可见的复合物，复合物被挡在凝胶的上部，故筛查不规则抗体的特点有：（1）具有重复性强、标本用量较少、标准化程度较高、结果可靠明确，保存时间长；（2）可克服传统抗人球蛋白试验的费时、烦琐的缺点，不需洗涤，快捷简便；（3）标本使用量较少，减少操作过程带来的污染；（4）可摄像拷贝，提供永久性的记录。

本研究结果显示，3823例患者中13例患者显阳性，阳性率为0.34%，与报道的0.3%～2%的相符，但阳性患者一旦宿主具有相应抗原的红细胞，与体内的抗体发生抗原抗体反应，导致溶血性输血反应，严重时可威胁患者的生命安全。可运用于在医院输血科在不规则抗体筛查与鉴定、交叉配血、输血反应、溶血性贫血等血清学检验中，值得在临床上推广使用。综上所述，输血前对患者进行不规则抗体筛查，同时鉴定抗体的特异性，再选择输注不含有相应抗原的血液，可避免发生溶血性反应，对保证输血安全具有重要的意义。

[1] 曹荣袆，刘凤华，于洪敏.微柱凝胶法检测不规则抗体的临床应用[J].临床输血与检验，2010，12(2):149-151.

[2] 黄丽雅，孙爱农，陈勇高，等．中山地区万例患者不规则抗体微柱凝胶筛查的研究[J]．检验医学与临床，2009，16(6):1319-1321．

[3] 石兴景.临床输血现状分析[J].中国社区医师（医学专业），2011，13（26）：331-332.

[4] 张晨光，张倩倩，庞桂芝，等.血型不规则抗体检测的方法学评价[J].检验医学，2010，25（12）：929-933.

[5] 樊凤艳，王洪波，魏少平，等.不规则抗体导致ABO正反定型不符处理探讨[J].检验医学，2012，27（10）：822-824.

[6] 李燕琼.2360例有妊娠史女性血清中不规则抗体的调查分析[J].中国煤炭工业医学杂志，2010，13（1）：68.

[7] 毛娟，吴大洲，王满妮，等.凝聚胺漏检抗Lea致溶血性输血反应一例[J].中国输血杂志，2013，26（2）：178-179.

[8] 王玲，刘毅，吴敏慧.抗-Jka免疫性抗体致速发性溶血性输血反应探讨[J].临床输血与检验，2012，14(2):168-170.

10.3969/j.issn.1009-4393.2015.25.044

广西 533000 广西百色市中心血站 （唐毓胜 周正东 唐任光）