血清可溶性信号素4D水平与冠状动脉粥样硬化性心脏病发生的相关性研究

匡龙，赵良平，尤涛，徐卫亭，陈建昌

·专题研究·

血清可溶性信号素4D水平与冠状动脉粥样硬化性心脏病发生的相关性研究

匡龙，赵良平，尤涛，徐卫亭，陈建昌

目的探讨血清可溶性信号素4D(sSema4D)水平与冠状动脉粥样硬化性心脏病(冠心病)发生的相关性。方法选取2013年5月—2014年5月因胸闷、胸痛于苏州大学附属第二医院就诊并接受冠状动脉造影的患者297例为研究对象，根据量化冠状动脉造影将患者分为冠心病组(177例)和对照组(120例)，并将冠心病组患者分为稳定型冠心病(95例)和急性冠脉综合征(82例)。入院即刻抽取外周静脉血，采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血清sSema4D水平。结果冠心病组和对照组患者年龄、高血压检出率比较，差异无统计学意义(P＞0．05)。两组患者性别、吸烟率、糖尿病检出率及空腹血糖(FPG)、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL－C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL－C)、sSema4D水平比较，差异均有统计学意义(P＜0．05)。冠心病组中，急性冠脉综合征患者sSema4D水平为(8．70±2．19)μg/L，高于稳定型冠心病患者的(6．50±2．60)μg/L(t =6．034，P＜0．001)。多因素Logistic回归分析结果显示，LDL－C〔OR=6．665，95%CI(1．206，36．844)，P =0．030〕和sSema4D〔OR=5．013，95%CI(1．807，13．904)，P=0．002〕进入回归方程，是冠心病发生的危险因素。sSema4D水平预测冠心病发生的最佳截点为5．58μg/L，灵敏度为83．8%，特异度为78．1%，受试者工作特征曲线(ROC曲线)下面积为0．913〔95%CI(0．847，0．978)，P＜0．001〕。结论高水平sSema4D是冠心病发生的危险因素，其预测冠心病的发生有较高的灵敏度和特异度。

冠心病;信号素类;危险因素

匡龙，赵良平，尤涛，等．血清可溶性信号素4D水平与冠状动脉粥样硬化性心脏病发生的相关性研究［J］．中国全科医学，2015，18(36):4412－4415．［www．chinagp．net］

Kuang L，Zhao LP，You T，et al．Correlation between serum sSema4D level and coronary disease［J］．Chinese General Practice，2015，18(36):4412－4415．

冠状动脉粥样硬化性心脏病(冠心病)是危害人类健康的重大疾病之一，主要病理表现为冠状动脉发生粥样硬化病变引起血管管腔狭窄或阻塞，主要病理机制为血管内皮功能受损、脂质沉积以及慢性炎性反应［1］。近年研究表明，血小板通过激活炎性反应、释放促炎细胞因子、介导相关脂蛋白调节、促进血管内皮细胞变性等途径，在动脉粥样硬化的发生和发展过程中发挥重要作用［2－3］。信号素4D(Sema4D)是新发现的细胞因子，在血小板表面表达，并随着血小板活化裂解脱落到血浆中，形成可溶性Sema4D(sSema4D)，进而通过促进炎性反应、诱导血小板活化及粥样斑块内新生血管形成等参与动脉粥样硬化与血栓形成［4］。而关于sSema4D水平在冠心病发生中的作用，国内外报道较少。本研究通过比较冠心病和非冠心病人群血清sSema4D水平的差异，探讨sSema4D水平与冠心病的关系。

1对象与方法

1．1研究对象选取2013年5月—2014年5月因胸闷、胸痛于苏州大学附属第二医院就诊并接受冠状动脉造影的患者297例为研究对象，其中男163例，女134例;平均年龄(60．5±14．8)岁。排除标准:(1)年龄＜18岁;(2)入院前接受过止血、凝血及抗纤溶药物等治疗;(3)近期有感染性疾病史;(4)合并严重肝肾功能不全、自身免疫性疾病、恶性肿瘤、脑出血和脑梗死。本研究经本院伦理委员会批准，患者均知情同意。

1．2方法

1．2．1冠状动脉造影采用Judkins法经桡动脉或股动脉行冠状动脉造影，根据量化冠状动脉造影判断冠状动脉病变程度，若至少1支冠状动脉主干或其主要分支管腔狭窄≥50%，则判断为冠状动脉病变，据此将患者分为冠心病组(177例)和对照组(120例)。结合患者症状、心电图及血液检测指标，参考相关诊断指南［5－8］，将冠心病组患者分为稳定型冠心病(95例)和急性冠脉综合征(82例)。

1．2．2 sSema4D、血糖、血脂水平检测入院即刻抽取外周静脉血3～5 ml，取血清并保存于－80℃冰箱待检。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血清sSema4D水平，试剂盒购于上海鑫乐生物科技有限公司，严格按照试剂盒说明书进行操作。入院次日清晨空腹抽取肘静脉血4 m l，置于无菌干燥试管，采用BS－330迈瑞全自动生化分析仪检测空腹血糖(FPG)、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL－C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL－C)水平。

1．3统计学方法采用SPSS 17．0统计学软件进行数据分析，正态分布的计量资料以(x±s)表示，组间比较采用独立样本t检验;计数资料组间比较采用χ2检验;采用多因素Logistic回归分析冠心病发生的危险因素;采用受试者工作特征曲线(ROC曲线)评价sSema4D水平预测冠心病发生的价值。以P＜0．05为差异有统计学意义。

2结果

2．1临床资料两组患者年龄、高血压检出率比较，差异无统计学意义(P＞0．05)。两组患者性别、吸烟率、糖尿病检出率及FPG、TC、TG、HDL－C、LDL－C、sSema4D水平比较，差异均有统计学意义(P＜0．05，见表1)。冠心病组中，急性冠脉综合征患者sSema4D水平为(8．70±2．19)μg/L，高于稳定型冠心病患者的(6．50±2．60)μg/L，差异有统计学意义(t =6．034，P＜0．001)。

2．2冠心病发生危险因素分析以性别、吸烟、糖尿病、LDL－C及sSema4D为自变量，以是否患有冠心病为因变量行多因素Logistic回归分析，变量赋值见表2。结果显示，LDL－C、sSema4D进入回归方程，是冠心病发生的危险因素(P＜0．05，见表3)。

表2冠心病发生危险因素的Logistic回归分析变量赋值Table 2 Variable assignment of Logistic regression analysis of risk factors for coronary disease

表3冠心病发生危险因素的多因素Logistic回归分析结果Table 3 Result ofmultivariate Logistic regression analysis of risk factors for coronary disease

2．3 ROC曲线分析sSema4D水平预测冠心病发生的最佳截点为5．58μg/L，灵敏度为83．8%，特异度为78．1%，ROC曲线下面积0．913〔95%CI(0．847，0．978)，P＜0．001，见图1〕。

表1对照组和冠心病组患者临床资料比较Table 1 Comparison of clinical data between control group and CHD group

图1 sSema4D水平预测冠心病发生的ROC曲线Figure 1 ROC curves of sSema4D level predicting the risk of coronary disease

3讨论

随着研究的不断拓展和深入，预测冠心病发生的新指标逐渐被发现和证实。本研究结果显示，源自血小板活化脱落的sSema4D与冠心病的发生有关，冠心病患者血清sSema4D水平高于非冠心病患者，高水平sSema4D是冠心病发生的独立危险因素。

Sema4D是脑信号蛋白Semaphorin家族一员，2007年Zhu等［4］首次报道，鼠和人的血小板表面有Sema4D及其受体Plexin－B1、CD72表达，且在血小板活化时，Sema4D脱落释放入血形成120 kD的sSema4D。虽然其结构发生了改变，但其仍保留有跨膜型Sema4D的生物学活性［9－10］。小鼠Sema4D基因敲除后，其血小板胶原受体信号受损，血小板功能受到抑制，表现为血栓形成障碍和动脉粥样硬化减少［4］。因此，Sema4D水平升高被认为是血栓性疾病发生的危险因素。

Sema4D在血小板活化、动脉粥样硬化及血栓形成等血栓病理过程中发挥一定作用。动脉粥样硬化是血管内皮受损、脂质沉积、炎性反应、免疫反应共同作用的结果［11］。Zhu等［12］研究发现，低密度脂蛋白受体基因敲除〔LDLR(－/－)〕小鼠经高脂喂养6个月后主动脉内发生广泛的脂质沉积，而Sema4D敲除〔Sema4D (－/－)〕及LDLR(－/－)双基因敲除小鼠主动脉内脂质沉积明显减少，提示Sema4D表达缺失可缩小动脉粥样硬化斑块体积。

动脉粥样硬化斑块内新生血管形成与破裂在动脉粥样硬化发展和不稳定倾向密切相关。sSema4D是内皮细胞迁移至动脉粥样硬化斑块内的重要导向分子，其水平升高导致动脉粥样硬化斑块内新生血管增多，影响动脉粥样硬化斑块发生、发展与稳定性［13］。Yukawa等［14］将载脂蛋白E基因敲除〔ApoE(－/－)〕小鼠和ApoE (－/－)及Sema4D(－/－)双基因敲除小鼠正常饮食喂养6个月，免疫组织化学检测发现，后者较前者主动脉内的粥样硬化斑块体积缩小，粥样硬化斑块内新生血管形成减少，且巨噬细胞浸润较轻。Sema4D参与动脉粥样硬化过程的另一途径可能通过血小板活化过程实现，血小板活化后通过激活炎性反应、促进炎性细胞因子释放、介导其内皮黏附等参与动脉粥样硬化。

冠心病病理生理过程主要为冠状动脉粥样硬化使血管管腔狭窄或阻塞。Sema4D已被证实参与了动脉粥样硬化形成［4］，因此，Sema4D在冠心病的发生过程中发挥了一定作用。急性冠脉综合征为冠心病中的急、危类型，其主要发病机制是冠状动脉不稳定性斑块破裂、出血，继发急性血栓形成而使管腔严重狭窄或急性闭塞［15］。急性冠脉综合征患者早期表现为血小板的活化，血小板激活后Sema4D水平明显增加，进而Sema4D脱落释放，形成sSema4D［16］。释放入血的sSema4D通过促进血小板活化进一步促进血栓形成，形成恶性循环［4］。本研究结果显示，急性冠脉综合征患者血清sSema4D水平高于稳定型冠心病患者，提示sSema4D水平与冠状动脉急性血栓事件有关。

综上所述，高水平sSema4D影响动脉粥样硬化斑块的发生、发展及其稳定性，与冠心病、冠状动脉急性血栓事件的发生密切相关。本研究样本量较小，未能充分排除药物等影响sSema4D水平的因素，尚需大规模、多中心研究进一步探讨sSema4D水平与冠心病发生的关系。

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本文链接:

Semaphorins家族是一类以结构中具有sema区域为共同特征的蛋白，Sema4D是其成员之一，Sema4D与受体丛状蛋白B1和分化抗原簇72 (CD72)结合，通过多种信号转导途径，在神经系统的轴突导向，免疫系统中T、B淋巴细胞的活化和免疫调节中发挥关键作用。Sema4D在多种人体肿瘤组织中高表达，且对血管发生及肿瘤侵袭、转移起重要作用。

Correlation Between Serum sSema4D Level and Coronary Disease

KUANGLong，ZHAOLiang－ping，YOUTao，etal．DepartmentofCardiology，theSecondAffiliatedHospitalofSoochowUniversity，Suzhou215004，China

ObjectiveTo investigate the correlation between serum sSema4D level and coronary disease．M ethods Enrolled 297 patients who

treatment and coronary arteriography in the Second Affiliated Hospital of Soochow University due to chest distress and chest pain from May 2013 to May 2014．According to quantified coronary arteriography，the patientswere divided into two groups:CHD group(n=177)and control group(n=120)．The patients of CHD group were divided into stable CHD(n=95)and acute coronary syndrome(n=82)．At admission，peripheral venous blood was sampled to determine the levels of serum sSema4D by ELISA．Results CHD group and control group were not significantly different(P＞0．05)in age and hypertension prevalence．The two groups were significantly different in gender，smoking，diabetic prevalence，FPG，TC，TG，HDL－C，LDL－C and sSema4D level(P＜0．05)．In CHD group，the sSema4D level of acute coronary syndrome was(8．70±2．19)μg/L，higher than that of stable CHD which was(6．5±2．60)μg/L(t=6．034，P＜0．001)．Multivariate Logistic regression analysis showed that LDL－C〔OR=6．665，95%CI(1．206，36．844)，P=0．030〕and sSema4D〔OR=5．013，95%CI(1．807，13．904)，P=0．002〕were risk factors for coronary disease．The optimal point for sSema4D level predicting coronary diseaseswas5．58μg/L，and the sensitivity and specificity were83．8%and 78．1%，with an AUC of 0．913〔95%CI(0．847，0．978)，P＜0．001〕．Conclusion High serum sSema4D level is a risk factor for coronary disease and has high sensitivity and specificity of predicting coronary disease．

Coronary disease;Semaphorins;Risk factors

R 541．4

A

10．3969/j．issn．1007－9572．2015．36．003

2015－06－14;

2015－11－16)

(本文编辑:吴立波)

215004江苏省苏州市，苏州大学附属第二医院心脏内科

徐卫亭，215004江苏省苏州市，苏州大学附属第二医院心脏内科;E－mail:xuwt1968@aliyun．com