Slug和SRF在食管癌中的表达及临床意义

何喜 李伟 王志强

·论著·

Slug和SRF在食管癌中的表达及临床意义

何喜 李伟 王志强

目的研究锌指转录因子Slug和血清反应因子(SRF)在食管鳞癌中的表达及其临床意义。方法收集2010年9月至2013年9月食管鳞癌手术根治标本120例，术前均未行放疗、化疗，术后常规取食管鳞癌组织包埋制备蜡块;另取距离肿瘤5 cm的食管组织60例做正常对照。按食管鳞癌诊治规范分析相关资料。所有组织蜡块常规切片三张，一份行常规HE染色，常规病理观察;另两份采用免疫组化法(SABC)检测Slug和SRF蛋白的表达水平，分析其与肿瘤大小、分化程度、浸润深度、淋巴结转移等临床生物学行为的关系。结果Slug蛋白在食管鳞癌组中的阳性表达率显著高于正常食管黏膜组，差异有统计学意义(P＞0.05);SRF蛋白在食管鳞癌组中的阳性表达率显著高于正常食管黏膜组，差异有统计学意义(P＜0.05);Slug在食管鳞癌组织中的蛋白表达与肿瘤大小、分化程度、浸润深度以及淋巴结转移差异无统计学意义(P＞0.05);SRF在食管鳞癌中的蛋白表达与肿瘤大小、分化程度和是否淋巴结转移无关，差异无统计学意义(P＞0.05)。浸润深度中，浆膜+浆膜外组表达阳性率显著高于黏膜+肌层组(P＜0.05)。结论Slug、SRF在食管鳞癌中高表达，并与浸润深度相关，可能参与了食管鳞癌的发生、发展，并在食管鳞癌的侵袭中起到重要的调节作用。

食管鳞癌;转录因子;血清反应因子

食管鳞癌在世界上所有肿瘤中发病率居于第8位，致死率居于第6位。80%的食管鳞癌病例在发展中国家，而我国是食管鳞癌的高发国家，也是世界上食管鳞癌高病死率国家之一［1-3］。然而对食管癌侵袭转移的作用机制不甚清楚。上皮间质转化(epithelialmesenchymal transition，EMT)被认为是肿瘤转移的关

键阶段。Slug属于Snail家族的锌指蛋白转录因子，而血清反应因子(serum response factor，SRF)是属于MADS盒家族的转录因子。研究表明二者在EMT进程中可能起到重要的调控作用［4，5］。因此，研究Slug、SRF在食管鳞癌中的表达及其临床病理学意义。

1 资料与方法

1.1 一般资料收集2010至2013年唐山市人民医院(肿瘤医院)病理科食管鳞癌标本120例，均经病理证实。以肿瘤边缘5 cm以外正常食管黏膜60例作为对照组。

1.2 实验方法应用免疫组织化学染色法检测Slug、SRF在食管鳞癌中的表达。

1.3 统计学分析应用SPSS 13.0统计软件，计数资料采用χ2检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 Slug、SRF在食管癌及对照组中的表达所有病例经病理诊断证实后进行免疫组织化学染色，Slug蛋白阳性表达主要位于细胞核，部分呈胞浆表达，染色呈棕黄色。结果显示Slug蛋白正常食管黏膜阳性表达率为13.33%(8/60)。而在食管癌中阳性表达率为61.67%(74/120)，显著高于对照组，两者比较差异有统计学意义(P＜0.05)。SRF阳性表达主要位于细胞核，SRF在食管癌中阳性表达率为46.67%;而在正常食管黏膜阳性表达率为20.00%。两者比较差异有统计学意义(P＜0.05)。见表1、2、图1～4。

表1 Slug蛋白在食管鳞癌和对照组中的表达例

表2 SRF蛋白在食管鳞癌和对照组中的表达例

2.2 Slug、SRF蛋白在食管癌组织中表达的临床意义

Slug、SRF在食管癌组织中的表达随着食管癌分化程度的降低、浸润深度的增加和伴有淋巴结转移，Slug、SRF表达上调。其中Slug在低分化食管癌组织中阳性表达率为71.43%(30/42)，高于高+中分化组的56.41%(44/78);在27例侵及浆膜+浆膜外的组中阳性表达20例，阳性表达率为74.07%，高于浸润深度在浆膜内组中的51.52%(34/66);Slug在有淋巴结转移组中阳性表达率为72.00%(36/50)，高于无淋巴结组的54.29%(38/70)，但差异均无统计学意义(P＞0.05)。其中SRF在低分化食管癌中阳性表达率为61.90%(26/42)，高于高+中分化的ESCC的38.46%(30/78);在有淋巴结转移食管癌组中SRF阳性表达率为60.00%(30/50)，高于无淋巴结食管癌组的37.14%(26/70)，但这二个组差异均无统计学意义(P＞0.05)。在27例侵及浆膜+浆膜外组中阳性表达32例，阳性表达率为59.26%，高于浸润深度在浆膜内组中的36.36%(24/66)，差异有统计学意义(P＜0.05)。见表3。

图1 Slug在正常试管黏膜中阴性表达(免疫组化×200)

图2 Slug在食管鳞癌细胞核中阳性表达(免疫组化×200)

图3 SRF在正常试管黏膜中阴性表达(免疫组化×200)

图4 SRF在食管鳞癌中阳性表达(免疫组化× 200)

表3 Slug、SRF在食管鳞癌中表达的临床意义例

3 讨论

3.1 Slug在食管鳞癌中表达及其临床意义Slug是锌指蛋白转录因子Snail家族的成员，研究表明Slug在白血病细胞中高表达，具有抑制凋亡的作用;而在一些肿瘤中，Slug的表达与上皮标记物如桥粒斑蛋白(desmoplakin)、附膜蛋白Muc-1和细胞角蛋白(cytokeratin)18缺失表达或表达下调密切相关［6-9］。因此Slug的抗凋亡和诱导EMT的作用，可能是肿瘤细胞获得恶性增殖和侵袭能力的分子机制之一;在乳腺癌、结肠癌、肝癌、胰腺癌中均检测到Slug的异常表达。体外研究也发现，过表达Slug能够促进肿瘤细胞的增殖，抑制其凋亡。

本研究显示，Slug蛋白阳性表达主要位于细胞核。在正常食管黏膜中大部分呈阴性表达，而在食管癌中大部分呈阳性表达，两者比较差异具有统计学意义(P＜0.05)。Slug在食管癌中的表达与肿瘤分化程度、浸润深度和是否淋巴结转移无关(P＞0.05)。但随着ESCC分化程度的降低、浸润深度的增加和伴有淋巴结转移，Slug表达上调。随经统计学分析无统计学差异，但仍能对Slug的作用机制提供一定的实验依据。

3.2 SRF在食管鳞癌中的表达及其临床意义SRF是最近发现一类与EMT关系较为紧密的核转录因子。与Slug作用类似，在体外实验中，过表达SRF的肿瘤细胞(包括肝癌HLE、SH-J1细胞)均表现出生长和增殖能力的显著增加，且表达间质标记物(vimentin)，侵袭和迁移的能力增强，在甲状腺乳头状癌、未分化癌和结节性甲状腺肿的阳性表达率分别为79%、67%和33%，提示SRF的表达与肿瘤的发生、发展密切相关［10-12］。本研究显示，SRF在食管癌中阳性表达率显著高于对照组，两者比较差异有统计学意义(P＜0.05)。SRF在食管癌的表达与肿瘤大小、分化程度和是否淋巴结转移无关(P＞0.05)。但随着ESCC分化程度的降低、浸润深度的增加和伴有淋巴结转移，SRF表达上调。提示其高表达预示了食管鳞癌细胞侵袭能力的升高。

综上所述，Slug、SRF均在食管鳞癌的发生、发展中起到重要的调节作用，且与肿瘤侵袭、转移具有一定的关联。可能共同参与了EMT在食管鳞癌中的发展，而其具体机制有待于进一步研究。

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Expression and clinical significance of Slug and SRF in esophageal squamous cell carcinoma

HE Xi，LI Wei，WANG

Zhiqiang．People’s Hospital of Tangshan City，Hebei，Tangshan 063000，China

ObjectiveTo investigate the expression and clinical significance of zinc finger transcription factor-Slug and serum response factor(SRF)in esophageal squamous cell carcinoma(ESCC).MethodsOne hundred and twenty specimens from ESCC radical surgery without preoperative chemotherapy and radiotherapy were collected from September 2010 to September 2013.All of ESCC tissues(ESCC group)were embedded by paraffin after operation.The other 60 cases of gastric tissues(control group)that were 5 cm away from ESCC tissue were served as normal control group.The expression levels of Slug and SRF protein were detected by immunohistochemistry(SABC method).At the same time，the correlations between the expression levels of Slug＆SRF and clinical biological behavior of ESCC，including tumor size，differentiation degree，depth of infiltration，lymph node metastasis were analyzed.ResultsThe positive expression rates of Slug and SRF protein in ESCC group were 61.67%(74/120)and 46.67%(56/120)，respectively，which were significantly higher than those in control group(13.13%，4/30)and(20.00%，6/30)，respectively(P＜0.05).There was no significant correlation between the expression levels of Slug protein and tumor size，differentiation degree，depth of infiltration，lymph node metastasis(P＞0.05);nor was SRF protein(P＞0.05).However the expression levels of Slug and SRF protein of ESCC in serous membrane +serous membrane outside group were significantly higher than those in mucous membrane+muscular layer group(P＜0.05).ConclusionThe overexpression of Slug and SRF may be related to the depth of tumor infiltration，which may be involved in the pathogenesis and development of ESCC and may play an important role in the invasion of ESCC.

ESCC;transcription factor;serum response factor

R 735.1

A

1002-7386(2015)02-0189-03

10．3969/j．issn．1002－7386．2015．02．008

2014-06-15)

063000河北省唐山市人民医院