周丽红,周丽,周莉微
长春生物制品研究所有限责任公司
中药黄芪抗病毒作用
周丽红,周丽,周莉微
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中药黄芪能抑制水泡性口炎病毒(VSV)和单纯疱疹I型病毒(HSV-1)。实验证明不同浓度的黄芪对不同的病毒作用结果不同,VSV病毒的抑制效价高于HSV-1病毒的抑制效价,黄芪的浓度越高,对病毒的抑制效果越好。
中药黄芪;病毒(VSV,HSV-1);w ish细胞;微量细胞病变法
黄芪可使冠状血管,肾脏血管扩张,有强心利尿和降血压作用,能改善皮肤血液循环及营养状态,使死细胞恢复活力,可用于治疗慢性溃疡,有兴奋中枢神经作用,能保护肝脏,防止肝糖原减少,对消除尿蛋白有一定疗效。对葡萄球菌,肺炎双球菌,溶血性链球菌志贺氏痢疾杆菌,炭疽杆菌,白喉杆菌等有抗菌作用。本文是研究黄芪对病毒的抑制作用。
黄芪提取液(长春中药厂提供);水疱性口炎病毒(VSV)(北京病毒所提供);单纯疱疹I型病毒(HSV-1)(北京病毒所提供);人羊膜细胞(WISH细胞)(长春生物制品所细胞因子室提供);MEM完全培养液(10%牛血清)(长春生物制品所细胞因子室提供);MEM攻毒培养液(3%牛血清)(长春生物制品所细胞因子室提供);PBS(长春生物制品所细胞因子室提供);消化液(长春生物制品所细胞因子室提供)
2.1 将黄芪液用M E M攻毒培养液分别稀释为100%80% 40%20%四个浓度的样品,做倍比稀释,备用。
2.2 细胞制备
将wish细胞用完全培养液配制成浓度为每1 m l含2.5 X 105-3.5 X 105个细胞的细胞悬液,接种于9 6孔细胞培养板中,每孔加100ul,于37℃5%二氧化碳条件下培养2 4小时形成单层细胞。
2.3 攻毒
48小时,把所有液体倒掉,除细胞对照组每孔加100ul攻毒液,其他各孔加100ul病毒(100CCID50),放35℃5%二氧化碳培养箱,待病毒对照组病变为+++-++++时,细胞对照组为阴性,判定其结果,计算效价。
从表一可见,黄芪的浓度越高抑制病毒(VSV)效价越高,浓度为100%的黄芪对VSV病毒试验的平均效价为64 IU∕m l,浓度为80%的黄芪对VSV病毒试验的平均效价为44IU∕ml,浓度40%的黄芪对VSV病毒试验的平均效价为36IU∕m l,浓度为20%的黄芪对VSV病毒试验的平均效价为16IU∕ml,浓度越高抑制效价越高,2次实验结果基本无区别,试验重复性很好,结果可靠。
从表二可见,浓度为100%的黄芪对(HSV-1)病毒的抑制效价为36 IU∕m l,浓度为80%的黄芪对病毒的抑制效价为30IU∕m l,浓度40%的黄芪对(HSV-1)病毒试验的平均效价为16IU∕ml,浓度为20%的黄芪对(HSV-1)病毒试验的平均效价为6IU∕ml,结果明显。实验证明黄芪对HSV-1型病毒抑制作用明显,说明黄芪对病毒有抑制作用。
综上所诉,黄芪有明显的抗病毒(VSV,HSV-1)作用。实验证明不同浓度的黄芪对不同的病毒结果不同,VSV病毒的抑制效价高于HSV-1病毒的抑制效价,可能和病毒的毒力有关,黄芪的浓度越高,对病毒的抑制效果越好。本实验证明中药黄芪对V S V病毒及HSV-1病毒具有抑制作用,试验为预防和治疗疾病提供依据。
表二不同浓度黄芪对H S V-1病毒的抑制作用