雄激素受体和NF-κB在人乳腺癌中的表达及临床意义

陈双龙，高德宏，欧阳忠，杨清默

（厦门大学附属第一医院乳腺外科，福建厦门 361003）

雄激素受体和NF-κB在人乳腺癌中的表达及临床意义

陈双龙，高德宏，欧阳忠*，杨清默

（厦门大学附属第一医院乳腺外科，福建厦门 361003）

*通信作者（corresponding author）:oyzh_ouyang@163.com

雄激素受体（androgen receptor，AR）可在70%以上的乳腺癌中表达，与乳腺癌的发生、发展和转移密切相关［1］。核因子κB（nuclear factor kappa B，NF-κB）是一种重要的转录因子，其主要生物功能是通过调控一系列基因表达参与炎性反应、细胞增殖和细胞凋亡的调节。NF-κB在肿瘤发生和发展中发挥着一定的作用［2］。在不同乳腺癌分子亚型中AR与NF-κB的表达是否有差异，该差异是否可作为不同乳腺癌分子亚型的预后指标或治疗靶点仍不清楚。

本研究检测人乳腺癌组织中AR和NF-κB的表达，探讨AR和NF-κB与乳腺癌临床病理特征、分型与淋巴结转移的关系，揭示AR、NF-κB与乳腺癌不同分子分型的关系，为不同乳腺癌分子亚型预后和治疗靶点的选择提供依据。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 标本来源及病例分组:收集厦门大学附属第一医院病理科2010年1月至2012年2月的乳腺癌手术标本204例，女性，发病年龄34～74岁。其中101例三阴型乳腺癌及103例非三阴型乳腺癌，所有标本均经病理鉴定证实。

1.1.2 试剂:兔抗人AR单克隆抗体、兔抗人NF-κB磷酸化P65（p-P65）单克隆抗体、兔抗人β-actin单克隆抗体、辣根过氧化物酶标记的羊抗兔IgG以及Western blot发光试剂（Santa Cruz公司）。

1.2 方法

1.2.1 病理组织学观察:乳腺癌及癌周组织均经病理学诊断证实为浸润性导管癌，采用WHO（2002版）诊断标准进行乳腺癌组织学分级，常规病理切片，HE染色，观察组织学情况。

1.2.2 Western blot检测AR和NF-κB蛋白表达情况:提取组织总蛋白，Bradford法检测蛋白浓度。经SDS-PAGE电泳后，电转至PVDF膜，分别用兔抗人AR和NF-κB P65单克隆抗体进行杂交，加入辣根过氧化物酶标记的羊抗兔IgG反应后，显色后凝胶成像系统检测蛋白荧光。β-actin作为内参，目的蛋白表达水平用目的蛋白/内参吸光度比值进行表示。

1.2.3 统计学分析:应用SPSS 13.0软件分析处理数据，采用χ2检验，数据用均数±标准差（±s）表示，组间对比采用t检验;相关性分析采用Spearman检验和直线相关分析。

2 结果

2.1 AR蛋白在乳腺癌中的表达水平及其与临床病理特征的关系:101例三阴乳腺癌细胞中有28例AR呈阳性表达（图1），表达量为2.76±0.43;而103例非三阴乳腺癌中有76例呈阳性表达，表达量为4.24±1.03。在三阴型乳腺癌中，组织分级高的患者AR表达明显低于组织分级低的患者（P＜0.05），腋窝淋巴结转移患者明显低于无腋窝淋巴结转移患者（P＜0.01）（表1）。

2.2 NF-κB P65蛋白在乳腺癌中的表达水平及其与临床病理特征的关系:101例三阴乳腺癌细胞中有76例NF-κB P65呈阳性表达（图2），表达量为2.23±0.64，而103例非三阴乳腺癌中仅有49例呈阳性表达，表达量为1.32±0.31。在三阴乳腺癌中，组织分级低（P＜0.05）和淋巴结转移（P＜0.05）的患者NF-κB P65阳性率高;在非三阴乳腺癌中，仅与淋巴结转移（P＜0.05）相关（表2）。

图1 乳腺癌及癌旁乳腺组织AR的表达Fig 1 Expression of AR in or around mammary cancer tissue

表1 AR与三阴性和非三阴性乳腺癌临床病理特征的关系Table 1 Analysis of AR in triple-negative and nontriplenegative breast cancer

图2 乳腺癌及癌旁乳腺组织NF-κB P65的表达Fig 2 Expression of NF-κB P65 in or around mammary cancer tissue

3 讨论

最新研究表明AR和NF-κB在乳腺癌的生长和发展中具有重要作用［3］。雄激素通过降低抗凋亡蛋白Bcl-2的表达促使细胞凋亡或降低细胞周期调节蛋白cyclin D1的表达，影响细胞周期，抑制细胞增殖，AR表达与组织分级明显相关［4］。在乳腺癌中NF-κB的表达也异常活跃，其在乳腺癌中的差异表达及其对乳腺癌预后意义，目前国内鲜见报道。本研究表明NF-κB P65在三阴型和非三阴型乳腺癌表达率存在显著差异。NF-κB P65的表达水平与三阴型乳腺癌的组织分级和淋巴结转移呈正相关。而在非三阴型乳腺癌中NF-κB的表达仅与淋巴结转移存在一定的相关。在三阴和非三阴乳腺癌中NF-κB与临床病理特征不尽相同，说明NF-κB在三阴和非三阴乳腺癌的发生发展及预后中所起作用也有差异，NF-κB在三阴乳腺癌高表达预示其可能与三阴乳腺癌发病有关。提示AR和NF-κB可望作为三阴乳腺癌的重要预后指标，成为三阴型乳腺癌亚群治疗靶点。

表2 NF-κB P65与三阴性和非三阴性乳腺癌临床病理特征的关系Table 2 Analysis of NF-κB P65 in triple-negative and nontriple-negative breast cancer

［1］刘晓珍，牛昀.雄激素受体与乳腺癌分子分型的研究进展［J］.中华病理学杂志，2014，43:498-500.

［2］陈学东，钱立元，易剪梅，等.三阴乳腺癌雄激素受体表达与瘤体大小、淋巴转移的关系［J］.中国普通外科杂志，2014，23:695-697.

［3］Song L，Lin C，Gong H，et al.miR-486 sustains NF-κB activity by disrupting multiple NF-κB-negative feedback loops［J］.Cell Res，2012，23:274-289.

［4］刘敏，李琳，刘峰，等.人乳腺癌 MCF-7细胞中TRIM22下调NF-κB的表达［J］.沈阳药科大学学报，2013，30:972-976.

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A

10.16352/j.issn.1001-6325.2015.09.024

1001-6325（2015）09-1259-02

2015-03-19

2015-05-28

福建省卫生厅青年科研课题（2012-2-77）